近年來,隨著海產(chǎn)品加工業(yè)的蓬勃發(fā)展,產(chǎn)生了大量的副產(chǎn)品,這些副產(chǎn)品要么被丟棄,要么僅僅用作動物飼料或肥料。因此,迫切需要利用這些副產(chǎn)品生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品。海洋資源生物活性肽具有許多生理功能,包括抗氧化、抗腫瘤、抗菌、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制、護肝和促傷口愈合等活性。此外,加工廢棄物中的魚皮、魚骨、魚鱗等中含有豐富的膠原蛋白。因此,從海產(chǎn)品加工廢棄物中提取膠原蛋白或生物活性肽可為其高值化利用提供新的途徑,從而減少環(huán)境污染,并創(chuàng)造巨大的經(jīng)濟效益。本實驗以日本黃姑魚魚皮為原料,提取膠原蛋白并測定其理化特性和功能特性,為其在化妝品添加劑或生物材料的應(yīng)用中奠定基礎(chǔ)。此外,利用日本黃姑魚魚皮制備膠原蛋白肽,測定其理化特性和功能特性,為其促傷口愈合奠定基礎(chǔ)。本實驗的主要研究結(jié)果如下:(1)利用單因素和響應(yīng)面試驗對日本黃姑魚魚皮酶溶性膠原蛋白(PSC)的酶解條件進行優(yōu)化,經(jīng)過回歸擬合得到加酶量、料液比和酶解時間的二次多項回歸方程為:提取率=83.73+3.53X₁+1.47X₂+1.78X₃-0.11X₁X

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 膠原蛋白的類型
    1.2 膠原蛋白的結(jié)構(gòu)特點
    1.3 膠原蛋白的提取方法
    1.4 膠原蛋白的理化性質(zhì)
        1.4.1 膠原蛋白的氨基酸組成
        1.4.2 膠原蛋白的熱穩(wěn)定性
        1.4.3 膠原蛋白其它理化性質(zhì)
    1.5 膠原蛋白的應(yīng)用
        1.5.1 膠原蛋白在食品中的應(yīng)用
        1.5.2 膠原蛋白在化妝品中的應(yīng)用
        1.5.3 膠原蛋白在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
    1.6 海洋膠原蛋白肽的制備方法
    1.7 海洋膠原蛋白肽的生物活性
        1.7.1 抗衰老性
        1.7.2 抗氧化活性
        1.7.3 抗菌活性
        1.7.4 促傷口愈合性
    1.8 本研究的目的和意義
第二章 日本黃姑魚魚皮酶溶性膠原蛋白提取工藝條件的優(yōu)化
    2.1 材料
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 儀器與設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 日本黃姑魚魚皮預(yù)處理
        2.2.2 酶法提取日本黃姑魚魚皮膠原蛋白
        2.2.3 單因素試驗
        2.2.4 響應(yīng)面試驗設(shè)計
        2.2.5 膠原蛋白含量的測定
        2.2.6 統(tǒng)計方法
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定結(jié)果
        2.3.2 日本黃姑魚魚皮中羥脯氨酸含量的測定結(jié)果
        2.3.3 單因素實驗結(jié)果
        2.3.4 響應(yīng)面對PSC提取條件的優(yōu)化結(jié)果
    2.4 結(jié)論
第三章 日本黃姑魚魚皮酸溶性膠原蛋白和酶溶性膠原蛋白的理化特性研究
    3.1 材料
        3.1.1 細胞與樣品
        3.1.2 藥物與試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 方法
        3.2.1 細胞培養(yǎng)
        3.2.2 酸法提取ASC
        3.2.3 氨基酸分析
        3.2.4 熱變性溫度的測定
        3.2.5 SDS-PAGE分析
        3.2.6 傅里葉紅外光譜分析
        3.2.7 電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析
        3.2.8 水合性質(zhì)測定
        3.2.9 細胞毒性檢測(MTT法)
        3.2.10 細胞致敏性分析(乳酸脫氫酶(LDH)釋放法)
        3.2.11 倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)
        3.2.12 統(tǒng)計方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 ASC和 PSC提取率結(jié)果
        3.3.2 氨基酸組成結(jié)果
        3.3.3 熱變性溫度測定結(jié)果
        3.3.4 SDS-PAGE分析結(jié)果
        3.3.5 紅外光譜分析結(jié)果
        3.3.6 電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析結(jié)果
        3.3.7 PSC的吸濕保濕性質(zhì)測定結(jié)果
        3.3.8 PSC對小鼠成纖維細胞NIH-3T3 毒性分析結(jié)果
        3.3.9 PSC對小鼠成纖維細胞NIH-3T3 過敏性分析結(jié)果
        3.3.10 形態(tài)學(xué)分析結(jié)果
    3.4 結(jié)論
第四章 膠原蛋白肽的制備及其功能活性評價
    4.1 材料
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 藥物與試劑
        4.1.3 主要儀器
    4.2 方法
        4.2.1 MCPs的制備
        4.2.2 MCPs的分子量測定
        4.2.3 MCPs的氨基酸組成測定
        4.2.4 抗氧化活性評價
        4.2.5 細胞增殖實驗
        4.2.6 細胞劃痕實驗
        4.2.7 Western Blot檢測蛋白表達情況
        4.2.8 統(tǒng)計方法
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 酶種篩選結(jié)果
        4.3.2 單因素實驗結(jié)果
        4.3.3 MCPs的分子量分布測定結(jié)果
        4.3.4 MCPs的氨基酸組成測定結(jié)果
        4.3.5 MCPs的抗氧化活性測定
        4.3.6 細胞增殖實驗結(jié)果
        4.3.7 細胞劃痕實驗結(jié)果
        4.3.8 Western Blot檢測蛋白表達結(jié)果
    4.4 結(jié)論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果



本文編號：3855688