青頭菌為云南當(dāng)?shù)氐囊环N常用食用菌,常被當(dāng)?shù)厝擞米髑甯蚊髂�、理氣解郁的調(diào)理品。本文優(yōu)化了青頭菌多糖的熱水浸提法工藝,對(duì)提取的粗多糖進(jìn)行分離純化并研究其生物活性,主要研究成果如下:在單因素的基礎(chǔ)上用響應(yīng)面模型優(yōu)化青頭菌多糖的得率,最佳提取方案為提取溫度90℃、稀釋倍數(shù)30倍、提取時(shí)間100 min,實(shí)際得率為9.89%。對(duì)提取物進(jìn)行濃縮、醇沉、脫色、脫蛋白后得到粗多糖RVP。RVP經(jīng)過(guò)DEAE纖維素離子層析柱分離純化后得到兩種均一性多糖RVP-Ⅰ、RVP-Ⅱ和一種非均一性多糖RVP-Ⅲ。理化性質(zhì)研究表明RVP-Ⅰ的重均分子量Mw為14883 Da,RVP-Ⅱ的重均分子量Mw為13301 Da,RVP-Ⅲ的洗脫曲線中有兩個(gè)峰,重均分子量Mw分別為1330816 Da和15970 Da。RVP-Ⅰ,RVP-Ⅱ,RVP-Ⅲ的總糖含量分別為88.47%,87.65%,83.82%;蛋白質(zhì)含量分別為1.87%,2.37%,2.40%;糖醛酸含量分別為6.72%,7.48%,9.65%;基本不含淀粉和核酸類物質(zhì)。對(duì)RVP-Ⅰ、RVP-Ⅱ進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,結(jié)果表明RVP-Ⅰ、RVP-Ⅱ均不含三螺旋結(jié)構(gòu)。RV... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

部分糖殘基高碘酸氧化和Smith降解過(guò)程

華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文18A.(1)(2)(2)B.(1)(2)C.(1)(2)圖2-3:響應(yīng)面模擬結(jié)果：A.提取溫度-稀釋倍數(shù)；B.稀釋倍數(shù)-提取時(shí)間；C.提取溫度-提取時(shí)間Figure2-3:Responsesurfacesimulationresults:A.Extractiontemperature-Dilutionmultiple；B.Dilutionmultiple-Extractiontime；C.Extractiontemperature-Extractiontime根據(jù)模型分析得到最優(yōu)提取方案：提取溫度90.95℃，稀釋30.12倍，浸提時(shí)間99.37min，理論最優(yōu)得率為9.97%。根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整為提取溫度90℃，稀釋30倍，浸提時(shí)間100min，重復(fù)3次得到最優(yōu)得率9.89%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與模型得出的結(jié)果較接近，表明模型可行。采用優(yōu)化后的提取條件提取青頭菌多糖溶液，將提取后的溶液濃縮，并采用D354F大孔樹(shù)脂進(jìn)行脫色，隨后使用95%乙醇按照多糖溶液：95%乙醇=1:4的比例在4℃下進(jìn)行醇沉，離心棄去上清液，置于60℃烘箱中烘干得到青頭菌多糖。

第四章青頭菌純化多糖的結(jié)構(gòu)分析45δ5.26六個(gè)異頭氫信號(hào)，δ97.64，δ97.80，δ100.43，δ101.45，δ101.84，δ102.16六個(gè)異頭碳信號(hào)，氫譜中δ1.17以及碳譜中δ15.66處的信號(hào)為巖藻糖H-6和C-6的特征信號(hào)[53]，說(shuō)明了RVP-Ⅰ的主要結(jié)構(gòu)中有巖藻糖的存在，和單糖組成的結(jié)果一致。如圖4-7、4-8，通過(guò)2DNMR（HSQC/HMBC）對(duì)RVP-Ⅰ中糖殘基的信號(hào)進(jìn)行分析，結(jié)合紅外光譜和甲基化分析結(jié)果以及已有的文獻(xiàn)記載，HSQC異頭碳?xì)鋮^(qū)域的6個(gè)H1/C1信號(hào)δ5.33/99.65、δ5.04/101.95、δ4.99/97.79、δ4.93/97.83、δ4.64/102.98、δ4.47/102.71分別歸屬為t-α-D-Glc[54]、t-α-D-Fuc[55]、1,2,6-α-D-Man[56]、1,3,6-α-D-Man[57]、1,4-β-D-Gal[58]、1,6-β-D-Gal[59]，H1-H5/C1-C5區(qū)域的信號(hào)歸屬詳情見(jiàn)表4-8。通過(guò)HMBC分析RVP-Ⅰ的糖殘基中13C和1H的遠(yuǎn)程信號(hào)關(guān)系。圖4-5RVP-Ⅰ核磁共振氫譜圖Figure4-5NMRhydrogenspectrumofRVP-Ⅰ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[8]羊肚菌多糖（ME-X）結(jié)構(gòu)鑒定、生物活性及抗腫瘤機(jī)制的研究[D]. 黃瑤.西華師范大學(xué) 2019
[9]皺蓋疣柄牛肝菌多糖結(jié)構(gòu)分析及生物活性研究[D]. 董芳.華南理工大學(xué) 2018
[10]青錢柳多糖提取工藝優(yōu)化及其體外抗氧化、降血糖活性研究[D]. 鄒榮燦.貴州師范大學(xué) 2018



本文編號(hào)：3245361