【摘要】：龍須菜(Gracilaria lemaneiformis)是一種傳統(tǒng)的可食性海藻,近年來已成為我國四大經(jīng)濟(jì)栽培海藻之一。龍須菜含豐富的多糖、維生素和礦物質(zhì),脂肪含量極低,被譽為“瘦物”,多糖是其主要的活性成分之一。本課題組前期研究表明,采用酸提法制備的龍須菜多糖具有良好的免疫調(diào)節(jié)、降血糖及抗光老化等功效。本論文通過檸檬酸提取法制備龍須菜多糖(GLP),對其基本化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)和體外模擬胃腸道消化特性進(jìn)行初步研究,并研究GLP對高脂飲食誘導(dǎo)的高血脂小鼠的脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)作用及機理,同時研究GLP對正常小鼠和高血脂小鼠腸道菌群的調(diào)節(jié)作用,為龍須菜生物活性多糖及相關(guān)保健食品的開發(fā)提供理論依據(jù)。本文的主要研究結(jié)果如下:(1)本文采用檸檬酸提取法制備龍須菜多糖(GLP),并對其化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究。酸提法得到的GLP提取率為22.75±0.45%,總糖含量為59.01±0.91%,硫酸基含量為22.85±0.80%,糖醛酸含量為10.41±0.28%,灰分含量為17.83±0.43%,水分含量為7.52±0.28%,蛋白質(zhì)含量僅為1.57±0.37%,還原糖和多酚未檢出,此外,GLP的平均分子量為31.5 kDa,并通過氣相色譜分析得出其主要由半乳糖、葡萄糖、巖藻糖和甘露糖組成,四者的摩爾百分比分別為52.18%、37.37%、5.74%和3.42%,另外還有少量的阿拉伯糖和木糖。通過甲基化分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)GLP是一種以(1→6)型糖苷鍵為主的多糖,另外含有少量的(1→)、(1→3)和(1→4)型糖苷鍵。GLP不具有三股螺旋構(gòu)象。(2)通過體外模擬消化和動物實驗,探究龍須菜多糖(GLP)在體內(nèi)外的消化特性。結(jié)果表明,GLP在體外模擬胃腸道消化的過程中僅發(fā)生少量降解,分子量從31.63±0.20 kDa降至30.57±0.23 kDa。GLP在進(jìn)入小鼠的胃腸消化道后未引起血糖的大幅度波動,GLP的GI值僅為38.39(葡萄糖的GI值為100),表明其是一種有利于維持機體健康的低GI食物。(3)通過動物實驗和高通量測序手段相結(jié)合,研究龍須菜多糖(GLP)對正常小鼠腸道菌群的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明,GLP雖不能明顯增加正常小鼠盲腸菌群的多樣性,但能有效促進(jìn)腸道內(nèi)產(chǎn)生短鏈脂肪酸細(xì)菌如Peptococcus,Roseburia,Butyricicoccus,Coprococcus_1和uncultured_bacterium_f_Ruminococcaceae的生長,并增加糞便中水分含量和丙酸、丁酸和戊酸等短鏈脂肪酸含量,有助于維持腸道健康。(4)通過對小鼠進(jìn)行40天的高膽固醇高脂飲食處理,成功建立高血脂小鼠模型,并研究龍須菜多糖(GLP)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。結(jié)果表明,42天的GLP灌胃處理,可顯著降低高血脂小鼠血清及肝臟中總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量,同時有效降低血清中游離脂肪酸(FFA)的含量。同時GLP可在不影響高血脂小鼠的攝食飲水量的前提下,有效改善高血脂小鼠因高脂飲食導(dǎo)致的肥胖、臟器腫大、附睪周邊脂肪積累和肝臟脂肪積累等情況。另外,GLP可顯著降低高血脂小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的酶活力,有效緩解因高脂飲食導(dǎo)致的肝損傷。(5)通過動物實驗、RT-qPCR技術(shù)、UPLC-MS技術(shù)和16s rDNA測序手段相結(jié)合,較全面地探究了龍須菜多糖(GLP)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝及緩解肝損傷的作用機理。結(jié)果提示:GLP可通過間接上調(diào)高血脂小鼠肝臟內(nèi)PPARα、ACS、CPT1a等基因的表達(dá),促進(jìn)脂肪酸活化成脂酰CoA并進(jìn)入線粒體內(nèi)進(jìn)行氧化分解,從而降低機體內(nèi)甘油三酯和游離脂肪酸的含量;GLP可通過間接上調(diào)高血脂小鼠肝臟內(nèi)LxRα和CYP7A1的表達(dá),促進(jìn)膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸,并促進(jìn)TLCA、GDCA、GUDCA和TUDCA等次級膽汁酸的排泄,從而降低體內(nèi)膽固醇含量。另外,GLP還可通過提高高脂飲食小鼠盲腸內(nèi)Coprococcus_1、Alistipes、Prevotellaceae_UCG-001等菌屬的相對豐度,減少疏水性膽汁酸DCA和CDCA的含量,同時通過提高Roseburia的相對豐度,增加親水性膽汁酸UDCA和TUDCA的含量,從而有效緩解由高脂飲食導(dǎo)致的肝損傷。
【圖文】：

1.1 龍須菜概述1.1.1 龍須菜簡介龍須菜（Gracilaria lemaneiformis）也稱麒麟菜，是紅藻門杉藻目江蘺科江蘺屬下的種植物。作為我國四大經(jīng)濟(jì)栽培海藻之一，龍須菜在中國廣東、海南、山東等地的沿岸帶均有種植，其中廣東省汕頭市南澳島目前已成為我國重要的龍須菜養(yǎng)殖基地之一[1]。為中國傳統(tǒng)食物來源，龍須菜的藥用功效早在 16 世紀(jì)就已被記錄在冊，傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為龍菜“性甘、寒，歸脾經(jīng)”，具有“利尿通淋，，泄熱安神”的功效[2]�，F(xiàn)代研究表明，龍須菜中有豐富的膳食纖維、維生素和微量元素，而脂肪含量僅為 0.5%[3]，故有山珍“瘦物”的譽，食用龍須菜有助于預(yù)防心血管疾病[4]。同時龍須菜含有豐富的氨基酸，是優(yōu)良的蛋質(zhì)來源，除此以外，龍須菜還含有多糖、藻膽蛋白、不飽和脂肪酸等功效成分[5]。其中多糖是龍須菜中最主要的活性成分，被廣泛研究。

主要技術(shù)路線圖
【學(xué)位授予單位】：華南理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TS201.4;TS254.58

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

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相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

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4 劉麗麗;酸性多糖甲基化分析方法的改進(jìn)[D];中國海洋大學(xué);2014年

5 張競男;龍須菜多糖的降解及其降解產(chǎn)物生物活性的研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2014年

6 張昆;龍須菜多糖的結(jié)構(gòu)特征和抗腫瘤活性研究[D];中國海洋大學(xué);2006年

本文編號：2665160