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天麻醇提成分參與灰樹花發(fā)酵及其對胞外多糖降血糖能力的研究

發(fā)布時間:2021-05-11 21:57
  灰樹花是一種藥食兩用真菌,具有增強免疫力的功效,子實體栽培在我國主要分布于四川、云南、廣西及福建等地。目前,國內(nèi)外研究主要集中在中藥成分參與灰樹花深層發(fā)酵促進其代謝產(chǎn)物的生物合成上,對中藥提取物參與灰樹花深層發(fā)酵影響其代謝產(chǎn)物生物活性的研究甚少。本論文重點進行天麻醇提成分參與灰樹花發(fā)酵,對灰樹花胞外多糖降血糖能力影響的初步研究。通過檢測體外α-葡萄糖苷酶抑制活性,以及建立四氧嘧啶(ALX)誘導(dǎo)的糖尿病小鼠模型,探究天麻醇提成分對灰樹花胞外多糖降血糖能力的影響,從而為灰樹花多糖源功能食品的開發(fā)研究提供一定的理論基礎(chǔ)和科學(xué)參考。主要研究結(jié)果如下:(1)以灰樹花胞外多糖為研究對象,以脫色率、多糖保留率及體外抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力為考察指標(biāo),在活性炭法、過氧化氫法及樹脂法三種脫色方法中篩選出適合灰樹花胞外多糖脫色的可行工藝和方法,在單因素試驗的基礎(chǔ)上,采用正交試驗對脫色條件進行優(yōu)化。結(jié)果表明,樹脂法優(yōu)于另兩種方法且在脫色溫度55℃、脫色時間420 min、脫色pH 5.0、多糖質(zhì)量濃度10 mg/mL的條件下,灰樹花胞外多糖的脫色率可達(dá)90.61%,多糖保留率為78.23%。(2)采用高... 

