發(fā)布時間：2021-04-30 02:12

　　近年來,我國羊肉產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛,但是冷卻羊肉產(chǎn)品在運輸和貯藏過程中極易腐敗變質,造成了非常大的經(jīng)濟損失。假單胞菌（Pseudomonas）是冷卻羊肉有氧冷藏條件下的優(yōu)勢腐敗菌,噬菌體作為一種綠色、安全、有效的抑菌制劑,可以抑制假單胞菌的生長繁殖,有效延緩冷卻羊肉的腐敗。本試驗通過研究假單胞菌噬菌體的生物學特性、基因組學及在冷卻羊肉中的初步應用,為噬菌體在食品領域的研究及應用奠定基礎。研究結果如下:采用平板涂布法從冷卻羊肉中分離篩選假單胞菌,通過菌落形態(tài)觀察、生理生化試驗以及16S r DNA序列測定,共鑒定出24株假單胞菌。以24株假單胞菌分離株和實驗室保藏的兩株銅綠假單胞菌標準株PAO1和PAK為宿主菌,利用點滴法和雙層平板法,分離噬菌體,共獲得6株（PSY-1、PSJ-1、vB PS-1、vB PS-2、vB PS-3、vB PS-4）假單胞菌噬菌體。選取裂解能力最強,裂解譜最寬的2株噬菌體進行生物學特性研究。透射電鏡觀察顯示,噬菌體SPY-1屬有尾噬菌體目肌尾噬菌體科,噬菌體SPJ-1屬有尾噬菌體目長尾噬菌體科。噬菌體PSY-1和PSJ-1的最佳感染復數(shù)分別是0.01和0.1,噬菌... 

【文章來源】：內蒙古農(nóng)業(yè)大學內蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 冷卻羊肉中常見的假單胞菌及控制方法
        1.1.1 冷卻羊肉發(fā)展現(xiàn)狀
        1.1.2 冷卻羊肉中常見的假單胞菌
        1.1.3 冷卻羊肉中假單胞菌的控制方法
    1.2 噬菌體
        1.2.1 噬菌體簡介
        1.2.2 噬菌體控制食源性病原菌的優(yōu)勢
        1.2.3 噬菌體在控制食源性病原菌方面的研究應用
    1.3 研究的目的和意義
    1.4 研究采用的技術路線
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 冷卻羊肉樣品及噬菌體樣品
        2.1.2 培養(yǎng)基與緩沖液
        2.1.3 主要試劑及來源
        2.1.4 儀器與設備
    2.2 試驗方法
        2.2.1 冷卻羊肉中假單胞菌的分離純化及培養(yǎng)
        2.2.2 分離株的生理生化試驗
        2.2.3 菌株16S rDNA擴增及序列測定
        2.2.4 噬菌體的分離與純化
        2.2.5 噬菌體的增殖
        2.2.6 噬菌體的宿主譜的測定
        2.2.7 噬菌體的電鏡觀察
        2.2.8 噬菌體最佳感染復數(shù)
        2.2.9 噬菌體的一步生長曲線
        2.2.10 溫度對噬菌體的影響
        2.2.11 pH對噬菌體的影響
        2.2.12 噬菌體全基因組分析及基因組酶切位點分析
        2.2.13 噬菌體PSJ-1在冷卻羊肉中的應用
        2.2.14 數(shù)據(jù)分析及處理
3 結果與分析
    3.1 冷卻羊肉中假單胞菌的分離純化及鑒定
        3.1.1 疑似假單胞菌菌株的分離純化
        3.1.2 分離株的生理生化試驗
        3.1.3 菌株的16S rDNA序列同源性分析
    3.2 噬菌體的分離純化
    3.3 噬菌體宿主譜的測定
    3.4 噬菌體的生物學特性
        3.4.1 噬菌體的電鏡觀察
        3.4.2 噬菌體最佳感染復數(shù)
        3.4.3 噬菌體的一步生長曲線
        3.4.4 溫度對噬菌體的影響
        3.4.5 pH對噬菌體的影響
    3.5 噬菌體的全基因組分析
        3.5.1 噬菌體PSY-1DNA樣品檢測
        3.5.2 噬菌體酶切位點分析
        3.5.3 噬菌體PSY-1基因組預測及其功能注釋
        3.5.4 噬菌體基因組安全性評估
        3.5.5 噬菌體PSY-1與同屬噬菌體的進化關系分析
    3.6 噬菌體在冷卻羊肉中的應用
        3.6.1 噬菌體PSJ-1在冷卻羊肉中的防腐應用
        3.6.2 冷卻羊肉感官變化結果
4 結論
致謝
參考文獻
作者簡介



本文編號：3168635