黃曲霉毒素B1是常出現(xiàn)在霉變的農(nóng)產(chǎn)品中的一種由黃曲霉菌代謝產(chǎn)生的毒素,它毒性極強(qiáng),是砒霜毒性的68倍。若食用超過(guò)一定劑量的黃曲霉毒素B1則會(huì)導(dǎo)致急性疾病,例如腹瀉、肝臟受損等,嚴(yán)重情況下甚至?xí)䦟?dǎo)致死亡。因此,一種新型農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素B1快速檢測(cè)方法的建立對(duì)于保障世界食品衛(wèi)生安全有著重大的意義。本論文圍繞以下三個(gè)方面展開(kāi)了討論:（1）經(jīng)典型免疫層析黃曲霉毒素B1檢測(cè)技術(shù)建立基于抗原和抗體之間的特異性免疫識(shí)別是經(jīng)典的免疫層析方法的基本原理,其主要試驗(yàn)方案也是根據(jù)這一實(shí)驗(yàn)原理制定的。首先利用膠體金作為可見(jiàn)光下標(biāo)記物,用于顯色,在膠體金表面通過(guò)靜電吸附標(biāo)記上黃曲霉毒素B1抗體,通過(guò)肉眼觀察C/T線的顯色情況來(lái)判斷膠體金標(biāo)記的抗體是否有和T線上的包被原或C線上羊抗鼠二抗結(jié)合,從而分析樣品中黃曲霉毒素B1的含量,并進(jìn)行定量分析。實(shí)驗(yàn)中具體優(yōu)化了用于標(biāo)記的膠體金中的重要參數(shù),在得到的最佳實(shí)驗(yàn)條件下,可以實(shí)現(xiàn)5分鐘內(nèi)完成檢測(cè),且靈敏度達(dá)到0.5μg/L,在0.1～5μg/L范圍內(nèi)表現(xiàn)出良好線性（R²=0.9872）,本技術(shù)重復(fù)性強(qiáng)、穩(wěn)定性高,且具有非常高的特異性,可以有效的檢測(cè)... 

【文章來(lái)源】：合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 黃曲霉毒素 B1 產(chǎn)生及危害
    1.2 黃曲霉毒素 B1 的經(jīng)典儀器檢測(cè)方法
        1.2.1 高效液相色譜法檢測(cè)黃曲霉毒素B1
        1.2.2 薄層色譜法檢測(cè)黃曲霉毒素B1
        1.2.3 液質(zhì)聯(lián)用法檢測(cè)黃曲霉毒素 B1
    1.3 黃曲霉毒素B1的快速檢測(cè)方法
        1.3.1 近紅外光譜法檢測(cè)黃曲霉毒素B1
        1.3.2 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)黃曲霉毒素B1
        1.3.3 生物傳感器檢測(cè)黃曲霉毒素B1
    1.4 膠體金免疫側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)
    1.5 本文主要研究?jī)?nèi)容
第二章 黃曲霉毒素 B1 經(jīng)典型免疫層析檢測(cè)技術(shù)建立
    2.1 經(jīng)典型免疫層析檢測(cè)方法的技術(shù)原理
    2.2 主要材料與設(shè)備
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 主要儀器設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 標(biāo)記材料膠體金的制備與保存
        2.3.2 材料前處理以及溶液配置
        2.3.3 黃曲霉毒素B1單克隆抗體與膠體金的偶聯(lián)標(biāo)記
        2.3.4 層析膜的種類(lèi)優(yōu)化
        2.3.5 黃曲霉毒素B1經(jīng)典型免疫層析檢測(cè)實(shí)驗(yàn)相關(guān)參數(shù)優(yōu)化
        2.3.6 標(biāo)準(zhǔn)樣品的檢測(cè)與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 膠體金的表征以及保存實(shí)驗(yàn)
        2.4.2 層析膜選擇結(jié)果
        2.4.3 膠體金與抗體偶聯(lián)性能驗(yàn)證
        2.4.4 偶聯(lián)pH值優(yōu)化
        2.4.5 抗體添加量?jī)?yōu)化
        2.4.6 封閉劑選擇以及封閉劑添加量的優(yōu)化
        2.4.7 重懸液選擇優(yōu)化
        2.4.8 T線噴膜濃度優(yōu)化
        2.4.9 反應(yīng)時(shí)間選擇優(yōu)化
        2.4.10 特異性驗(yàn)證
        2.4.11 標(biāo)準(zhǔn)樣品的檢測(cè)與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
    2.5 小結(jié)
第三章 改進(jìn)型黃曲霉毒素B1免疫側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)技術(shù)建立
    3.1 改進(jìn)型黃曲霉毒素 B1 免疫層析檢測(cè)方法的技術(shù)原理
    3.2 主要材料與設(shè)備
        3.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 主要儀器設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 金標(biāo)抗體偶聯(lián)物用量
        3.3.2 上樣量的優(yōu)化
        3.3.3 冷凍干燥工藝條件優(yōu)化優(yōu)化
        3.3.4 改進(jìn)型黃曲霉毒素B1檢測(cè)方法性能測(cè)試及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    3.4 結(jié)果和討論
        3.4.1 金標(biāo)抗體偶聯(lián)物用量的優(yōu)化
        3.4.2 上樣量的優(yōu)化
        3.4.3 冷凍干燥工藝條件優(yōu)化
        3.4.4 改進(jìn)型黃曲霉毒素B1檢測(cè)方法性能測(cè)試及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    3.5 小結(jié)
第四章 茶葉中黃曲霉毒素B1超靈敏免疫側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)建立
    4.1 前言
    4.2 主要材料與設(shè)備
        4.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 主要儀器設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 基質(zhì)效應(yīng)影響分析
        4.3.2 稀釋倍數(shù)優(yōu)化
        4.3.3 四種茶樣中超靈敏黃曲霉毒素檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    4.4 結(jié)果和討論
        4.4.1 基質(zhì)效應(yīng)影響確定
        4.4.2 稀釋倍數(shù)優(yōu)化
        4.4.3 四種茶樣中超靈敏黃曲霉毒素 B1 檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)活動(dòng)及成果清單


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]電化學(xué)生物傳感器在黃曲霉毒素檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 惠媛媛,王畢妮,彭海霞.  食品工業(yè)科技. 2019(02)
[4]薄層色譜法檢測(cè)玉米中黃曲霉毒素B1[J]. 馮莉.  現(xiàn)代畜牧科技. 2018(08)
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[8]近五年我國(guó)近紅外光譜分析技術(shù)研究與應(yīng)用進(jìn)展[J]. 褚小立,陸婉珍.  光譜學(xué)與光譜分析. 2014(10)
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博士論文
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