柑橘黃龍病(Citrus Huanglongbing, CHLB)的發(fā)生是柑橘生產(chǎn)史上的嚴(yán)重災(zāi)害,被稱為柑橘植物的“癌癥”,對全球柑橘產(chǎn)業(yè)造成了巨大的破壞。柑橘黃龍病是因為柑橘木虱(Diaphorina citri)在患病柑橘和健康柑橘之間吸取汁液而傳播,柑橘木虱是柑橘、月桔、檸檬、黃皮、九里香、枸杞等蕓香科植物新梢期的重要害蟲。在柑橘黃龍病的發(fā)生中,柑橘木虱是目前明確的唯一自然蟲媒。柑橘黃龍病作為最具毀滅性的一種柑橘病害往往發(fā)現(xiàn)感染此病已經(jīng)達到毀園程度,目前此病全世界尚不能完全根治。尤其近年來全球日益變暖,柑橘木虱的活動范圍加大,正在對柑橘產(chǎn)業(yè)造成更大的破壞,柑橘受害面積已達80%以上,超過4000萬株植株由于感染病害被砍除。廣東肇慶地區(qū)是華南的柑橘產(chǎn)業(yè)基地,四會砂糖桔和德慶貢柑被列為國家級名水果。但是黃龍病也蔓延到該地區(qū),著名的砂糖橘正在遭受黃龍病的侵襲,許多地區(qū)造成減產(chǎn)甚至毀園現(xiàn)象,故加快防治技術(shù)的研究和革新刻不容緩。該病疑似起源于植物韌皮部組織細(xì)菌,由于該病原菌還不能純化培養(yǎng),因此給研究帶來了諸多困難。鑒定細(xì)菌16SrDNA是原核生物分類中最常用和有效的方法,16SrDNA序列...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖1PCR產(chǎn)物0.8%的瓊脂糖凝膠電泳圖

2012年第3期劉登全等：江西省大余縣柑橘黃龍病菌PCR檢測·263·樣品典型，即便如此，我們還是不能輕易排除它們是否真的不含柑橘黃龍病菌，需要采用更為靈敏的檢測方法如巢氏PCR等對其進行進一步確診。致謝：江西省植保植檢局黃凌洪、宋建輝，大余縣蔡德珍、王旭明等同志參加部分工作，特....

圖３－１．方法一提取總ＤＮＡ電泳結(jié)果（１，２，３感病巧橘）??Ｆｉｇ３－１．?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?化?ｒｏｕｇｈ?ｍｅ１：ｈｏｄ?ｏｎｅ?（１，２，３?ｖｉｒｕｓ?ｏｒａｎｇｅ）??

３．?１．?１．２提�。模危恋臋z測??根據(jù)ＤＮＡＯＤ２６０／ＯＤ２８０在１．８和２．０之間，說明糖類、蛋白質(zhì)、ＲＮＡ等已經(jīng)??被除去。且由圖３－１可知，經(jīng)過重復(fù)提取均能跑出清晰條帶，且除ＤＮＡ清晰條??帶外，沒有其他雜質(zhì)亮點，說明除了?ＤＮＡ，沒有雜質(zhì)或者雜質(zhì)很少，所提ＤＮＡ??....

圖３－２方法二提取總ＤＮＡ電泳結(jié)果（１，２，３感病巧橘）??－

Ｆｉｇ３－２．?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?Ｕ）ｔａｌ?ＤＮＡ?ｔｈｒｏｕ呂ｈ?ｍｅ化ｏｄ?ｔｗｏ?（１，２，３?ｖｉｒｕｓ?ｏｒａｎｇｅ）??根據(jù)ＤＮＡＯＤｍｏ／Ｏ化８０小于１．８說明ＤＮＡ不純，含有大量糖類和蛋白質(zhì)雜??質(zhì)。由圖３－３可Ｗ看出ＤＮＡ條帶很亮，....

圖３－３．方法Ｈ提取總ＤＮＡ電泳結(jié)果〇，２感病相橘）??Ｆｉｇ３－３．?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ｔｈｒｏｕｇｈ?ｍｅｔｈｏｄ?化ｒ說（１，２?ｖｉｒｕｓ?ｏｒａｎｇｅ）??

■Ｐ??纏??圖３－２方法二提取總ＤＮＡ電泳結(jié)果（１，２，３感病巧橘）??Ｆｉｇ３－２．?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?Ｕ）ｔａｌ?ＤＮＡ?ｔｈｒｏｕ呂ｈ?ｍｅ化ｏｄ?ｔｗｏ?（１，２，３?ｖｉｒｕｓ?ｏｒａｎｇｅ）??根據(jù)ＤＮＡＯＤｍｏ／Ｏ化８０小于１．８說明Ｄ....

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