發(fā)布時間：2022-08-01 11:43

　　乳清是在干酪和干酪素的生產過程中產生的副產物。乳清如果不處理直接排放到環(huán)境中,會產生過高的污染,導致嚴重的環(huán)境問題。但是,另一方面,乳清保留了原料乳中較多的營養(yǎng)成分,包括蛋白質、肽、脂類、乳糖、礦物質和維生素,具有很高的營養(yǎng)價值。因此,作為一種生產副產物,乳清具有巨大的開發(fā)潛力。乳清蛋白是乳清的主要成分之一,具有較高的營養(yǎng)價值和功能特性,被廣泛的應用于各種食品中,是生物活性肽的理想來源。本文以乳清蛋白為研究對象,研究了超高壓預處理對乳清蛋白結構的影響;對經超高壓預處理后的乳清蛋白進行酶解工藝篩選,確定了制備具有抗氧化活性和DPP-Ⅳ抑制活性雙重活性的多肽的最佳用酶和酶解工藝條件,采用響應面優(yōu)化酶解工藝條件;分離純化出了酶解物中同時具有抗氧化活性和DPP-Ⅳ抑制活性的多肽。主要結論如下:（1）對乳清蛋白進行了不同壓力和時間條件下的超高壓處理,測定其電泳特性、表面疏水性、傅里葉變換紅外光譜、巰基含量、內源熒光光譜,結果表明超高壓處理后乳清蛋白電泳特性未發(fā)生顯著變化,表面疏水性顯著上升,α-螺旋含量上升,β-折疊含量下降,自由巰基含量明顯增加,內源熒光強度發(fā)生顯著變化。在所有超高壓處理條件中... 

【文章頁數】：88 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 乳清及乳清蛋白概述
    1.2 乳清蛋白的改性技術
    1.3 超高壓技術研究進展
    1.4 酶解技術研究進展
    1.5 抗氧化肽研究進展
    1.6 DPP-Ⅳ抑制肽研究進展
    1.7 課題研究意義與內容
        1.7.1 課題研究意義
        1.7.2 課題研究主要內容
第二章 超高壓對乳清蛋白理化特性的影響
    2.1 引言
    2.2 材料和儀器
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 設備與儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 超高壓處理
        2.3.2 SDS-PAGE電泳檢測
        2.3.3 掃描電鏡觀察
        2.3.4 乳清蛋白結構分析
            2.3.4.1 傅里葉變換紅外光譜分析
            2.3.4.2 巰基含量的測定
            2.3.4.3 表面疏水性的測定
            2.3.4.4 內源熒光光譜分析
        2.3.5 統計分析
    2.4 結果與討論
        2.4.1 超高壓對乳清蛋白電泳特性的影響
        2.4.2 超高壓對乳清蛋白表面形貌的影響
        2.4.3 超高壓對乳清蛋白表面疏水性的影響
        2.4.4 超高壓對乳清蛋白結構的影響
            2.4.4.1 超高壓對乳清蛋白二級結構的影響
            2.4.4.2 超高壓對乳清蛋白三級結構的影響
    2.5 小結
第三章 超高壓協同酶解工藝篩選
    3.1 引言
    3.2 材料和儀器
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 設備與儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 超高壓預處理乳清蛋白的制備
        3.3.2 酶解工藝流程
        3.3.3 蛋白酶水解乳清蛋白的實驗設計
            3.3.3.1 單酶水解
            3.3.3.2 復合酶一步水解
            3.3.3.3 復合酶兩步水解
            3.3.3.4 響應面實驗工藝優(yōu)化
        3.3.4 水解度的測定
        3.3.5 抗氧化活性的測定
            3.3.5.1 ABTS自由基清除能力的測定
            3.3.5.2 DPPH自由基清除能力的測定
            3.3.5.3 總還原力的測定
        3.3.6 DPP-Ⅳ抑制活性的測定
        3.3.7 統計分析
    3.4 結果與討論
        3.4.1 單因素試驗
            3.4.1.1 溫度對乳清蛋白水解度及抗氧化活性的影響
            3.4.1.2 時間對乳清蛋白水解度及抗氧化活性的影響
            3.4.1.3 酶用量對乳清蛋白水解度及抗氧化活性的影響
            3.4.1.4 pH對乳清蛋白水解度及抗氧化活性的影響
        3.4.2 蛋白酶及酶解工藝的篩選
        3.4.3 響應面分析
            3.4.3.1 胃蛋白酶水解乳清蛋白響應面分析
            3.4.3.2 酸性蛋白酶水解乳清蛋白響應面分析
    3.5 小結
第四章 活性肽分離純化
    4.1 引言
    4.2 材料和儀器
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 設備與儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 乳清蛋白源抗氧化肽(粗品)的制備
        4.3.2 凝膠過濾層析分離
        4.3.3 RP-HPLC分離
        4.3.4 LC-MS/MS鑒定
        4.3.5 活性肽的合成
        4.3.6 統計分析
    4.4 結果與討論
        4.4.1 乳清蛋白酶解物的凝膠過濾層析分離
        4.4.2 組分N3的RP-HPLC分離純化
        4.4.3 乳清蛋白源生物活性肽的質譜鑒定分析
    4.5 小結
第五章 結論與展望
    5.1 主要結論
    5.2 展望
    5.3 創(chuàng)新點
參考文獻
本研究受資助的項目
作者在攻讀碩士學位期間公開發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]超高壓對乳清分離蛋白結構和抗氧化活性的影響[J]. 龐佳坤,鄭遠榮,劉振民,包怡,陳森怡,黨慧杰.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2020(04)
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碩士論文
[1]乳清蛋白降膽固醇肽的制備及活性研究[D]. 孫丹丹.東北農業(yè)大學 2017
[2]超高壓處理對牛乳清蛋白水解及其產物抗氧化活性的影響[D]. 盛小波.中國農業(yè)科學院 2011
[3]酶法降低β—乳球蛋白含量的研究[D]. 史瑜婷.安徽農業(yè)大學 2010
[4]超高壓對牛乳清蛋白酶解及其產物影響的研究[D]. 陳井旺.西南大學 2009



本文編號：3667385