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菊花生物鐘節(jié)律基因CmPRR的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時間:2024-03-20 04:48
  菊花(Chrysasnthemum morifolium)是我國的傳統(tǒng)名花。本研究以短日照敏感型菊花品種’紫嬌’為試材,利用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)研究生物鐘節(jié)律基因CmPRR的表達(dá)特性。同時將短日照敏感型菊花品種’紫嬌’和短日照不敏感型菊花品種’奧運(yùn)白雪’作為花芽分化研究對象,比較兩個不同的短日照敏感型菊花品種在花芽分分化進(jìn)程、開花過程及基因表達(dá)等方面的差別,試驗(yàn)結(jié)果如下:1、通過克隆得到’奧運(yùn)白雪’中CmPRR2基因開放閱讀框?yàn)?605 bp,編碼535個氨基酸。CmPRR73基因開放閱讀框?yàn)?941 bp,編碼646個氨基酸。2、時空表達(dá)特性結(jié)果:在’紫嬌’不同發(fā)育階段中CmPRR基因表達(dá)先后順序依次是CmPRR2、CmPRR73、CmPRR37、CmPRR7。3、組織特異性結(jié)果:’紫嬌’中CmPRR基因在花和莖中表達(dá)量較高。4、不同光周期表達(dá)規(guī)律:一天中基因表達(dá)順序是CmPRR2/CmPRR73→CmPRR7 →CmPRR37。5、連續(xù)光照下表達(dá)規(guī)律:’紫嬌’由長日照條件轉(zhuǎn)入連續(xù)光照條件后,CmPRR2和CmPRR7維持原來的晝夜節(jié)律振蕩規(guī)律!蠇伞啥倘照諚l件轉(zhuǎn)入連續(xù)光照條件...

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1生物鐘中央震蕩系統(tǒng)結(jié)構(gòu)示意圖??Fig.?1?Model?of?the?central?osciallator?in?plant?circadian?clock?(Harmer,?2009)??

圖1生物鐘中央震蕩系統(tǒng)結(jié)構(gòu)示意圖??Fig.?1?Model?of?the?central?osciallator?in?plant?circadian?clock?(Harmer,?2009)??

形成第三個反饋環(huán)(ImaizumietaL,?2010)。經(jīng)研宄進(jìn)一步證實(shí)心振蕩器的主要成分,至少是與其緊密有關(guān)的組分(Makinoetal.,?基因組成負(fù)向反饋環(huán),在破壞晝夜節(jié)律上起關(guān)鍵作用(Yano己清楚知道,CC4?/和蛋白表達(dá)量在清晨出現(xiàn)高峰,隨著白y蛋白呈上升趨勢。積累....


圖2?‘奧運(yùn)白雪’總RNA電泳檢測圖??Fig.2?RNA?electrophoresis?of?‘aoyunbaixue’??

圖2?‘奧運(yùn)白雪’總RNA電泳檢測圖??Fig.2?RNA?electrophoresis?of?‘aoyunbaixue’??

圖2?‘奧運(yùn)白雪’總RNA電泳檢測圖??Fig.2?RNA?electrophoresis?of?‘aoyunbaixue’??長獲得??P/^2、CwP/?/?7、CwP/^P、OnP/?/?7。將‘奧運(yùn)白雪’葉片總RNA進(jìn)行反:?5,-TGGCATTGTGTTGGATTCTG....


圖4?和基因全長菌液PCR擴(kuò)增圖??-

圖4?和基因全長菌液PCR擴(kuò)增圖??-

與pEASY-Tl載體連接,??轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a,并進(jìn)行菌液PCR鑒定,結(jié)果如圖4所示。可看出,與目的片段一??致,說明目的片段己成功連接到載體上,將連接正確的菌液送公司進(jìn)行測序工作。將測??序結(jié)果進(jìn)行BLAST同源性分析,證實(shí)其為P7?/?家族基因。在‘紫嬌’中對四個??基....


圖3?和CwP/^73基因全長擴(kuò)增圖??1?:?DL2000Marker;?2:?Cm尸兄以基因全長;3:?C/W尸穴穴73基因全長

圖3?和CwP/^73基因全長擴(kuò)增圖??1?:?DL2000Marker;?2:?Cm尸兄以基因全長;3:?C/W尸穴穴73基因全長

證實(shí)其在‘紫嬌’表達(dá),可用于基因表達(dá)特性研宄。??12?13??■?1??圖3?和CwP/^73基因全長擴(kuò)增圖??1?:?D



本文編號:3932984

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