畜禽鮮肉及生肉制品摻假和冒充具有一定的普遍性,目前尚無非常成熟、可靠、廉價(jià),并可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場檢驗(yàn)和商業(yè)化開發(fā)的鑒別畜禽肉摻假和冒充的方法。免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)是一種存在于血液和組織液中的物種特異性較強(qiáng)的蛋白質(zhì)。目前IgG為目標(biāo)抗原的肉品物種鑒定報(bào)道較少。本研究以IgG為目標(biāo)抗原,用免疫瓊脂糖凝膠雙擴(kuò)散試驗(yàn)鑒定牛羊肉中摻入馬肉、豬肉或鴨肉;觀察評(píng)價(jià)抗IgG血清的交叉反應(yīng)性,即其物種特異性,探索交叉反應(yīng)的避免策略;評(píng)價(jià)摻假肉檢出限和結(jié)果重現(xiàn)性,從而論證IgG為目標(biāo)抗原建立免疫學(xué)方法鑒別家畜肉真實(shí)性的可行性。結(jié)果除了兔抗鴨IgG血清,兔抗馬IgG血清、兔抗豬IgG血清與牛和綿羊IgG或肉浸出汁都有一定交叉反應(yīng),可將抗血清稀釋到合適濃度避免交叉反應(yīng)的出現(xiàn)。山羊抗馬IgG血清、山羊抗豬IgG血清均未發(fā)現(xiàn)與牛、綿羊和駱駝IgG或肉浸出汁有交叉反應(yīng)。說明用牛羊同科的山羊制備目標(biāo)IgG抗血清,可避免與牛羊IgG發(fā)生交叉反應(yīng)。本研究制備的山羊抗馬IgG血清凝膠雙擴(kuò)散試驗(yàn)效價(jià)可達(dá)1:32(25),與驢肉浸出汁交叉反應(yīng)效價(jià)可達(dá)1:16(24),基本與馬IgG反應(yīng)效價(jià)相近,因此不適合用于馬肉冒充驢肉的鑒定,但可用于將驢肉摻入其他肉的鑒定。牛和綿羊肉分別按1%、2%、5%、10%、20%和50%摻入馬、豬和鴨肉,進(jìn)行免疫雙擴(kuò)散試驗(yàn)。結(jié)果三種摻假肉的檢出限在2%-5%,結(jié)果重復(fù)性較好,可滿足摻假檢測需要。IgG為目標(biāo)抗原鑒定畜禽鮮肉物種摻假具有可行性。免疫雙擴(kuò)散試驗(yàn)可為市場畜禽肉的真實(shí)性鑒定提供一種簡便、可靠和廉價(jià)的技術(shù)。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TS251.5
【部分圖文】：

哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白種類較多，包括ＩｇＧ邋（ＩｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎＧ）、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＥ和逡逑ＩｇＤ等五種？。其中ＩｇＧ是含量最多，最為穩(wěn)定的一種免疫蛋白質(zhì)。ＩｇＧ分子是有兩逡逑條重鏈和兩條輕鏈組成的“Ｙ”字型球蛋白（如下圖１所示），人類和牛ＩｇＧ分子量大逡逑約１５０ＫＤＷ］。研究表明其抗原性較強(qiáng)，而且物種越遠(yuǎn)其分子量、分子結(jié)構(gòu)和抗原性差逡逑異就更大。譬如禽類ＩｇＧ與哺乳動(dòng)物ＩｇＧ蛋白的物種差異較大，馬屬動(dòng)物（馬和驢）逡逑與偶蹄動(dòng)物（牛、綿羊和山羊）差異較大，駱駝ＩｇＧ分子只有重鏈［４４］，與牛羊差異也逡逑較大，而牛、山羊和綿羊同屬牛科動(dòng)物其ＩｇＧ的同源性應(yīng)該較高。因此利用ＩｇＧ抗原逡逑性的物種差異，建立較為穩(wěn)定準(zhǔn)確的畜禽肉真實(shí)性免疫學(xué)鑒定方法具有很大的可行性，逡逑但ＩｇＧ分子結(jié)構(gòu)可能存在保守區(qū)域，即物種間相似，因此需要觀察評(píng)價(jià)交叉反應(yīng)的大逡逑小，或找到有效的交叉反應(yīng)的控制和避免策略。逡逑擺

本文編號(hào)：2816242