發(fā)布時(shí)間：2024-02-24 02:10

　　番茄紅素是一種類胡蘿卜素,其在減緩衰老、抵抗氧化等方面起著重要的作用。番木瓜果肉中番茄紅素含量和比例決定了果肉的外觀品質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,最終會(huì)影響其經(jīng)濟(jì)效益。因此,研究番木瓜番茄紅素的代謝具有重要的理論和實(shí)踐意義。番茄紅素環(huán)化酶是類胡蘿卜素合成通路的關(guān)鍵酶。在番木瓜中,番茄紅素環(huán)化酶其中的兩種同工異構(gòu)酶分別為CpCYC-B和CpLCY-B。據(jù)研究表明,CpCYC-B和CpLCY-B都是組織特異性表達(dá)基因,其中CpCYC-B是有色體特異性表達(dá)基因,主要在果肉中表達(dá),因此它能影響果肉中類胡蘿卜素的含量和組分比例并造成果肉的顏色差異;而CpLCY-B主要在番木瓜的葉片和果皮中高表達(dá)。本研究以CpCYC-B和CpLCY-B為研究對(duì)象,克隆和鑒定啟動(dòng)子序列、分析關(guān)鍵順式元件,并對(duì)不同區(qū)段啟動(dòng)子活性進(jìn)行分析。通過(guò)對(duì)不同發(fā)育階段的番木瓜果肉進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,篩選與CpCYC-B和CpLCY-B啟動(dòng)子互作的轉(zhuǎn)錄因子,并通過(guò)酵母單雜交、酵母雙雜交和雙熒光素酶系統(tǒng)驗(yàn)證候選轉(zhuǎn)錄因子對(duì)番茄紅素環(huán)化酶基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能。主要研究結(jié)果如下:1.CpCYC-B和CpLCY-B啟動(dòng)子的克隆和活性分析。從番木瓜中克隆了CpC...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1木瓜果實(shí)中的類胡蘿卜素生物合成途徑采用RachelL（2006）和Nisar等人（2015）

4木瓜果實(shí)中的類胡蘿卜素生物合成途徑采用RachelL（2006）和Nisar等人（2015八氫番茄紅素合成酶；PDS，八氫番茄紅素去飽和酶；CRTISO，胡蘿卜素異構(gòu)，葉綠體特異性番茄紅素β-環(huán)化酶；LCY-E，番茄紅素ε-環(huán)化酶；CYC-B，有異性番茄紅素β-環(huán)化酶....

圖2-1啟動(dòng)子缺失載體構(gòu)建示意圖

番木瓜番茄紅素環(huán)化酶基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析段同源重組到PGWB633載體中。啟動(dòng)子表達(dá)載體示意圖見(jiàn)圖2-1。CpCYC-B和CpLCY-B啟動(dòng)子內(nèi)部缺失載體構(gòu)建：采用全基因合成的方法，合成已經(jīng)將目的元件缺失的雙鏈啟動(dòng)子DNA，并同樣用gateway方法連接到PGWB....

圖2-2CpCYC-B啟動(dòng)子順式元件分布圖

圖2-2CpCYC-B啟動(dòng)子順式元件分布圖Figure2-2ThoseelementsweredistributedinCpCYC-B-1.5kbpromoter2.2CpCYC-B和CpLCY-B啟動(dòng)子活性分析當(dāng)含不同啟動(dòng)子載體的轉(zhuǎn)基因擬南芥植株生....

圖2-3轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代植株系的CpCYC-B和CpLCY-B啟動(dòng)子1.5kb-0.5kb的表達(dá)分析

圖2-3轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代植株系的CpCYC-B和CpLCY-B啟動(dòng)子1.5kb-0.5kb的表達(dá)分析（A）CpCYC-B的不同片段啟動(dòng)子驅(qū)使的的GUSRT-qPCR表達(dá)水平。（B）CpLCY-B的不同片段啟動(dòng)子驅(qū)使的GUSRT-qPCR表達(dá)水....

本文編號(hào)：3908351