發(fā)布時間：2022-12-04 15:17

　　蕎麥胰蛋白酶抑制劑（buckwheat trypsin inhibitor,BTI）是胰蛋白酶的一種競爭性抑制劑,可以與胰蛋白酶特異性結(jié)合,從而達到抑制胰蛋白酶活性的效果。研究表明,BTI對于臨床新藥物的開發(fā)和抗蟲轉(zhuǎn)基因作物研究有著實際意義。本課題在已解析了BTI一級序列及三維結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,進一步研究了BTI的理化性質(zhì),并制備了BTI的突變體,獲得一種新型抑制劑。最后初步研究了BTI在鱸魚保鮮上的應(yīng)用,拓寬了胰蛋白酶抑制劑的應(yīng)用領(lǐng)域。本研究主要內(nèi)容如下:第一部分:通過比較蕎麥胰蛋白酶抑制劑和大豆胰蛋白酶抑制劑（soybean trypsin inhibitor,SBTI）的抑制活性,并進一步測定了溫度、pH、鹽離子、有機物等對兩種抑制劑活性的影響。實驗結(jié)果表明:100℃水浴加熱后BTI與SBTI的抑制活性均降低,加熱80 min后,BTI的剩余抑制率為75%,SBTI則全部失活。用pH 2-12緩沖液處理對BTI與SBTI活性均無影響。Zn²⁺對BTI活性有顯著降低作用。當(dāng)濃度為2-10 mM時,Mg²⁺、Cu²⁺、H<... 

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 胰蛋白酶抑制劑
    1.2 大豆胰蛋白酶抑制劑
    1.3 蕎麥胰蛋白酶抑制劑
    1.4 定點突變技術(shù)
    1.5 食品中的內(nèi)源酶
    1.6 乳酸鏈球菌素
    1.7 涂膜保鮮技術(shù)
第二章 BTI與SBTI理化性質(zhì)的比較
    2.1 材料與儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 BTI的誘導(dǎo)表達和純化
        2.2.2 BTI與SBTI抑制活性的測定
        2.2.3 溫度對BTI及SBTI抑制活性的影響
        2.2.4 pH對BTI及SBTI抑制活性的影響
        2.2.5 鹽離子對BTI及SBTI抑制活性的影響
        2.2.6 有機物對BTI及SBTI抑制活性的影響
        2.2.7 其他化合物對BTI及SBTI抑制活的影響
        2.2.8 抑制劑的動力學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 BTI與SBTI對胰蛋白酶的半抑制濃度
        2.3.2 溫度對BTI與 SBTI抑制活性的影響
        2.3.3 pH對抑制劑抑制活性的影響
        2.3.4 金屬離子對抑制劑活性的影響
        2.3.5 有機物對抑制劑活性影響結(jié)果
        2.3.6 不同化合物對抑制劑活性的影響
        2.3.7 抑制劑動力學(xué)分析
    2.4 討論
第三章 BTI突變體BCI的制備及理化性質(zhì)研究
    3.1 材料及儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 BCI突變體基因PCR擴增
        3.2.2 PCR產(chǎn)物的回收
        3.2.3 重組質(zhì)粒的連接與轉(zhuǎn)化
        3.2.4 BCI的誘導(dǎo)表達和純化
        3.2.5 BCI抑制活性的測定
        3.2.6 溫度對BCI抑制活性影響
        3.2.7 pH對BCI抑制活性影響
        3.2.8 離子、有機試劑等對BCI抑制活性影響
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 PCR產(chǎn)物的回收與測序
        3.3.2 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
        3.3.3 BCI抑制活性分析
        3.3.4 溫度對BCI抑制活性影響分析
        3.3.5 pH對BCI抑制活性影響分析
        3.3.6 離子、有機試劑等對BCI抑制活性影響分析
    3.4 討論
第四章 添加BTI的保鮮涂膜對鱸魚的保鮮效果
    4.1 材料與儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 保鮮涂膜的制備
        4.2.2 肉樣處理
        4.2.3 菌落總數(shù)的測定
        4.2.4 揮發(fā)性鹽基氮的測定
        4.2.5 硫代巴比妥酸的測定
        4.2.6 pH值的測定
        4.2.7 蒸煮損失率的測定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 菌落總數(shù)的變化分析
        4.3.2 揮發(fā)性鹽基氮的變化分析
        4.3.3 硫代巴比妥酸的變化分析
        4.3.4 pH值變化分析
        4.3.5 蒸煮損失率的變化分析
    4.4 討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
個人簡介及聯(lián)系方式


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]蕎麥胰蛋白酶抑制劑對雞肉肉糜凝膠特性的影響[D]. 栗安之.山西大學(xué) 2019
[3]兔肉微凍保鮮技術(shù)研究[D]. 蘭洋.西南大學(xué) 2016
[4]明膠基納米復(fù)合材料的制備、表征及其應(yīng)用[D]. 陳廣新.齊魯工業(yè)大學(xué) 2015
[5]乳酸鏈球菌素產(chǎn)生菌株篩選及其抑菌機理研究[D]. 白澤樸.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號：3708505