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基于代謝組學(xué)的植物中農(nóng)藥暴露關(guān)鍵標(biāo)志物的篩選和驗證

發(fā)布時間:2021-10-21 22:20
  隨著人們物質(zhì)水平的大幅度提高,人們對食品安全越來越重視,對有機(jī)食品的需求也日益增大。有機(jī)食品通常指在生產(chǎn)過程中不使用農(nóng)藥、化肥、生長調(diào)節(jié)劑、抗生素、轉(zhuǎn)基因技術(shù)的食品。然而蔬果葉菜等植物在施用過農(nóng)藥后,尤其在一定的農(nóng)藥噴灑安全間隔期后,農(nóng)藥已經(jīng)降解及被植物代謝掉,以現(xiàn)有的農(nóng)藥檢測手段和檢測指標(biāo),只能檢測其是否有農(nóng)藥殘留,而無法判斷其是否使用過農(nóng)藥。因此,為了對有機(jī)食品的農(nóng)藥監(jiān)測及有機(jī)食品的認(rèn)證提供新的檢測思路和判斷指標(biāo),本論文首次基于代謝組學(xué)來篩選植物經(jīng)過農(nóng)藥暴露并間隔一定的安全間隔期后的差異化合物,并將其作為農(nóng)作物經(jīng)過農(nóng)藥暴露的關(guān)鍵標(biāo)志物。本論文實驗樣本選擇了葉菜類(莧菜)、苗類(豌豆苗)、果蔬類(櫻桃番茄、秋葵)三類植物,分別經(jīng)過有機(jī)磷類(毒死蜱、樂果)、氨基甲酸酯類(滅多威)和擬除蟲菊酯類(甲氰菊酯)三類農(nóng)藥暴露后,間隔7天和30天采集,提取其小分子代謝物,在高分辨飛行時間質(zhì)譜平臺上測,并通過多元數(shù)據(jù)分析處理方法篩選出農(nóng)藥暴露的關(guān)鍵標(biāo)志物,并進(jìn)行鑒定。再使用標(biāo)準(zhǔn)對照品,在三重四極桿質(zhì)譜上建立該標(biāo)志物的MRM(多重反應(yīng)監(jiān)控模式)定量分析方法,以驗證標(biāo)志物的有效性。最后通過ROC分析,... 

