作為食源性活性肽,大豆肽具有各種功能活性,例如抗氧化,降血壓和抗炎。食源性活性肽在滿足癌癥患者的身體功能和營養(yǎng)需求的同時干預(yù)癌細(xì)胞生長增殖。原發(fā)性肝癌是最常見的惡性腫瘤之一,最常見的類型是肝細(xì)胞癌（HCC）,目前關(guān)于癌癥患者食用食源性活性肽的研究報道尚少。本文以免疫活性大豆寡肽QRPR（Gln-Arg-Pro-Arg）、HCQRPR（His-Cys-Gln-Arg-Pro-Arg）為研究對象,選用Hep G2人肝癌細(xì)胞為模型細(xì)胞,從細(xì)胞凋亡角度出發(fā),從分子水平探討大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）抑制Hep G2細(xì)胞增殖的機制;并從結(jié)構(gòu)與功效的關(guān)系入手,探索大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）在Hep G2細(xì)胞增殖過程中發(fā)揮的作用。本論文主要研究內(nèi)容與結(jié)果如下:（1）進(jìn)行大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）對Hep G2細(xì)胞活力影響的評價,選用Hep G2細(xì)胞作為模型細(xì)胞。MTS試驗結(jié)果表明大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）對Hep G2細(xì)胞增殖有抑制作用,在相同處理濃度和時間條件下,大豆寡肽QRPR、HCQRPR聯(lián)合處理Hep G2細(xì)胞比兩者單獨處理的抑制率高,可顯著抑制Hep G2細(xì)胞... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫詞表
第一章 緒論
    1.1 大豆蛋白和大豆肽的研究進(jìn)展
        1.1.1 大豆蛋白概況
        1.1.2 大豆肽簡介
        1.1.3 大豆肽與免疫活性
        1.1.4 大豆肽營養(yǎng)價值
    1.2 細(xì)胞凋亡研究概況
        1.2.1 細(xì)胞凋亡的概念及過程
        1.2.2 細(xì)胞凋亡的信號傳導(dǎo)
        1.2.3 細(xì)胞凋亡的體外研究方法
        1.2.4 多肽物質(zhì)和腫瘤細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展
    1.3 TNF-α通路
    1.4 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)鑒定
    1.5 本論文的研究內(nèi)容及創(chuàng)新點
        1.5.1 研究內(nèi)容
        1.5.2 本研究的總體技術(shù)路線
        1.5.3 本研究的創(chuàng)新點
    1.6 本論文的研究意義
第二章 大豆寡肽對Hep G2 細(xì)胞增殖的影響
    2.1 引言
    2.2 材料與設(shè)備
        2.2.1 培養(yǎng)細(xì)胞系
        2.2.2 儀器與設(shè)備
        2.2.3 材料與試劑
    2.3 試驗方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 細(xì)胞活力檢測
        2.3.3 細(xì)胞的形態(tài)觀察
        2.3.4 細(xì)胞周期檢測
        2.3.5 實時熒光定量PCR檢測PTEN基因的表達(dá)水平
        2.3.6 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR對 Hep G2 細(xì)胞活力的影響
        2.4.2 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR對 Hep G2 細(xì)胞形態(tài)的影響
        2.4.3 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR對 Hep G2 細(xì)胞周期的影響
        2.4.4 PTEN的 mRNA水平變化
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
第三章 大豆寡肽誘導(dǎo)Hep G2 細(xì)胞凋亡的研究
    3.1 引言
    3.2 材料與設(shè)備
        3.2.1 培養(yǎng)細(xì)胞系
        3.2.2 儀器與設(shè)備
        3.2.3 材料與試劑
    3.3 試驗方法
        3.3.1 通過透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化
        3.3.2 Annexin V-FITC/PI雙染色凋亡測定
        3.3.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗測定腫瘤壞死因子TNF-α
        3.3.4 實時熒光定量PCR檢測caspase-8和caspase-3 的表達(dá)水平
        3.3.5 Western-blot檢測caspase-8和caspase-3 的表達(dá)水平
        3.3.6 數(shù)據(jù)處理與分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR對細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響
        3.4.2 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
        3.4.3 TNF-α分泌水平的變化
        3.4.4 Caspase-8的mRNA和蛋白水平變化
        3.4.5 Caspase-3的mRNA和蛋白水平變化
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第四章 大豆寡肽構(gòu)效關(guān)系的預(yù)測
    4.1 引言
    4.2 材料與設(shè)備
        4.2.1 儀器與設(shè)備
        4.2.2 材料與試劑
    4.3 試驗方法
        4.3.1 圓二色譜
        4.3.2 傅里葉變換紅外掃描光譜
        4.3.3 等電點測定
        4.3.4 結(jié)構(gòu)預(yù)測
        4.3.5 數(shù)據(jù)處理與分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 大豆寡肽的結(jié)構(gòu)分析
        4.4.2 大豆寡肽的官能團(tuán)分析
        4.4.3 大豆寡肽的等電點
        4.4.4 大豆寡肽的結(jié)構(gòu)預(yù)測
        4.4.5 大豆寡肽的等電點預(yù)測
        4.4.6 大豆寡肽的親疏水性預(yù)測
    4.5 討論
    4.6 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介及科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3181797