大蒜在加工過程中常常出現(xiàn)綠變,嚴(yán)重影響了產(chǎn)品品質(zhì)。低溫貯藏一段時(shí)間的大蒜能夠綠變,常溫貯藏的大蒜不能綠變。研究表明低溫能夠誘導(dǎo)大蒜綠變前體S-1-丙烯基-L-半胱氨酸亞砜（1-PeCSO）的形成,然而低溫調(diào)控大蒜綠變的機(jī)制尚不明確。本文在現(xiàn)有研究基礎(chǔ)上分析了不同貯藏溫度條件下大蒜轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平上的差異,分析并驗(yàn)證調(diào)控大蒜綠變的關(guān)鍵通路,具體取得的進(jìn)展如下:1、對不同溫度貯藏的大蒜進(jìn)行表觀分析以及轉(zhuǎn)錄組測序和蛋白組分析。結(jié)果表明,常溫貯藏的大蒜不能綠變,低溫貯藏的大蒜極易綠變。由不同溫度處理的大蒜制成的蒜泥在表觀上具有顯著差異。不同溫度處理的大蒜基因和蛋白表達(dá)上也存在顯著差異。低溫相比于常溫處理的大蒜有7308個(gè)基因下調(diào),上調(diào)基因?yàn)?073個(gè),蛋白有468個(gè)下調(diào),上調(diào)蛋白為393個(gè)。2、基于上述差異表達(dá)基因和蛋白進(jìn)行KEGG功能富集,篩選關(guān)鍵的代謝途徑。其中涉及到提供能量的代謝通路有糖酵解途徑、三羧酸循環(huán)以及磷酸戊糖途徑;涉及到大蒜綠變前體1-PeCSO形成的谷胱甘肽代謝通路;涉及到中間體吡咯基氨基酸形成的氨基酸代謝通路中有丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝,甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸代謝,半... 

【文章來源】：河北工程大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 研究背景
    1.2 大蒜概述
    1.3 大蒜綠變
    1.4 轉(zhuǎn)錄組技術(shù)及其應(yīng)用現(xiàn)狀
    1.5 蛋白組學(xué)技術(shù)及其應(yīng)用現(xiàn)狀
    1.6 轉(zhuǎn)錄組和蛋白組學(xué)在大蒜中研究進(jìn)展
    1.7 研究內(nèi)容及技術(shù)路線
第2章 不同溫度貯藏的大蒜基因蛋白差異表達(dá)分析
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器與設(shè)備
        2.2.3 樣品處理
        2.2.4 大蒜表型鑒定
        2.2.5 RNA提取
        2.2.6 測序文庫和RNA-seq
        2.2.7 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量控制
        2.2.8 基因表達(dá)量分析
        2.2.9 基因功能注釋
        2.2.10 基因富集分析
        2.2.11 蛋白質(zhì)提取、消化和iTRAQ標(biāo)記
        2.2.12 質(zhì)譜分析及序列數(shù)據(jù)庫搜索
        2.2.13 蛋白功能注釋
        2.2.14 蛋白功能富集
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 不同溫度處理大蒜顏色變化
        2.3.2 測序結(jié)果質(zhì)量評估
        2.3.3 基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)樣品間關(guān)系分析及差異表達(dá)
        2.3.4 基因GO功能注釋
        2.3.5 基因KEGG功能富集
        2.3.6 蛋白質(zhì)質(zhì)控評估
        2.3.7 基于蛋白數(shù)據(jù)樣品間關(guān)系分析及差異表達(dá)
        2.3.8 蛋白GO功能注釋
        2.3.9 蛋白KEGG功能富集
    2.4 本章小結(jié)
第3章 低溫調(diào)控大蒜綠變代謝通路分析
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 差異基因表達(dá)
        3.2.3 差異蛋白表達(dá)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 能量代謝關(guān)鍵因子差異表達(dá)分析
        3.3.2 谷胱甘肽代謝關(guān)鍵因子差異表達(dá)分析
        3.3.3 氨基酸代謝關(guān)鍵因子差異表達(dá)分析
        3.3.4 激素代謝關(guān)鍵因子差異表達(dá)分析
    3.4 本章小結(jié)
第4章 低溫調(diào)控大蒜綠變代謝通路驗(yàn)證
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 儀器與設(shè)備
        4.2.3 ATP含量
        4.2.4 差異基因熒光定量PCR分析
        4.2.5 氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量
        4.2.6 還原型谷胱甘肽(GSH)含量
        4.2.7 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性
        4.2.8 谷胱甘肽還原酶(GR)活性
        4.2.9 谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)活性
        4.2.10 葡萄糖-6-磷酸-1-脫氫酶(G6PDH)活性
        4.2.11 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6-PGDH)活性
        4.2.12 胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)活性
        4.2.13 氨基酸含量測定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 代謝途徑中能量代謝驗(yàn)證分析
        4.3.2 代謝途徑中谷胱甘肽代謝驗(yàn)證分析
        4.3.3 代謝途徑中氨基酸代謝驗(yàn)證分析
    4.4 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介



本文編號：3186542