發(fā)布時(shí)間：2024-05-20 05:44

　　由辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonian)引起的植物疫病是毀滅性的植物病害,嚴(yán)重影響著全世界蔬菜等農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。辣椒疫霉群體遺傳結(jié)構(gòu)和對(duì)殺菌劑的敏感性變化直接影響著病害的發(fā)生與流行。為有效防治植物疫病,本論文對(duì)來自全國6大地區(qū)(華東、華北、西南、西北、東北和華南)以及美國(1個(gè))的55個(gè)辣椒疫霉菌株進(jìn)行了遺傳多樣性和對(duì)殺菌劑當(dāng)家品種的抗性分析,獲得如下的研究結(jié)果：1、利用直接配對(duì)法測定了55個(gè)辣椒疫霉菌株的交配型。結(jié)果顯示,我國不同地區(qū)菌株交配型為A1或A2,這兩種交配型在我國各地區(qū)都有分布。除華南地區(qū)只有A2交配型以外,其他地區(qū)A1和A2交配型的比例接近1：1。2、利用7對(duì)SSR引物(Pcap1、Pcap3、Pcap、Pcap5、Pcap6、Pcap7和 Pcap8)分析了辣椒疫霉群體的遺傳多樣性。①首先建立了SSR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測過程中一種基于熒光測序技術(shù)的高通量低成本分析技術(shù)TP-M13-SSR。②基于該技術(shù),利用這7對(duì)SSR引物檢測出21個(gè)等位基因,平均每個(gè)位點(diǎn)檢測出3個(gè)等位基因,每個(gè)位點(diǎn)至少可以檢測出2個(gè)等位基因。χ2卡方檢驗(yàn)表明在7個(gè)SSR位點(diǎn)...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＴＰ－ＩＶｎ３－ＳＳＲ技術(shù)的原理??Ａ，５’端帶有尾己序列的上游引物，即ＴＰ－Ｍ１３引物；Ｂ，下游引物；Ｃ，帶有巧光標(biāo)記的馬己引物

最終實(shí)現(xiàn)了?ＳＳ民技術(shù)與巧光自動(dòng)檢測技術(shù)的完美結(jié)合，形成了一套低成本的基于巧??光測序技術(shù)的ＴＰ－Ｍ１３－ＳＳＲ檢測體系。與常規(guī)ＰＣＲ體系不同，ＴＰ－Ｍ１３－ＳＳ民在ＰＣ民擴(kuò)增??中需要３條引物，其原理見圖１。ＰＣ艮反應(yīng)時(shí)，引物Ａ和Ｂ首先與ＤＮＡ模板結(jié)合進(jìn)行特??異性擴(kuò)增，獲得含....

圖４本研究中辣椒疫霉苗襪交酷型分布情況??

圖３代表性茜株ＳＤｌ的ＩＴＳ和ＹＰＴ基因序列及化對(duì)結(jié)果??３交配型??交配型的測定結(jié)果（表１，圖４）表明，被測的５４個(gè)辣椒疫霉菌中，３０株為Ａ１交配型，??發(fā)生頻率為５４．５５％；?２５株為Ａ２交配型，發(fā)生頻率為４５．４５％。除華南地區(qū)只有一個(gè)茵株??用于分析外（Ａ２交配型），其....

圖５代表性苗株基因絕ＤＮＡ電泳結(jié)果

４．１提取的基因組ＤＮＡ??利用卵茜快速提�。模危恋姆椒ǎǎ保埃叮┇@得了所有供試菌株的基因組ＤＮＡ，通過瓊脂糖??凝膠電泳檢測ＤＮＡ的質(zhì)量和濃度。結(jié)果表明（圖５），獲得的所有菌株的ＤＮＡ電泳條帶清??晰，只有１條帶，條帶亮度都在１５０?ｎｇＷ上，說明提取的ＤＮＡ質(zhì)好量足，可Ｗ用于....

圖６凝膠電泳和ＴＰ－Ｍ１３－ＳＳＲ檢測ＳＳＲ位點(diǎn)《態(tài)性的比較??Ａ，Ｐｃａｐ３引物對(duì)菌揉ＰＣ７００９０２擴(kuò)增后的結(jié)果檢測；Ｂ，Ｐｃａｐ４引物對(duì)幽株ＬＮ１擴(kuò)增后的結(jié)果檢測

利用７對(duì)ＳＳＲ引物對(duì)５Ｓ個(gè)辣椒疫霉菌株進(jìn)行擴(kuò)增，可獲得不同材料在不同位點(diǎn)的基??因片段大小。本研究利用巧光標(biāo)巧ＰＣＲ盧物和測序儀讀取片段太小，建立了替代瓊脂鱗凝??膠電泳的ＴＰ－Ｍ１３－ＳＳＲ方法。通過比較傳統(tǒng)的ＤＮＡ電泳與ＴＰ－Ｍ１３－ＳＳ民的結(jié)果（圖６），??我們發(fā)現(xiàn)利巧ＴＰ....

本文編號(hào)：3979038