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糖基化修飾制備低敏卵清蛋白及其機初探

發(fā)布時間:2021-11-02 10:11
  雞蛋是最優(yōu)質(zhì)的食物營養(yǎng)來源之一。在東西方飲食習(xí)慣中,雞蛋作為常用烹飪食材深受人們喜愛。雞蛋價格低廉,營養(yǎng)價值卻極高,富含蛋白質(zhì)、脂肪、卵磷脂、維生素和礦物質(zhì)等人體必須營養(yǎng)素。但同時又是常見的致敏食物之一。近年來多種具有優(yōu)良功能性質(zhì)的雞蛋加工制品得到了廣泛的應(yīng)用,這同時也為越來越多的雞蛋過敏人群帶來了誤食導(dǎo)致過敏的隱患。隨著全球雞蛋過敏率的逐年增長,雞蛋過敏嚴重地影響了蛋類產(chǎn)品應(yīng)用的推廣和營養(yǎng)價值的利用,因此,亟需尋找一種有效的降敏方法。美拉德反應(yīng)(Maillard reaction,MR)是高蛋白食品加工和貯運過程中的一種常見的非酶促褐變,在食品工業(yè)中有十分廣泛的應(yīng)用。糖基化反應(yīng)發(fā)生于美拉德反應(yīng)的早期階段,通過修飾蛋白質(zhì)中含游離氨基的氨基酸殘基從而影響蛋白質(zhì)的一級序列并修飾某些過敏線性表位;同時,糖基化修飾會導(dǎo)致蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,破壞某些構(gòu)象表位的完整性;此外,糖基化反應(yīng)可以在溫和的反應(yīng)條件下(>25℃)自發(fā)進行而無需引入其他化學(xué)成分,是安全性相對較高和較節(jié)能的食物降敏方法,但目前對糖基化降敏機制的大多研究僅限于宏觀層面,在分子層面上對糖基化降敏機制探究的報道仍然有限。本... 

【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

糖基化修飾制備低敏卵清蛋白及其機初探


圖2.1糖基化OVA樣品溶液圖(A)和電泳圖(B)??Figure?2.1?Image?of?glycated?OVA?solution?(A)?and?SDS-PAGE?profiles?(B)??圖2.1?(A)是不同單糖修飾的OVA樣品圖,由圖可見,不同單糖修飾的??

含量變化圖,糖基化,氨基,含量變化


?第2章糖基化對卵清蛋白構(gòu)象的影響???程度較低。非還原性電泳本質(zhì)上是一種不完全變性條件下的電泳策略。電泳上樣??緩沖液中不包含強還原劑(如廣疏基乙醇或二硫蘇糖醇等),不會破壞蛋白中的??二硫鍵,因而樣品蛋白在電泳過程中可最大程度保持原本結(jié)構(gòu)特性,沒有完全去??折疊,可反應(yīng)出蛋白分子量和對應(yīng)的多聚體形式。因此,為了進一步分析不同單??糖修飾的OVA的分子量變化,本論文采用非還原性聚丙烯酰胺凝膠電泳??(SDS-PAGE)可以較準確地分析單糖對OVA分子的影響。由圖2.1?(B)所示,??在加熱和糖基化的樣品的電泳道頂部均觀察到了明顯的聚集條帶。這說明熱聚集??和糖基化共價交聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)物均有一定數(shù)量的產(chǎn)生。與OVA-N和OVA-H相比,??糖基化樣品的電泳條帶略有上移,表明糖基化導(dǎo)致了?OVA分子量增加,OVA的??一級蛋白序列被單糖大量修飾。以上結(jié)論與前人的報道一致。例如,Sun等[44]??和Yasuhiro等[7()]發(fā)現(xiàn),干法糖基化會使原生OVA的電泳帶表現(xiàn)出輕微的偏移。??但是,通過SDS-PAGE很難檢測到遷移率的差異,糖基化樣品之間具體構(gòu)象變??化差異仍不清楚。??2.4.2游離氤基含置??|100jh?^??I?8〇-?I?I??111??I?will!??OVA-N?OVA-H?OVA-Rib?OVA-Xyl?OVA-Gal?OVA-Ghi?OVA-Fra??圖2.2糖基化OVA的游離氨基含量變化??Figure?2.2?alterations?in?free?amino?groups?content?of?glycated?OVA??在糖基化的早期階段,OVA中的游離氨基,包括N末端的cc-N

吸收光譜,糖基化,吸收光譜


越少,單糖和OVA中的氨基反應(yīng)性就越強[43,5()]。此外,由于親電性羰基較少,??醛糖類單糖的反應(yīng)活性比酮糖類更強[75]。??2.4.3紫外吸收光譜???OVA-Rib???OVA-Gal??08?-??OVA-Xyl???OVA-Glu??07?■?——OVA-Fru??AC?^?\\?——OVA-H??〇.〇?J?,???1???1???1???1??260?280?300?320?340??wavelength(nm)??圖2.3糖基化OVA的紫外吸收光譜??Figure?2.3?UV?absorption?spectra?of?glycated?OVA??紫外(ultraviolet,UV)吸收光譜屬于分子光譜,由分子中原子外層價電子??躍遷而形成,常用來分析樣品的物質(zhì)組成、含量和構(gòu)象特征。OVA的UV吸收??光譜主要取決于蛋白質(zhì)中氨基酸殘基側(cè)鏈的發(fā)色基團或分子間肽鍵對紫外光的??吸收。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)構(gòu)象發(fā)生強烈擾動時,發(fā)色團可能會暴露于蛋白質(zhì)的外表面,從??而提高相應(yīng)吸收峰值[76]。圖2.2中顯示了不同糖基化修飾的OVA樣品的UV吸??15??

【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]超聲波預(yù)處理結(jié)合糖基化制備脫敏蛋清粉的研究及工廠設(shè)計[D]. 宋啟東.南昌大學(xué) 2018
[2]部分消化道疾病患者血清過敏原的臨床研究[D]. 魏瑰紅.大連醫(yī)科大學(xué) 2014
[3]不同處理方法對雞蛋清中卵白蛋白抗原性的影響[D]. 畢井輝.江南大學(xué) 2013
[4]微波場內(nèi)卵清蛋白糖基化反應(yīng)的研究[D]. 胡月明.南昌大學(xué) 2014
[5]糖基化對卵白蛋白的構(gòu)象及其抗原性和過敏原性的影響[D]. 麻小娟.南昌大學(xué) 2011



本文編號:3471846

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