食品安全問題是一個(gè)日益突出的社會(huì)問題,它關(guān)系到我國(guó)千千萬萬人民群眾切身利益,關(guān)注食品安全勢(shì)在必行。食源性致病菌是目前最常見的,有巨大危害性并且影響廣泛的食品污染因素。因此,建立便捷、快速和靈敏的食源性致病菌檢測(cè)方法對(duì)預(yù)防食品安全問題的發(fā)生和保護(hù)人類健康具有重要意義。大腸桿菌O157:H7和空腸彎曲菌作為常見的食源性致病菌,本文介紹了以下幾種檢測(cè)大腸桿菌O157:H7和空腸彎曲菌的方法:（1）基于分子擴(kuò)增原理的死、活菌鑒定方法的建立將疊氮溴化丙錠（PMA）與食源性致病菌細(xì)胞孵育,正常情況下PMA不能透過完整的細(xì)胞膜,而對(duì)于死亡的細(xì)胞,其細(xì)胞膜上有退化或結(jié)構(gòu)有損壞,所以PMA會(huì)選擇性地進(jìn)入死亡細(xì)胞的內(nèi)部與其DNA結(jié)合。再將用PMA處理過的食源性致病菌樣品暴露在特殊強(qiáng)光下一定時(shí)間,PMA會(huì)嵌入DNA分子的雙鏈中致使DNA分子的永久修飾。并且這種DNA的共價(jià)修飾會(huì)抑制聚合酶的活性,進(jìn)而阻斷DNA分子的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）,因此來自非存活或者膜受損細(xì)胞的DNA則無法通過PCR進(jìn)行擴(kuò)增。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化,使用終濃度為5μg/mL的PMA與食源性致病菌樣品孵育5分鐘后在500 W鹵素?zé)粝缕毓?... 

【文章來源】：合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：139 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

可行性驗(yàn)證（M:DNAmarker;1:空白;2:無PMA處理死細(xì)菌;3:PMA處理死細(xì)菌;4:無PMA處理活細(xì)菌;5:PMA處理活細(xì)菌）

圖 2.2 PMA 使用濃度的優(yōu)化（M: DNAmarker; 1: 空白; 2-5: 0.5 μg/mL; 6-9: 3 μg/mL; 10-13: 5μg/mL; 14-17: 8 μg/mL; 18-21: 12 μg/mL）Fig 2.2 Optimization of PMAconcentration (M: DNAmarker; 1: blank; 2-5: 0.5 μg/mL; 6-9: 3μg/mL; 10-13: 5 μg/mL; 14-17: 8 μg/mL; 18-21: 12 μg/mL)圖 2.2 為 PMA 使用濃度優(yōu)化的結(jié)果，如圖所示，泳道 M 為 DNA marker，泳

圖 2.3 PMA 與 E. coli O157:H7 孵育時(shí)間的優(yōu)化（M: DNAmarker; 1: 空白; 2-5: 5 min; 6-9: 10min; 10-13: 20 min; 14-17: 30 min; 18-21: 45 min）Fig 2.3 Optimization of the incubation time PMAand E. coli O157:H7 (M: DNAmarker; 1: blank;2-5: 5 min; 6-9: 10 min; 10-13: 20 min; 14-17: 30 min; 18-21: 45 min)2.4.4 鹵素?zé)羝毓鈺r(shí)間的優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3490879