食用菌中煙堿類化合物含量及其它代謝物的研究
發(fā)布時間：2021-06-10 22:36
食用菌中煙堿類化合物為普遍存在的內(nèi)源性微量物質(zhì),但在出口限量標準嚴格控制其含量。食用菌中煙堿類化合物形成機制尤其是代謝途徑尚未明確。本課題分別對不同食用菌以及自栽培的香菇中煙堿類化合物進行檢測,另外對香菇內(nèi)源性代謝物輪廓進行研究,研究煙堿類化合物和代謝物之間的關(guān)系,初步探討食用菌中煙堿類物質(zhì)的形成機理。采用U3000-Q Exactive超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀和AB SCIEX QTRAP 5500LC/MS/MS超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,通過優(yōu)化實驗條件和樣品前處理采用方法,完成方法學驗證,包括專屬性、線性關(guān)系、定量限及檢出限、精密度、回收率和基質(zhì)效應(yīng)等各項考察均符合要求。該方法定量結(jié)果準確可靠、靈敏度高、分析時間短�？捎糜谑秤镁�8種煙堿類化合物的分析。不同食用菌煙堿含量分析表明,16種食用菌中除了去氫煙堿均未檢出外,其余7種煙堿類化合物均有不同程度檢出。尼古丁、可替丁、新煙堿和二烯煙堿含量較高,分布廣泛。各種不同煙堿的含量在不同食用菌之間有顯著不同。可替寧含量與聯(lián)吡啶、尼古丁含量為正相關(guān);可替寧含量與新煙堿含量負相關(guān);尼古丁含量與麥斯明或可替寧含量正相關(guān)。不同生長階段香菇中...
【文章來源】：閩南師范大學福建省
【文章頁數(shù)】：128 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
八種煙堿類化合物結(jié)構(gòu)式天然的煙堿在室溫下為無色或淡黃色的油狀液體，在20℃下的密度為1.0071
第1章綜述-2-圖1-1八種煙堿類化合物結(jié)構(gòu)式天然的煙堿在室溫下為無色或淡黃色的油狀液體，在20℃下的密度為1.0071kg/m3,沸點為247℃，閃點95℃。當pH值大于10時,主要以煙堿分子態(tài)存在，易與水生成水合物，極易溶于醇、醚、氯仿及石油醚等有機溶劑，可隨水蒸氣一起揮發(fā)，能與多種酸反應(yīng)成鹽，所生成的鹽大多易溶于水和有機溶劑。圖1-2煙堿的3種異構(gòu)體結(jié)構(gòu)煙堿（尼古丁）會使人上癮或產(chǎn)生依賴性，重復(fù)使用會增加心率和升高血壓并降低食欲。大劑量的尼古丁會引起嘔吐以及惡心，嚴重時人會死亡。尼古丁是煙草的主要精神活性成分，通過作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的煙堿乙酰膽堿受體，導致神經(jīng)遞質(zhì)（如多巴胺和5-羥色胺）的釋放，從而導致身體依賴，這些遞質(zhì)通過激活中腦皮質(zhì)激素多巴胺系統(tǒng)產(chǎn)生增強作用[3]。尼古丁在人體中可以通過各種途徑會代謝為降尼古盯可的寧、降
第2章食用菌中八種煙堿類化合物的檢測方法學建立-25-等度洗脫的流動相條件既能將各目標峰完全分離，又能快速洗脫，保證高效洗脫（結(jié)果見圖2-3）。圖2-3QTRAP5500液質(zhì)聯(lián)用儀優(yōu)化流動相后的色譜圖注：HILIC色譜柱，0.3mL/min梯度洗脫，A相初始10%0.1%甲酸10mM乙酸銨水溶液，B相乙腈2.4.3.2線性范圍和檢出限定量限將空白溶劑乙腈混合標準系列工作液及基質(zhì)混合標準系列工作液注入液質(zhì)聯(lián)用色譜儀中，測定相應(yīng)的峰面積，以標準工作液的濃度（X）為橫坐標，以峰面積(Y)縱坐標，繪制校準曲線并列出校準曲線的線性方程和線性范圍。結(jié)果見表2-5，本法線性范圍較寬，大約在0.3-500μg/kg范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)大于0.995。表2-5儀器AB5500線性關(guān)系、相關(guān)系數(shù)及檢出限、定量限(μg/kg)名稱線性范圍線性方程R2LODLOQ可替寧0.03-500Y=6.96e5x-5.118e40.99820.010.03降煙堿0.2-500Y=1.21e5x-98630.99690.050.2新煙堿0.03-500Y=5.53e4x+63680.99590.010.03尼古丁0.3-500Y=1.21e5x+4.42e50.99800.10.3二烯煙堿0.3-500Y=1.92e5x+1.25e50.99900.10.3去氫煙堿0.3-500Y=2.79e5x-7.34e40.99930.10.32.3-聯(lián)吡啶0.06-500Y=1.83e6x-1.18e50.99810.020.06麥沙明0.03-500Y=2.51e5x+1.61e50.99830.010.03取混合標準中間液0.1mL加入到0.5g基質(zhì)中，加乙腈定容25mL后過濾，取上清液稀釋后，過濾膜進行分析得出8種化合物的檢出信號，以信號和噪音（S/N）的比值作為考察定量限和檢出限的指標。