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楊樹口蘑培養(yǎng)條件的研究及其漆酶的初步分離純化

發(fā)布時(shí)間:2024-03-12 03:24
  漆酶能夠利用的底物很多,且其可以催化酚類和芳胺類物質(zhì)的氧化。自然界中分布著不同種類的漆酶,其中植物性漆酶分布較為廣泛,并且食用菌是植物性漆酶的生產(chǎn)者之一。目前,漆酶在污水的處理、飲料的澄清、環(huán)境的保護(hù)和造紙工業(yè)中起著重要的作用。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)室已有菌株的漆酶活性進(jìn)行篩選后發(fā)現(xiàn),野生菌株YK-1的漆酶活性較高。從形態(tài)上鑒定其子實(shí)體和菌絲體,同時(shí)進(jìn)行18sDNAITS序列分析,將該菌株鑒定為楊樹口蘑。通過(guò)菌絲體生長(zhǎng)條件優(yōu)化,確定了菌株YK-1生長(zhǎng)的最適營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為:葡萄糖、酵母膏,并且C/N的比例為20:1;菌株生長(zhǎng)的最適環(huán)境條件為28℃、pH7.0。經(jīng)優(yōu)化培養(yǎng),菌絲體的日均伸長(zhǎng)量為7.05mm/d。產(chǎn)酶特性試驗(yàn)結(jié)果表明,菌株YK-1的漆酶活性為(199.72±5.32)U/mL,凝集素的活性次之;蛋白酶的活性為(0.86±0.04)U/mL,α-半乳糖苷酶的活性為(0.04±0.01)U/mL,兩者均較低,并且該菌株中無(wú)RNase活性。粗酶液經(jīng)DEAE-Sepharose陰離子交換層析,純化得到蛋白組分D4;然后經(jīng)過(guò)CM-cellulose陽(yáng)離子交換層析純化得到蛋白組分CM4。最終,其純化倍數(shù)...

【文章頁(yè)數(shù)】:47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2.2野生菌株系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建??Fig.?2.2?Construction?of?phylogenetic?tree?of?wild?strain??

圖2.2野生菌株系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建??Fig.?2.2?Construction?of?phylogenetic?tree?of?wild?strain??

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圖3.5雙倒數(shù)法測(cè)定楊樹口蘑漆酶的米氏常數(shù)圖??-

圖3.5雙倒數(shù)法測(cè)定楊樹口蘑漆酶的米氏常數(shù)圖??-



本文編號(hào):3926463

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