氨基甲酸乙酯抗體的制備與免疫分析方法研究
發(fā)布時(shí)間:2023-04-10 23:11
氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate,EC)在發(fā)酵食品生產(chǎn)和貯藏的全過(guò)程均可產(chǎn)生。2007年,世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(International Agency for Research on Cancer,IARC)將氨基甲酸乙酯列為2A類致癌物,因此對(duì)發(fā)酵制品生產(chǎn)和貯藏全程的氨基甲酸乙酯濃度進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控和檢測(cè)顯得尤為重要。傳統(tǒng)的儀器檢測(cè)法不適宜大規(guī)模的在線檢測(cè),而運(yùn)用免疫法則可以滿足生產(chǎn)線現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)檢測(cè)。本論文成功制備了氨基甲酸乙酯半抗原、人工抗原和多克隆抗體,對(duì)多克隆抗體的效果進(jìn)行了評(píng)價(jià),并初步建立了氨基甲酸乙酯間接酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測(cè)方法。主要研究?jī)?nèi)容如下:(1)根據(jù)氨基甲酸乙酯的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),按照半抗原的設(shè)計(jì)要求和原理,通過(guò)向氨基甲酸乙酯分子中引入苯環(huán)特異性結(jié)構(gòu)和直鏈連接臂,設(shè)計(jì)并合成了三種氨基甲酸乙酯半抗原ECH1、ECH2和ECH3,并通過(guò)核磁共振氫譜(1H NMR)和核磁共振碳譜(13C NMR)結(jié)構(gòu)表征。(2)根據(jù)半抗原的結(jié)構(gòu)特征,選擇碳二亞胺法將合成的三種氨基甲酸乙酯半抗原分別與大分子載體牛血清蛋白(BSA)進(jìn)行偶聯(lián),制得人工抗原ECA1、ECA2和...
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 氨基甲酸乙酯的概述
1.1.1 氨基甲酸乙酯的理化特性
1.1.2 氨基甲酸乙酯的形成過(guò)程
1.1.3 氨基甲酸乙酯的致癌機(jī)理
1.2 國(guó)內(nèi)外食品中氨基甲酸乙酯相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及殘留水平
1.2.1 食品中氨基甲酸乙酯的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
1.2.2 食品中氨基甲酸乙酯的殘留水平
1.3 食品中氨基甲酸乙酯檢測(cè)方法的研究進(jìn)展
1.3.1 色譜法
1.3.2 光譜法
1.3.3 其它方法
1.4 免疫分析法的理論基礎(chǔ)
1.4.1 人工抗原的制備與效果評(píng)價(jià)
1.4.2 酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)實(shí)驗(yàn)
1.5 本論文的主要內(nèi)容及意義
1.5.1 技術(shù)路線與主要內(nèi)容
1.5.2 目的及意義
第二章 氨基甲酸乙酯半抗原的合成與表征
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 主要儀器
2.1.2 主要試劑
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 三種氨基甲酸乙酯半抗原的合成
2.2.2 氨基甲酸乙酯半抗原的結(jié)構(gòu)鑒定
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 三種半抗原的結(jié)構(gòu)表征
2.3.2 討論
2.4 小結(jié)
第三章 氨基甲酸乙酯人工抗原的制備與評(píng)價(jià)
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 主要儀器
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要溶液
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的合成
3.2.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的鑒定與評(píng)價(jià)
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的初步鑒定
3.3.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的偶聯(lián)比及蛋白含量的計(jì)算
3.3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 氨基甲酸乙酯多克隆抗體的制備、評(píng)價(jià)與免疫分析方法的建立
4.1 試驗(yàn)材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 主要試劑
4.1.3 主要溶液
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 多克隆抗體的制備
4.2.2 間接ELISA法評(píng)價(jià)多克隆抗體免疫特性
4.2.3 氨基甲酸乙酯ELISA檢測(cè)法的初步建立
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 多克隆抗體免疫效果評(píng)價(jià)
4.3.2 ELISA檢測(cè)法的初步建立
4.3.3 討論
4.4 小結(jié)
第五章 全文結(jié)論
5.1 主要結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄 A 國(guó)內(nèi)外發(fā)酵食品中EC含量
附錄 B 氨基甲酸乙酯包被原的制備
附錄 C EC的4-(二苯基羥甲基)苯甲酸衍生物的制備與表征
致謝
作者簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3788900
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 氨基甲酸乙酯的概述
1.1.1 氨基甲酸乙酯的理化特性
1.1.2 氨基甲酸乙酯的形成過(guò)程
1.1.3 氨基甲酸乙酯的致癌機(jī)理
1.2 國(guó)內(nèi)外食品中氨基甲酸乙酯相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及殘留水平
1.2.1 食品中氨基甲酸乙酯的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
1.2.2 食品中氨基甲酸乙酯的殘留水平
1.3 食品中氨基甲酸乙酯檢測(cè)方法的研究進(jìn)展
1.3.1 色譜法
1.3.2 光譜法
1.3.3 其它方法
1.4 免疫分析法的理論基礎(chǔ)
1.4.1 人工抗原的制備與效果評(píng)價(jià)
1.4.2 酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)實(shí)驗(yàn)
1.5 本論文的主要內(nèi)容及意義
1.5.1 技術(shù)路線與主要內(nèi)容
1.5.2 目的及意義
第二章 氨基甲酸乙酯半抗原的合成與表征
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 主要儀器
2.1.2 主要試劑
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 三種氨基甲酸乙酯半抗原的合成
2.2.2 氨基甲酸乙酯半抗原的結(jié)構(gòu)鑒定
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 三種半抗原的結(jié)構(gòu)表征
2.3.2 討論
2.4 小結(jié)
第三章 氨基甲酸乙酯人工抗原的制備與評(píng)價(jià)
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 主要儀器
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要溶液
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的合成
3.2.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的鑒定與評(píng)價(jià)
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的初步鑒定
3.3.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的偶聯(lián)比及蛋白含量的計(jì)算
3.3.3 討論
3.4 小結(jié)
第四章 氨基甲酸乙酯多克隆抗體的制備、評(píng)價(jià)與免疫分析方法的建立
4.1 試驗(yàn)材料
4.1.1 主要儀器
4.1.2 主要試劑
4.1.3 主要溶液
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 多克隆抗體的制備
4.2.2 間接ELISA法評(píng)價(jià)多克隆抗體免疫特性
4.2.3 氨基甲酸乙酯ELISA檢測(cè)法的初步建立
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 多克隆抗體免疫效果評(píng)價(jià)
4.3.2 ELISA檢測(cè)法的初步建立
4.3.3 討論
4.4 小結(jié)
第五章 全文結(jié)論
5.1 主要結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄 A 國(guó)內(nèi)外發(fā)酵食品中EC含量
附錄 B 氨基甲酸乙酯包被原的制備
附錄 C EC的4-(二苯基羥甲基)苯甲酸衍生物的制備與表征
致謝
作者簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3788900
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