【文章來源】:西華大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】:97 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
    1 農(nóng)藥的使用現(xiàn)狀及現(xiàn)行檢測手段
        1.1 農(nóng)藥的使用現(xiàn)狀
        1.2 農(nóng)藥的分類
            1.2.1 有機(jī)磷農(nóng)藥
            1.2.2 氨基甲酸酯類農(nóng)藥
            1.2.3 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥
        1.3 農(nóng)藥殘留的檢測方法
            1.3.1 色譜分析方法
            1.3.2 快速檢測法
        1.4 農(nóng)藥殘留的檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢
    2 植物代謝組學(xué)的研究背景、方法及近況
        2.1 植物代謝組學(xué)的研究背景
        2.2 代謝組學(xué)研究方法
            2.2.1 非靶向代謝組學(xué)
            2.2.2 靶向代謝組學(xué)
            2.2.3 擬靶向代謝組學(xué)
            2.2.4 植物代謝組學(xué)的樣品前處理程序
            2.2.5 植物代謝組學(xué)的研究平臺
        2.3 植物代謝組學(xué)的研究近況
            2.3.1 環(huán)境脅迫對植物代謝的研究進(jìn)展
            2.3.2 農(nóng)藥暴露對植物代謝的研究進(jìn)展
        2.4 代謝組學(xué)的發(fā)展前景
    3 論文研究的內(nèi)容和意義
        3.1 論文研究內(nèi)容
        3.2 論文研究意義
第一章 植物代謝組提取試劑的選擇及優(yōu)化
    1 材料與儀器
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗試劑
        1.3 儀器和設(shè)備
        1.4 主要溶液配置
    2 實驗方法
        2.1 樣品前處理
        2.2 色譜條件
        2.3 質(zhì)譜條件
        2.4 提取劑的選擇
        2.5 響應(yīng)面法優(yōu)化提取劑的比例
    3 結(jié)果與討論
        3.1 響應(yīng)面法設(shè)計試驗方案的分析
        3.2 響應(yīng)面分析
        3.3 最佳提取劑比例的預(yù)測和驗證
    4 本章小結(jié)
第二章 基于高分辨質(zhì)譜的農(nóng)藥暴露關(guān)鍵標(biāo)志物的篩選與鑒定
    1 材料與儀器
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗試劑
        1.3 主要試劑配制方法
        1.4 儀器和設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 暴露過農(nóng)藥的樣本和未暴露過農(nóng)藥的樣本的分組
        2.2 樣品前處理
        2.3 色譜條件
        2.4 質(zhì)譜條件
    3 結(jié)果與討論
        3.1 數(shù)據(jù)質(zhì)量控制
        3.2 數(shù)據(jù)預(yù)處理
        3.3 有機(jī)磷農(nóng)藥毒死蜱和樂果暴露的關(guān)鍵標(biāo)志物篩選
        3.4 氨基甲酸酯類農(nóng)藥滅多威的關(guān)鍵標(biāo)志物篩選
        3.5 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥甲氰菊酯的關(guān)鍵標(biāo)志物篩選
        3.6 代謝組學(xué)篩選結(jié)果
        3.7 差異代謝物的鑒定
        3.8 農(nóng)藥暴露后山奈酚含量的變化趨勢
    4 本章小結(jié)
第三章 農(nóng)藥暴露判定標(biāo)志物定量分析方法的建立及閾值的確定
    1 材料與儀器
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗試劑和主要設(shè)備
        1.3 主要試劑配制方法
    2 實驗方法
        2.1 色譜條件
        2.2 質(zhì)譜條件
        2.3 樣品中山萘酚的定量分析計算
        2.4 方法學(xué)驗證
            2.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線,R2
            2.4.2 方法的檢出限和定量限
            2.4.3 方法的精密度和準(zhǔn)確度
            2.4.4 方法的回收率
        2.5 實際樣品的測定
        2.6 農(nóng)藥暴露樣品判定的ROC分析
    3 結(jié)果與討論
        3.1 山萘酚的定量分析與方法學(xué)評價
        3.2 實際樣品的檢測結(jié)果
        3.3 農(nóng)藥暴露判定閾值的確定
        3.4 農(nóng)藥暴露判定閾值的驗證
    4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 A 第二章中代謝物分析圖
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文及科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[4]CLIA值對應(yīng)RPR滴度的ROC曲線分析及曲線擬合[J]. 滕穎.  醫(yī)學(xué)理論與實踐. 2020(08)
[5]快速濾過型凈化結(jié)合氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時檢測茶葉中10種擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留[J]. 黃云霞,孟志娟,趙麗敏,孫文毅,王東,范素芳,李強(qiáng),張巖.  色譜. 2020(07)
[6]超高效液相色譜-四級桿-飛行時間質(zhì)譜法與代謝組學(xué)技術(shù)分析牛乳與羊乳差異性[J]. 房艷,于思雨,高俊海,宋敬寧.  食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2020(07)
[7]基于UPLC-Q-TOF MS代謝組學(xué)技術(shù)篩選表征奶牛產(chǎn)后異食癖的候選生物標(biāo)識物[J]. 羅芳,劉國林,張萌,陶金忠.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2020(04)
[8]常用農(nóng)藥獸藥殘留量檢測方法研究[J]. 李明杰,王濤.  畜牧業(yè)環(huán)境. 2020(07)
[9]農(nóng)藥與化肥使用現(xiàn)狀及減量對策[J]. 高玉秋,高麗丹,許一榮,魏曉軍.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2020(07)
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碩士論文
[1]蛋白質(zhì)組學(xué)與代謝組學(xué)結(jié)合對肝再生分子機(jī)制的研究[D]. 袁星.第二軍醫(yī)大學(xué) 2009



本文編號:3449823

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