魚類中富含豐富的蛋白質(zhì),其中蘊含著多種已知和未知的過敏原。這些過敏原蛋白質(zhì)對消化酶常常具有抵抗作用,研究魚類蛋白質(zhì)在體外模擬胃液消化中的穩(wěn)定性對預(yù)測蛋白是否具有致敏性具有重要的參考價值。本文通過體外模擬胃液消化得到牙鲆魚和大黃魚蛋白質(zhì)酶解液,通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)、介孔材料分離富集兩種魚蛋白酶解液中耐消化的蛋白質(zhì)。結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)及蛋白質(zhì)序列同源性的分析方法,研究了牙鲆魚和大黃魚酶解液中含有的潛在過敏原,為食物中潛在過敏原的篩選提供參考。研究結(jié)果如下:(1)將提取的牙鲆魚、大黃魚蛋白質(zhì)進行體外模擬胃液消化。通過SDS-PAGE凝膠電泳分離耐胃蛋白酶酶解的蛋白質(zhì),運用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS/MS)技術(shù)對蛋白質(zhì)進行分析。在牙鲆魚中共鑒定到5種耐胃蛋白酶酶解的蛋白質(zhì),大黃魚中共鑒定到7種耐胃蛋白酶酶解的蛋白質(zhì)。其中來源于牙鲆魚的原肌球蛋白alpha-1以及來源于大黃魚的原肌球蛋白alpha-1和alpha-4分別與已知過敏原Ore m 4的蛋白質(zhì)序列進行對比,三組蛋白質(zhì)的一致性分別為96.5%、81%和78%。相似性分別...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 食物過敏原
        1.1.1 食物過敏反應(yīng)機制
        1.1.2 水產(chǎn)品中主要的過敏原
        1.1.3 控制食物過敏的有效方法
        1.1.4 食物過敏原的檢測方法
    1.2 蛋白質(zhì)組學(xué)
        1.2.1 蛋白質(zhì)組學(xué)概述
        1.2.2 蛋白質(zhì)組學(xué)的研究策略
    1.3 介孔材料
    1.4 本文研究內(nèi)容
第二章 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)篩選魚蛋白質(zhì)中潛在過敏原
    2.1 引言
    2.2 試劑與儀器
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 蛋白樣品的制備
        2.3.2 對魚蛋白進行體外模擬胃液消化
        2.3.3 SDS-PAGE凝膠電泳
        2.3.4 魚蛋白的酶解與膠內(nèi)酶解
        2.3.5 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析
        2.3.6 數(shù)據(jù)檢索與分析
        2.3.7 蛋白質(zhì)同源性分析
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 魚蛋白質(zhì)體外模擬胃液消化
        2.4.2 魚蛋白質(zhì)的LC-MS/MS分析
        2.4.3 耐酶解蛋白質(zhì)的LC-MS/MS分析
        2.4.4 魚蛋白中耐消化蛋白質(zhì)同源性分析
    2.5 小結(jié)
第三章 介孔材料對魚類蛋白質(zhì)酶解液吸附性能研究
    3.1 引言
    3.2 試劑與儀器
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 實驗儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 介孔材料的制備
        3.3.2 介孔材料的表征
        3.3.3 介孔材料對魚蛋白質(zhì)的吸附性能研究
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 介孔材料的表征
        3.4.2 介孔材料吸附性能的研究
    3.5 小結(jié)
第四章 介孔材料吸附法與超濾法分離富集耐酶解蛋白質(zhì)
    4.1 引言
    4.2 試劑與儀器
        4.2.1 實驗試劑
        4.2.2 實驗儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 魚蛋白質(zhì)樣品的制備
        4.3.2 魚蛋白體外模擬胃液消化
        4.3.3 介孔材料的制備
        4.3.4 酶解液中耐酶解蛋白質(zhì)的分離富集
        4.3.5 蛋白濃度的測定
        4.3.6 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析
        4.3.7 數(shù)據(jù)檢索與分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 蛋白濃度測定
        4.4.2 超濾法富集耐酶解蛋白質(zhì)的LC-MS/MS分析
        4.4.3 介孔材料分離耐酶解蛋白質(zhì)的LC-MS/MS分析
    4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3773897