發(fā)布時間：2021-05-20 00:04

　　四環(huán)素作為目前可用的低廉廣譜抗生素種類之一,在人類疾病治療、畜牧生產(chǎn)和水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛用于細(xì)菌、原蟲和真菌感染的治療,具有重要的使用價值。由于四環(huán)素預(yù)防治療疾病的效果明顯,在使用過程中常出現(xiàn)濫用情況,導(dǎo)致動物源食品中存在一定的四環(huán)素殘留,而人類長期接觸低水平的抗生素可能會引起過敏性反應(yīng)、對肝臟和腸胃造成傷害,甚至導(dǎo)致潛在耐藥菌的產(chǎn)生。因此,開發(fā)具有高選擇性、高靈敏度的四環(huán)素檢測方法已成為四環(huán)素殘留檢測領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。相比于傳統(tǒng)方法的高成本、操作復(fù)雜、儀器昂貴等弊端,將納米模擬酶信號放大技術(shù)、核酸適配體特異性識別作用與比色可視化傳感技術(shù)相結(jié)合的生物傳感器不僅具有較高的靈敏度、較強(qiáng)的特異性,而且操作簡單、耗時短、樣品消耗小、分析成本低,因而受到了廣泛的研究和應(yīng)用。因此,本文利用溶劑熱法合成了四氧化三鐵納米模擬酶,利用氧化還原法在四氧化三鐵表面包裹銅合成核殼型納米材料Fe₃O₄@Cu,并將Fe₃O₄@Cu納米模擬酶與核酸適配體相結(jié)合,開發(fā)了兩種選擇性好、靈敏度高、低成本、簡單快速的比色傳感器,用于四環(huán)素殘留... 

【文章來源】：西華大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 四環(huán)素概況
        1.1.1 四環(huán)素簡介
        1.1.2 食品中四環(huán)素限定標(biāo)準(zhǔn)
        1.1.3 國內(nèi)外食品中四環(huán)素殘留檢測現(xiàn)狀
    1.2 納米材料模擬酶
        1.2.1 納米模擬酶簡介
        1.2.2 納米模擬酶研究進(jìn)展
        1.2.3 影響納米模擬酶活性的因素
        1.2.4 四氧化三鐵納米酶
        1.2.5 四氧化三鐵復(fù)合納米酶
    1.3 核酸適配體
        1.3.1 核酸適配體簡介
        1.3.2 核酸適配體的優(yōu)勢
    1.4 立題意義及研究內(nèi)容
第二章 納米材料的制備和表征
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)試劑及制備方法
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 Fe_3O_4納米材料的制備
        2.3.2 Fe_3O_4@Cu核殼型納米材料制備
        2.3.3 納米模擬酶動力學(xué)分析
        2.3.4 酶促反應(yīng)底物濃度選擇
        2.3.5 納米酶活性穩(wěn)定性測定
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 納米材料表征
        2.4.2 酶促反應(yīng)動力學(xué)
        2.4.3 最佳底物濃度的確定
        2.4.4 核殼型納米材料酶活穩(wěn)定性
    2.5 小結(jié)
第三章 基于納米模擬酶與適配體“turn off”型比色傳感器檢測體系的建立
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑及制備方法
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 Fe_3O_4@Cu納米模擬酶的合成
        3.3.2 檢測體系操作流程
        3.3.3 最佳封閉劑濃度的選擇
        3.3.4 最佳cDNA-1濃度選擇
        3.3.5 最佳Aptamer濃度選擇
        3.3.6 最佳cDNA-2濃度選擇
        3.3.7 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定
        3.3.8 方法特異性研究
        3.3.9 加標(biāo)回收率研究
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 方法原理
        3.4.2 最佳封閉劑濃度的確定
        3.4.3 最佳cDNA-1濃度的確定
        3.4.4 最佳Aptamer濃度的確定
        3.4.5 最佳cDNA-2濃度的確定
        3.4.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得
        3.4.7 檢測體系特異性
        3.4.8 牛奶樣品中的加標(biāo)回收
    3.5 小結(jié)
第四章 基于納米模擬酶與適配體“turn on”型比色傳感器檢測體系的建立
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑及制備方法
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 Fe_3O_4@Cu納米模擬酶的合成
        4.3.2 檢測體系操作流程
        4.3.3 瓊脂糖電泳實(shí)驗(yàn)
        4.3.4 最佳cDNA-1濃度選擇
        4.3.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定
        4.3.6 方法特異性研究
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 方法原理
        4.4.2 雜交反應(yīng)可行性驗(yàn)證
        4.4.3 最佳cDNA-1濃度的確定
        4.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得
        4.4.5 檢測體系特異性
    4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文及科研結(jié)果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高效液相色譜法在藥殘測定中的研究進(jìn)展[J]. 賈書芬,梁存軍,耿曉修,黎曉敏.  畜禽業(yè). 2006(10)

博士論文
[1]基于核酸適配體傳感器的蜂蜜中四環(huán)素殘留快速檢測方法研究[D]. 王賽.北京化工大學(xué) 2017

碩士論文
[1]基于多層納米核-殼結(jié)構(gòu)復(fù)合材料模擬酶的制備及其應(yīng)用研究[D]. 黃飛.武漢工程大學(xué) 2018
[2]基于氧化石墨烯—適配體傳感檢測食品中四環(huán)素殘留的研究[D]. 唐亞利.北京化工大學(xué) 2017
[3]核酸適配體技術(shù)應(yīng)用于四環(huán)素類抗生素的快速檢測新方法研究[D]. 羅艷芳.上海交通大學(xué) 2014



本文編號：3196687