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山楂(Crataegus spp.)遺傳圖譜構(gòu)建及葉片黃酮性狀定位研究

發(fā)布時(shí)間:2023-11-10 18:18
  本研究以‘大綿球’為母本,‘秋金星’為父本創(chuàng)建雜交群體,選用92株雜交F1代為作圖群體,采用SRAP和SSR兩種分子標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合構(gòu)建山楂分子遺傳圖譜;應(yīng)用超聲波輔助提取技術(shù)提取山楂葉片黃酮物質(zhì),采用高效液相色譜(HPLC)對(duì)黃酮類物質(zhì)進(jìn)行定量分析,并對(duì)山楂葉片中5種黃酮單體成分進(jìn)行了QTL定位研究。主要研究結(jié)果如下:1.從240對(duì)SRAP引物組合中選擇了47對(duì)譜帶清晰、多態(tài)性豐富的引物組合用于作圖群體的分子標(biāo)記分析;對(duì)322對(duì)山楂EST-SSR及同源基因組SSR引物進(jìn)行退火溫度和多態(tài)性篩選,獲得了84對(duì)多態(tài)性SSR引物。2.應(yīng)用具有父本特異帶的SSR引物‘8UB13155-188’對(duì)‘大綿球’ב秋金星’雜交后代的實(shí)生苗木進(jìn)行了真假雜種鑒定,確定了后代均為真雜種單株。3.將47對(duì)SRAP引物和84對(duì)多態(tài)性SSR引物用于后代群體的擴(kuò)增。共獲得母本特有標(biāo)記71個(gè),父本特有標(biāo)記103個(gè),雙親共有標(biāo)記225個(gè)。應(yīng)用JoinMap3.0軟件和Mapchart2.2軟件分別繪制出雙親的遺傳圖譜,母本‘大綿球’的遺傳圖譜包括21個(gè)連鎖群,有153個(gè)標(biāo)記位點(diǎn),覆蓋總圖距1085.4 cM,位點(diǎn)之間平...

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 山楂中的黃酮類物質(zhì)成分、作用、提取及檢測(cè)方法
        1.1.1 山楂黃酮類物質(zhì)的成分
        1.1.2 黃酮類物質(zhì)的作用
        1.1.3 黃酮類物質(zhì)的提取方法
        1.1.4 黃酮類物質(zhì)的測(cè)定方法
    1.2 果樹分子遺傳圖譜構(gòu)建
        1.2.1 果樹遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
        1.2.2 果樹遺傳圖譜研究進(jìn)展
        1.2.3 問題與展望
    1.3 QTL定位研究
        1.3.1 QTL作圖原理和方法
        1.3.2 果樹QTL定位研究進(jìn)展
    1.4 本研究的目的與意義
第二章 山楂遺傳圖譜構(gòu)建
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 山楂葉片DNA的提取和質(zhì)量檢測(cè)
        2.2.2 SRAP標(biāo)記
        2.2.3 SSR標(biāo)記
        2.2.4 山楂遺傳圖譜構(gòu)建
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 基因組DNA濃度及質(zhì)量檢測(cè)
        2.3.2 真假雜種鑒定
        2.3.3 SRAP標(biāo)記
        2.3.4 SSR標(biāo)記
        2.3.5 山楂遺傳圖譜構(gòu)建
    2.4 討論
        2.4.1 分子標(biāo)記與遺傳圖譜
        2.4.2 山楂遺傳圖譜的質(zhì)量
        2.4.3 分子遺傳圖譜連鎖群與染色體關(guān)系
第三章 山楂葉片黃酮含量測(cè)定及QTL定位
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 試劑
        3.1.3 儀器
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 山楂葉片的預(yù)處理
        3.2.2 山楂葉片黃酮的提取
        3.2.3 對(duì)照品的制備
        3.2.4 色譜條件的確定
        3.2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        3.2.6 黃酮含量的測(cè)定
        3.2.7 黃酮含量的QTL定位
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        3.3.2 山楂葉中黃酮種類的鑒定及含量的測(cè)定
        3.3.3 山楂葉中5種黃酮單體含量初步QTL定位
    3.4 討論
        3.4.1 關(guān)于QTL在連鎖群上的分布
        3.4.2 關(guān)于QTL的準(zhǔn)確性
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3862076

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