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姜黃素對獼猴桃灰霉病抑制作用機理研究

發(fā)布時間:2023-03-24 01:52
  姜黃素具有廣譜的抗菌活性,灰霉病是獼猴桃采后最重要的真菌病害。本文中用姜黃素對灰霉菌和獼猴桃進行處理,研究了其對獼猴桃灰霉病的抑制作用。主要評價了不同濃度的姜黃素對獼猴桃灰霉病的抑制效果和對獼猴桃貯藏品質的影響,分析姜黃素對灰霉病的抑制作用機理。本研究得到以下結果:1、姜黃素處理后的獼猴桃發(fā)病率以及病斑的直徑均顯著減小,同時姜黃素處理后,獼猴桃表皮細胞中灰霉菌孢子的萌發(fā)以及菌絲的生長顯著受到抑制。體外培養(yǎng)下姜黃素對病原菌孢子萌發(fā)、芽管伸長以及菌絲生長都具有顯著抑制作用,并且在一定范圍內,抑制效果隨著姜黃素濃度的增加而愈加明顯。2、姜黃素可誘導灰霉菌絲產(chǎn)生大量ROS,并引發(fā)細胞凋亡,使用ROS清除劑N-乙酰半胱氨酸可部分改善姜黃素對菌絲的影響。NADPH氧化酶一個亞基基因NOXR的表達受到姜黃素的誘導,而NADPH氧化酶抑制劑二苯基碘鎓氯DPI消除了姜黃素誘導的ROS產(chǎn)生,表明姜黃素通過NADPH氧化酶依賴機制誘導灰霉病菌的氧化應激。3、姜黃素處理之后,可以下調促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號通路中涉及營養(yǎng)生長,滲透壓和致病性的三種基因Bmp1、Bmp3和Sak1。結果表明姜黃素可以...

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 獼猴桃
        1.1.1 獼猴桃簡介
        1.1.2 獼猴桃的病害情況
    1.2 灰霉菌
        1.2.1 灰霉菌生物學特性及其研究進展
    1.3 水果的采后保鮮
        1.3.1 物理保鮮技術
        1.3.2 化學保鮮技術
        1.3.3 生物保鮮技術
    1.4 姜黃素及其抑菌機理的研究現(xiàn)狀
        1.4.1 姜黃素簡介
        1.4.2 姜黃素的抗氧化性
        1.4.3 姜黃素的抗菌活性
    1.5 ROS的檢測機理
    1.6 課題研究的目的和意義
第二章 材料與設備
    2.1 實驗材料
        2.1.1 獼猴桃
        2.1.2 灰霉菌
        2.1.3 姜黃素
    2.2 實驗試劑和儀器
        2.2.1 生化試劑
        2.2.2 實驗所需主要儀器設備
        2.2.3 實驗所需試劑盒
    2.3 試驗所需的試劑配置過程
第三章 實驗方法
    3.1 姜黃素對灰霉病原菌生長情況的影響
        3.1.1 姜黃素溶液濃度的配置
        3.1.2 灰霉孢子液的配制
        3.1.3 姜黃素對灰霉病原菌孢子萌發(fā)以及芽管長度的影響
        3.1.4 姜黃素對灰霉病原菌菌落擴展的影響
    3.2 姜黃素對灰霉細胞活力的影響
    3.3 姜黃素對灰霉病原菌對滲透壓敏感性的影響
    3.4 姜黃素對灰霉菌絲穿透力的影響
    3.5 灰霉菌絲RNA的提取和RT-PCR檢測
        3.5.1 灰霉菌絲RNA的提取
        3.5.2 灰霉菌菌絲cDNA的反轉
        3.5.3 RT-qPCR檢測灰霉菌絲中相關基因的表達
    3.6 姜黃素對病原菌ROS累積水平的影響
    3.7 姜黃素對灰霉菌絲凋亡的影響
    3.8 姜黃素對灰霉菌細胞膜完整性的影響
    3.9 姜黃素對灰霉菌絲中抗氧化酶活性的影響
        3.9.1 姜黃素對病原菌菌絲中POD活性的影響
        3.9.2 姜黃素對灰霉菌絲中CAT活性的影響
        3.9.3 姜黃素對病原菌菌絲GSH-Px活性的影響
        3.9.4 姜黃素對灰霉菌絲SOD活性的影響
    3.10 二苯基碘鎓氯(DPI)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)對姜黃素處理的菌絲體的影響
    3.11 姜黃素對灰霉菌絲幾丁質的影響
    3.12 姜黃素對獼猴桃中丙二醛(MDA)和抗氧化酶活性的影響
    3.13 姜黃素對獼猴桃胼胝質的影響
    3.14 不同濃度的姜黃素對獼猴桃上灰霉菌生長的影響
        3.14.1 獼猴桃打孔接種灰霉病原菌
        3.14.2 獼猴桃表皮噴灑灰霉孢子液
    3.15 姜黃素對獼猴桃中灰霉病原菌孢子萌發(fā)以及芽管長度的影響
    3.16 姜黃素對獼猴桃硬度、SSC和 TA的影響
第四章 實驗結果
    4.1 姜黃素處理對獼猴桃灰霉菌孢子萌發(fā)、芽管伸長以及菌絲生長的抑制
    4.2 姜黃素對灰霉菌絲細胞活力的影響
    4.3 姜黃素對灰霉菌對高滲透壓的敏感性的影響
    4.4 姜黃素對灰霉菌絲穿透力的抑制
    4.5 姜黃素對BMP1、BMP3和SAK1 基因表達的影響
    4.6 姜黃素對灰霉菌活性氧ROS積累的影響
    4.7 姜黃素對灰霉菌絲細胞凋亡的影響
    4.8 姜黃素對灰霉菌絲細胞膜完整性的影響
    4.9 姜黃素對灰霉菌絲酶活的影響
    4.10 二苯基碘鎓氯(DPI)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)對姜黃素處理的菌絲體的影響
    4.11 姜黃素對灰霉菌絲幾丁質的影響
    4.12 姜黃素對獼猴桃中丙二醛(MDA)和抗氧化酶活性的影響
    4.13 姜黃素對獼猴桃胼胝質的影響
    4.14 姜黃素對獼猴桃打孔接種灰霉病原菌發(fā)病的影響
    4.15 姜黃素對獼猴桃表皮噴灑灰霉孢子懸浮液發(fā)病的影響
    4.16 姜黃素對獼猴桃中灰霉孢子萌發(fā)生長的抑制作用
    4.17 姜黃素對獼猴桃硬度、SSC和 TA的影響
第五章 討論
參考文獻
攻讀碩士學位期間的學術活動及成果情況



本文編號:3769201

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