【文章來源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 中藥天麻
        1.1.1 天麻成分
        1.1.2 天麻醇提物
            1.1.2.1 天麻素
            1.1.2.2 對羥基苯甲醛
            1.1.2.3 對羥基苯甲醇
    1.2 真菌灰樹花
        1.2.1 灰樹花的液體深層發(fā)酵
        1.2.2 灰樹花的代謝成分
    1.3 真菌多糖
        1.3.1 真菌多糖的生物活性
            1.3.1.1 抗腫瘤
            1.3.1.2 降血糖
            1.3.1.3 抗氧化
            1.3.1.4 免疫調(diào)節(jié)
        1.3.2 脫色處理對真菌多糖生物活性的影響
    1.4 灰樹花多糖降血糖活性的研究進展
    1.5 中藥成分對微生物發(fā)酵的影響
    1.6 研究的背景及意義
    1.7 主要研究內(nèi)容
第二章 灰樹花胞外多糖脫色工藝研究
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 灰樹花菌種
        2.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        2.2.3 實驗藥品
    2.3 實驗方法
        2.3.1 培養(yǎng)基
            2.3.1.1 馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基
            2.3.1.2 液體種子培養(yǎng)基
            2.3.1.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        2.3.2 培養(yǎng)方法
            2.3.2.1 斜面種子培養(yǎng)
            2.3.2.2 液體種子培養(yǎng)
            2.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        2.3.3 胞外多糖的制備
        2.3.4 脫色方法
            2.3.4.1 活性炭脫色
            2.3.4.2 過氧化氫脫色
            2.3.4.3 大孔樹脂脫色
        2.3.5 測定方法
            2.3.5.1 脫色率的測定及計算方法
            2.3.5.2 多糖保留率的測定及計算方法
            2.3.5.3 脫色效果的評價方法
            2.3.5.4 灰樹花胞外多糖的體外α-葡萄糖苷酶抑制活性測定
        2.3.6 脫色工藝單因素試驗
            2.3.6.1 靜態(tài)吸附動力學(xué)試驗
            2.3.6.2 多糖質(zhì)量濃度對樹脂脫色的影響
            2.3.6.3 脫色溫度對樹脂脫色的影響
            2.3.6.4 脫色pH值對樹脂脫色的影響
        2.3.7 正交試驗
        2.3.8 統(tǒng)計方法
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        2.4.2 不同脫色方法的灰樹花胞外多糖脫色效果分析
            2.4.2.1 活性炭脫色
            2.4.2.2 過氧化氫脫色
            2.4.2.3 大孔樹脂脫色
            2.4.2.4 不同脫色方法脫色效果評價
        2.4.3 脫色方法對灰樹花胞外多糖的體外α-葡萄糖苷酶抑制活性測定
        2.4.4 樹脂的篩選
        2.4.5 灰樹花胞外多糖脫色單因素試驗
            2.4.5.1 D315 樹脂的靜態(tài)吸附色素動力學(xué)過程
            2.4.5.2 多糖質(zhì)量濃度對D315 樹脂脫色的影響
            2.4.5.3 脫色溫度對D315 樹脂脫色能力的影響
            2.4.5.4 脫色p H值對D315 樹脂脫色能力的影響
        2.4.6 灰樹花胞外多糖脫色正交試驗
        2.4.7 灰樹花胞外多糖的體外α-葡萄糖苷酶抑制活性測定
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第三章 天麻醇提成分參與灰樹花發(fā)酵及其胞外多糖的體外α-葡萄糖苷酶抑制活性研究
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 天麻與實驗菌種
        3.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        3.2.3 實驗藥品
    3.3 實驗方法
        3.3.1 天麻醇提物的制備
        3.3.2 培養(yǎng)基
            3.3.2.1 斜面培養(yǎng)基
            3.3.2.2 液體種子培養(yǎng)基
            3.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        3.3.3 培養(yǎng)方法
            3.3.3.1 斜面種子培養(yǎng)
            3.3.3.2 液體種子培養(yǎng)
            3.3.3.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        3.3.4 胞外多糖的制備
            3.3.4.1 胞外多糖的制備
            3.3.4.2 胞外多糖的純化
        3.3.5 分析方法
            3.3.5.1 菌絲體生物量的測定
            3.3.5.2 胞外多糖含量的測定
            3.3.5.3 高效液相色譜分析
            3.3.5.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        3.3.6 體外α-葡萄糖苷酶抑制活性的測定
        3.3.7 統(tǒng)計方法
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 灰樹花液體發(fā)酵菌絲體生長曲線及產(chǎn)胞外多糖情況
        3.4.2 不同濃度的天麻醇提物對灰樹花菌絲體生物量及胞外多糖合成的影響
        3.4.3 對羥基苯甲醛標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.4 對羥基苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.5 天麻素標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.6 天麻醇提物成分的定量分析
        3.4.7 天麻醇提成分對灰樹花菌絲體生物量及胞外多糖合成的影響
        3.4.8 天麻醇提物及三種主要成分對灰樹花胞外多糖的體外α-葡萄糖苷酶抑制活性的影響
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第四章 天麻醇提成分參與灰樹花發(fā)酵所得胞外多糖對四氧嘧啶模型糖尿病小鼠的降血糖作用
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 實驗菌種與天麻
        4.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        4.2.3 實驗藥品
        4.2.4 實驗動物及分組
    4.3 實驗方法
        4.3.1 培養(yǎng)基
            4.3.1.1 斜面培養(yǎng)基
            4.3.1.2 液體種子培養(yǎng)基
            4.3.1.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        4.3.2 培養(yǎng)方法
            4.3.2.1 斜面種子培養(yǎng)
            4.3.2.2 液體種子培養(yǎng)
            4.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        4.3.3 胞外多糖的制備
        4.3.4 指標(biāo)測定
        4.3.5 統(tǒng)計方法
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 小鼠狀態(tài)觀察
        4.4.2 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠血糖的影響
        4.4.3 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠體重的影響
        4.4.4 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠飲水量、飲食量的影響
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
第五章 天麻醇提成分參與灰樹花發(fā)酵所得胞外多糖對四氧嘧啶模型糖尿病小鼠的血脂代謝、氧化應(yīng)激及臟器損傷的影響
    5.1 引言
    5.2 實驗材料
        5.2.1 實驗菌種與天麻
        5.2.2 實驗儀器與設(shè)備
        5.2.3 實驗藥品
        5.2.4 實驗動物及分組
    5.3 實驗方法
        5.3.1 培養(yǎng)基
            5.3.1.1 斜面培養(yǎng)基
            5.3.1.2 液體種子培養(yǎng)基
            5.3.1.3 發(fā)酵培養(yǎng)基
        5.3.2 培養(yǎng)方法
            5.3.2.1 斜面種子培養(yǎng)
            5.3.2.2 液體種子培養(yǎng)
            5.3.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)
        5.3.3 灰樹花胞外多糖的制備
        5.3.4 指標(biāo)測定
        5.3.5 臟器組織的HE染色
            5.3.5.1 石蠟組織切片的制作
            5.3.5.2 HE染色觀察組織形態(tài)的變化流程
            5.3.5.3 圖像采集
        5.3.6 統(tǒng)計方法
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠血脂代謝的影響
        5.4.2 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠氧化應(yīng)激的影響
        5.4.3 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠肝糖原含量的影響
        5.4.4 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠臟器系數(shù)的影響
        5.4.5 灰樹花胞外多糖對糖尿病小鼠臟器損傷的影響
        5.4.6 腎臟石蠟切片形態(tài)學(xué)變化
    5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 論文創(chuàng)新點
    6.3 展望
主要參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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[7]灰樹花多糖降血糖活性及作用機理的研究[D]. 周富川.天津科技大學(xué) 2013
[8]猴頭菌多糖提取、脫色工藝及生物活性的研究[D]. 蔣俊.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[9]靈芝多糖脫色研究[D]. 曹鵬偉.江南大學(xué) 2009
[10]灰樹花胞外多糖的分離純化及降血糖作用研究[D]. 金玉妍.天津科技大學(xué) 2009



本文編號:3182177

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