S/N=10的信號濃度為定量限，S/N=3的信號濃度為檢出限，結(jié)果見表2-5。定量限及檢出限較低，LOD為0.01-0.5μg/kg，LOQ在0.03-0.3μg/kg
本文編號：3223237
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【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
八種煙堿類化合物結(jié)構(gòu)式天然的煙堿在室溫下為無色或淡黃色的油狀液體，在20℃下的密度為1.0071
第1章綜述-2-圖1-1八種煙堿類化合物結(jié)構(gòu)式天然的煙堿在室溫下為無色或淡黃色的油狀液體，在20℃下的密度為1.0071kg/m3,沸點為247℃，閃點95℃。當pH值大于10時,主要以煙堿分子態(tài)存在，易與水生成水合物，極易溶于醇、醚、氯仿及石油醚等有機溶劑，可隨水蒸氣一起揮發(fā)，能與多種酸反應(yīng)成鹽，所生成的鹽大多易溶于水和有機溶劑。圖1-2煙堿的3種異構(gòu)體結(jié)構(gòu)煙堿（尼古丁）會使人上癮或產(chǎn)生依賴性，重復(fù)使用會增加心率和升高血壓并降低食欲。大劑量的尼古丁會引起嘔吐以及惡心，嚴重時人會死亡。尼古丁是煙草的主要精神活性成分，通過作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的煙堿乙酰膽堿受體，導致神經(jīng)遞質(zhì)（如多巴胺和5-羥色胺）的釋放，從而導致身體依賴，這些遞質(zhì)通過激活中腦皮質(zhì)激素多巴胺系統(tǒng)產(chǎn)生增強作用[3]。尼古丁在人體中可以通過各種途徑會代謝為降尼古盯可的寧、降
第2章食用菌中八種煙堿類化合物的檢測方法學建立-25-等度洗脫的流動相條件既能將各目標峰完全分離，又能快速洗脫，保證高效洗脫（結(jié)果見圖2-3）。圖2-3QTRAP5500液質(zhì)聯(lián)用儀優(yōu)化流動相后的色譜圖注：HILIC色譜柱，0.3mL/min梯度洗脫，A相初始10%0.1%甲酸10mM乙酸銨水溶液，B相乙腈2.4.3.2線性范圍和檢出限定量限將空白溶劑乙腈混合標準系列工作液及基質(zhì)混合標準系列工作液注入液質(zhì)聯(lián)用色譜儀中，測定相應(yīng)的峰面積，以標準工作液的濃度（X）為橫坐標，以峰面積(Y)縱坐標，繪制校準曲線并列出校準曲線的線性方程和線性范圍。結(jié)果見表2-5，本法線性范圍較寬，大約在0.3-500μg/kg范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)大于0.995。表2-5儀器AB5500線性關(guān)系、相關(guān)系數(shù)及檢出限、定量限(μg/kg)名稱線性范圍線性方程R2LODLOQ可替寧0.03-500Y=6.96e5x-5.118e40.99820.010.03降煙堿0.2-500Y=1.21e5x-98630.99690.050.2新煙堿0.03-500Y=5.53e4x+63680.99590.010.03尼古丁0.3-500Y=1.21e5x+4.42e50.99800.10.3二烯煙堿0.3-500Y=1.92e5x+1.25e50.99900.10.3去氫煙堿0.3-500Y=2.79e5x-7.34e40.99930.10.32.3-聯(lián)吡啶0.06-500Y=1.83e6x-1.18e50.99810.020.06麥沙明0.03-500Y=2.51e5x+1.61e50.99830.010.03取混合標準中間液0.1mL加入到0.5g基質(zhì)中，加乙腈定容25mL后過濾，取上清液稀釋后，過濾膜進行分析得出8種化合物的檢出信號，以信號和噪音（S/N）的比值作為考察定量限和檢出限的指標。S/N=10的信號濃度為定量限，S/N=3的信號濃度為檢出限，結(jié)果見表2-5。定量限及檢出限較低，LOD為0.01-0.5μg/kg，LOQ在0.03-0.3μg/kg
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