植物的生長發(fā)育離不開磷元素,且磷在生物體內(nèi)發(fā)揮重要作用。植物處于低磷狀態(tài)時會出現(xiàn)生長發(fā)育不良的現(xiàn)象。PHR 1(Phosphate Starvation response 1)是植物參與磷調(diào)控的核心轉(zhuǎn)錄因子,在植物應(yīng)對磷饑餓過程中扮演重要角色。PHR1的作用在很多植物中均已經(jīng)得到了較清晰的研究。但其在草莓中作用尚不清楚。本研究分離了草莓PHR1基因全長序列,構(gòu)建其過表達(dá)載體,并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化法獲得森林草莓(Ruegen)和擬南芥的轉(zhuǎn)基因植株,為揭示草莓PHR1功能和作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：1.從二倍體森林草莓和八倍體鳳梨草莓中克隆出了PHR1基因編碼區(qū)全長序列：二倍體森林草莓PHR1基因全長1542bp,鳳梨草莓PHR1基因全長1524bp,鳳梨草莓PHR1基因長度較短的原因是提前出現(xiàn)終止子。對序列進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn), 二者均屬于MYB-CC蛋白家族,具有應(yīng)對磷變化的調(diào)節(jié)作用。2.以植物表達(dá)載體pRI 101 AN-GUS為基礎(chǔ)載體,利用lde I、Eco RⅠ限制性內(nèi)切酶,將草莓PHR1基因整合到pRI 101 AN-GUS載體上,獲得了PHR1基因的過量表達(dá)載體,分別命...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖５?擴(kuò)增條帶??１－３：?’Ｒｕｅｇｅｎ’：?４－６：?‘艷麗Ｉ??

Ｗ?ＬＯＣ１０１２９９３３７?為模板，設(shè)計全長引物?ＰＨＲ１－Ｆ／ＰＨＲ１－Ｒ。??ＷＰＨ民１－Ｆ／ＰＨＲ１－Ｒ?（表２）為引物，通過ＰＣ艮擴(kuò)增，在’Ｒｕｅｇｅｎ’、＇艷麗＇中各得??到一條約１．５ｋｂ的特異條帶（圖５），該條帶與ＬＯＣ１０１巧９３巧序列的ＣＤＳ區(qū)長度相近，??于....

圖６菌ＰＰＣ民擴(kuò)增條帶??７－９：?’Ｒｕｅｇｅｎ’；?１０－１２：?‘艷麗’??Ｆｉ．６?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅ化ｒａｍ?ｏｆ?ｂａｃｔｅｒｉｕｍ?尸／／ｉ？／??

?■??篩選，選擇色白而圓潤的單一菌落應(yīng)用ＰＣ艮實驗進(jìn)行鑒定（圖６），將結(jié)果鑒定為陽性??克隆的菌液搖茜．，之后委托北京金唯智生物公司進(jìn)行測序。??測序結(jié)果表明森林草菩’Ｒｕｅｇｅｎ’的基因ＣＤＳ長度為１５４２ｂｐ，栽培草霉＇艷??麗＇７＾謝？７基因ＣＤＳ長度為１５２４ｂｐ，通過....

圖８草霉戶／／度７基因結(jié)構(gòu)示意圖??Ｆｉ．８?Ｔｈｅ?ｅｎｅ?ｓｔｒｕｃｔｒａｌ?ｄｉａｒａｍ?ｏｆ?ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ?ＰＨＲｌ??

Ｆｉｇ．９?Ｔｈｅ?Ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ａｌｉｇｎｍｅｎｔ?ｏｆ?ＭＹ艮－ＣＣ?ｄｏｍａｉｎ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｐｅｃｉｅｓ??根據(jù)測序結(jié)果，在ＮＣＢＩ?Ｂｌａｓｔ比對發(fā)現(xiàn)：草萄中的Ｐ／／Ｊ？／基因位于２號染色體，有；－??９個外顯子，８個內(nèi)含子，如....

圖１３定量引物篩選??Ｆｉｇ．ｌ３?Ａ１?化?ｍａｔｉｖｅ?０?則民Ｔ－ＰＣ?民?Ｐｒｉｍｅｒｓ??

?ｐ＿＿圖１２幾紳植物的戶餅？／蛋白質(zhì)進(jìn)化樹分析??Ｆｉｇ．?１２?Ｐｒｏｔｄ打?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?杠ｅｅ?ｆｂｒ?ｓｏｍｅ?ｐｌａｎ化??毒／基因表達(dá)分析??定量引物篩選??據(jù)測序回來的序列，參照定量引物設(shè)計原則，設(shè)計兩對定量引物（見附錄表１），??名為引物１／引物２，....

本文編號：3986534