二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)是一種n-3多不飽和脂肪酸,它在維護(hù)人體營(yíng)養(yǎng)健康和預(yù)防治療某些疾病方面發(fā)揮重要作用。目前,市場(chǎng)上高濃度DHA多為乙酯型,相比于乙酯型,游離型和甘油酯型DHA更易吸收。此外,即使同為甘油酯型,DHA在甘油骨架上的位置不同對(duì)其生理活性亦有重要的影響。根據(jù)甘三酯在體內(nèi)的代謝特點(diǎn),DHA位置分布不同的甘三酯會(huì)形成DHA和2-單甘酯型DHA(2-DHAMAG)。本論文制備了高濃度DHA和2-DHA-MAG,并對(duì)2-DHA-MAG酰基轉(zhuǎn)移規(guī)律進(jìn)行了研究,同時(shí)以DHA和2-DHA-MAG代表DHA位置分布不同的甘三酯的代謝產(chǎn)物,比較其對(duì)HepG2細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響。主要研究?jī)?nèi)容如下:首先,以金槍魚油水解產(chǎn)物脂肪酸為原料,通過(guò)低溫溶劑結(jié)晶和尿素包合分別富集DHA。結(jié)果表明,以乙腈作為低溫結(jié)晶溶劑,可顯著縮短結(jié)晶所需時(shí)間,在脂肪酸與乙腈比為1:10(w/v)、結(jié)晶溫度-60°C、結(jié)晶時(shí)間1 h的條件下,使DHA的含量從26.85%提高至56.31%,回收率為60%左右;采用尿素包合法對(duì)DHA富集時(shí),在脂肪酸:尿素:溶劑為1:3:12(w/...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮寫符號(hào)說(shuō)明
第一章 緒論
    1.1 DHA的概述
        1.1.1 DHA的功能性
        1.1.2 DHA的來(lái)源、存在形式及位置分布
    1.2 甘三酯的消化、吸收和代謝
    1.3 DHA在甘三酯上的位置分布對(duì)脂質(zhì)代謝的影響
        1.3.1 DHA的位置分布對(duì)血脂和肝臟脂質(zhì)水平的影響
        1.3.2 DHA的位置分布對(duì)脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)的差異
    1.4 細(xì)胞模型評(píng)價(jià)脂質(zhì)代謝和位置分布的研究
    1.5 DHA的純化
        1.5.1 低溫結(jié)晶
        1.5.2 尿素包合
        1.5.3 酶法富集
        1.5.4 分子蒸餾
        1.5.5 色譜分離
    1.6 2-MAG的制備及�；D(zhuǎn)移
        1.6.1 2-MAG及其制備方法
        1.6.2 2-MAG的酰基轉(zhuǎn)移
    1.7 研究背景及意義
    1.8 論文主要研究?jī)?nèi)容
第二章 DHA的富集純化
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 金槍魚油脂肪酸的制備
        2.3.2 低溫溶劑結(jié)晶富集金槍魚油脂肪酸中的DHA
        2.3.3 尿素包合法富集金槍魚油脂肪酸中的DHA
        2.3.4 制備液相富集DHA
        2.3.5 氣相色譜分析脂肪酸組成
        2.3.6 脂肪酸回收率計(jì)算
        2.3.7 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 低溫溶劑結(jié)晶富集金槍魚油脂肪酸中DHA的工藝優(yōu)化
        2.4.2 尿素包合法富集金槍魚油脂肪酸中DHA的工藝優(yōu)化
        2.4.3 低溫結(jié)晶與尿素包合結(jié)合富集DHA
        2.4.4 低溫結(jié)晶、尿素包合富集藻油脂肪酸中DHA
        2.4.5 制備液相富集DHA
    2.5 本章小結(jié)
第三章 酶法醇解制備2-單甘酯型DHA
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 酶法醇解制備2-MAG
        3.3.2 溶劑萃取法分離純化2-MAG
        3.3.3 2-DHA-MAG的富集
        3.3.4 脂肪酶的回收利用
        3.3.5 油脂成分檢測(cè)分析
        3.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 原料油脂脂肪酸組成及分布特點(diǎn)
        3.4.2 酶法醇解制備2-MAG
        3.4.3 脂肪酶的回收利用
        3.4.4 溶劑萃取純化產(chǎn)物中2-MAG
        3.4.5 2-DHA-MAG的分離純化
    3.5 本章小結(jié)
第四章 富含DHA的2-單甘酯的酰基轉(zhuǎn)移動(dòng)力學(xué)研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 2-MAG的合成及純化
        4.3.2 �；D(zhuǎn)移反應(yīng)
        4.3.3 液相測(cè)定2-MAG含量
        4.3.4 薄層色譜法分離1-MAG和2-MAG
        4.3.5 氣相色譜測(cè)定脂肪酸組成
        4.3.6 2-MAG含量的計(jì)算
        4.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 酰基轉(zhuǎn)移原料2-MAG的選擇
        4.4.2 溫度對(duì)藻油2-MAG�；D(zhuǎn)移的影響
        4.4.3 溶劑對(duì)藻油2-MAG酰基轉(zhuǎn)移的影響
        4.4.4 藻油2-MAG�；D(zhuǎn)移動(dòng)力學(xué)的研究
        4.4.5 溶劑性質(zhì)對(duì)�；D(zhuǎn)移速率常數(shù)的影響
        4.4.6 藻油2-MAG�；D(zhuǎn)移后脂肪酸的分布
    4.5 本章小結(jié)
第五章DHA在甘三酯的位置分布對(duì)HepG2細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響
    5.1 引言
    5.2 材料與儀器
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 脂肪酸組成相同的2-DHA-MAG與DHA樣品的制備
        5.3.2 主要試劑的配置
        5.3.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        5.3.4 細(xì)胞活力的檢測(cè)
        5.3.5 油酸誘導(dǎo)肝脂肪變性細(xì)胞模型的建立
        5.3.6 2-DHA-MAG和DHA的添加及對(duì)細(xì)胞的刺激
        5.3.7 細(xì)胞脂質(zhì)的提取及檢測(cè)
        5.3.8 細(xì)胞內(nèi)總甘三酯(TG)和總膽固醇(TC)含量的測(cè)定
        5.3.9 細(xì)胞總RNA提取、cDNA合成和實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        5.3.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 不同濃度2-DHA-MAG和DHA對(duì)細(xì)胞活性的影響
        5.4.2 2-DHA-MAG和DHA對(duì)HepG2細(xì)胞脂肪酸組成的影響
        5.4.3 2-DHA-MAG和DHA對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)TG和TC水平的影響
        5.4.4 2-DHA-MAG和DHA對(duì)脂質(zhì)代謝關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子及基因mRNA表達(dá)的影響
        5.4.5 肝細(xì)胞脂肪變性細(xì)胞模型的建立
        5.4.6 2-DHA-MAG和DHA對(duì)脂肪變性HepG2細(xì)胞TG和TC水平的影響
        5.4.7 2-DHA-MAG和DHA對(duì)脂肪變性HepG2細(xì)胞脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)的差異
    5.5 本章小結(jié)
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
論文創(chuàng)新點(diǎn)
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄:攻讀博士學(xué)位期間研究成果及獲得的獎(jiǎng)勵(lì)



本文編號(hào)：3742568