流行病學(xué)和臨床研究發(fā)現(xiàn)膳食中的反式脂肪酸(TFA)會(huì)提高血脂含量,促發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化(AS),從而誘導(dǎo)心血管疾病(CVD)的產(chǎn)生,因此各國都出臺(tái)了相應(yīng)的政策限制工業(yè)加工食品中TFA的含量。但是TFA的來源有兩種,一種是工業(yè)來源反式脂肪酸(I-TFA),另一種是反芻動(dòng)物反式脂肪酸(R-TFA)。CVD是目前影響人類健康最重大的慢性疾病,CVD死亡率占所有慢性疾病死亡率的50%左右。已知I-TFA會(huì)增加心血管疾病的患病風(fēng)險(xiǎn),而R-TFA對(duì)心血管健康的影響尚不明確。脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)是研究脂質(zhì)代謝與CVD的重要方法。所以,在全球限制TFA的大環(huán)境下,基于脂質(zhì)組學(xué)方法分析I-TFA和R-TFA對(duì)肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響、特別是關(guān)于對(duì)心血管健康的影響是非常必要的,對(duì)闡明含TFA食品的安全性、指導(dǎo)合理膳食有著重要意義。因此,本課題以人正常肝細(xì)胞LO2細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,選擇9t16:1和11t18:1代表R-TFA,9t18:1代表I-TFA,此外,依據(jù)健康人血液(HHB)、心血管疾病人血液(CHB)、牛奶(CM)以及氫化大豆油(HSO)中TFA的比例分別配置了 4種反式脂肪酸混合物(TFA-mixture),將...

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞符號(hào)注釋
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 概述
        1.2.1 反式脂肪酸
        1.2.2 反式脂肪酸與心血管疾病
        1.2.3 脂質(zhì)組學(xué)
        1.2.4 磷脂酶A2與花生四烯酸代謝通路
    1.3 課題研究的價(jià)值、意義及主要內(nèi)容
        1.3.1 課題來源
        1.3.2 研究?jī)r(jià)值和意義
        1.3.3 主要研究?jī)?nèi)容
        1.3.4 技術(shù)路線
第2章 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞功能的影響
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 LO2細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 反式脂肪酸的配制
        2.3.3 CCK8測(cè)細(xì)胞活力
        2.3.4 脂肪酸分析
        2.3.5 細(xì)胞內(nèi)ROS測(cè)定
        2.3.6 細(xì)胞膜完整性測(cè)定
        2.3.7 細(xì)胞內(nèi)甘油三酯和總膽固醇測(cè)定
        2.3.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞活力的影響
        2.4.2 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞脂肪酸組成的影響
        2.4.3 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞內(nèi)ROS相對(duì)含量的影響
        2.4.4 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞膜完整性的影響
        2.4.5 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞甘油三酯含量的影響
        2.4.6 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞總膽固醇含量的影響
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
第3章 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞脂質(zhì)輪廓的影響
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 LO2細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.3.2 細(xì)胞樣本的處理與收集
        3.3.3 脂質(zhì)的提取
        3.3.4 蛋白含量的測(cè)定
        3.3.5 全脂質(zhì)測(cè)定方法
        3.3.6 氧化脂質(zhì)測(cè)定方法
        3.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 反式脂肪酸對(duì)LO2細(xì)胞脂質(zhì)輪廓的影響
        3.4.2 反式脂肪酸對(duì)LO2細(xì)胞氧化脂質(zhì)組成和含量的影響
        3.4.3 差異代謝物分析
        3.4.4 KEGG代謝通路分析
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第4章 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞磷脂酶A2和花生四烯酸代謝通路的影響
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 LO2細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.3.2 藥物處理及分組
        4.3.3 蛋白提取與測(cè)定
        4.3.4 蛋白免疫印記(Western blot)檢測(cè)蛋白表達(dá)
        4.3.5 數(shù)據(jù)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞磷脂酶A2蛋白表達(dá)的影響
        4.4.2 磷脂酶A2參與反式脂肪酸誘導(dǎo)LO2細(xì)胞內(nèi)花生四烯酸代謝通路
    4.5 討論
    4.6 小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
        5.1.1 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞功能的影響
        5.1.2 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞脂質(zhì)輪廓的影響
        5.1.3 反式脂肪酸對(duì)人正常肝細(xì)胞磷脂酶A2和花生四烯酸代謝通路的影響
    5.2 進(jìn)一步工作方向
創(chuàng)新之處
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果



本文編號(hào)：3770025