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基于轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的四照花SSR分子標(biāo)記開(kāi)發(fā)及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2023-07-26 19:13
  四照花屬(Cornus)植物隸屬于山茱萸科(Cornacease),多數(shù)種類為觀賞價(jià)值極高的園林綠化樹(shù)種,大花四照花、日本四照花和太平洋四照花等都因其奇特的苞片特征受到廣泛關(guān)注,大花四照花更是因極高的觀賞價(jià)值作為美國(guó)密蘇里州、北卡萊羅納州、華盛頓州等地的州花,極具開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上四照花種質(zhì)資源遺傳背景不清,品種名稱混亂,給鑒別造成一定困難,不利于種質(zhì)資源推廣、開(kāi)發(fā)和利用。本研究以19份不同種及品種的四照花為試驗(yàn)材料,利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序?qū)λ恼栈ǖ腟SR分子標(biāo)記進(jìn)行開(kāi)發(fā),優(yōu)化了 SSR-PCR反應(yīng)體系,同時(shí)探討了四照花不同種及品種之間的親緣關(guān)系,并構(gòu)建了品種的指紋圖譜,為更好的利用四照花種質(zhì)資源提供了依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:(1)利用Illumina平臺(tái)的RNA-seq技術(shù)對(duì)大花四照花進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,得到了豐富的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),利用生物信息學(xué)軟件對(duì)獲得的Unigene進(jìn)行SSR位點(diǎn)的挖掘,共獲得30 401個(gè)SSR位點(diǎn),SSR的分布頻率為22.90%,平均分布距離為2.88 kb。SSR位點(diǎn)的重復(fù)類型以單核苷酸重復(fù)和二核苷酸重復(fù)為主,各占所有位點(diǎn)的45.73%和37.98%。綜合來(lái)看...

【文章頁(yè)數(shù)】:58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1. 引言
    1.1. 研究背景
    1.2. 四照花種質(zhì)資源研究進(jìn)展
        1.2.1. 四照花種質(zhì)資源的分類及分布
        1.2.2. 四照花屬植物研究概況
        1.2.3. 四照花種質(zhì)資源的開(kāi)發(fā)與利用
    1.3. SSR分子標(biāo)記研究進(jìn)展
        1.3.1. SSR分子標(biāo)記的定義及特點(diǎn)
        1.3.2. SSR分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)
        1.3.3. SSR分子標(biāo)記在植物中的應(yīng)用
    1.4. 指紋圖譜的發(fā)展及應(yīng)用
        1.4.1. 指紋圖譜的發(fā)展
        1.4.2. 指紋圖譜的現(xiàn)狀及應(yīng)用
    1.5. 研究目的和意義
2. 材料與方法
    2.1. 試驗(yàn)材料
    2.2. 試驗(yàn)方法
        2.2.1. 基因組DNA的提取
        2.2.2. 四照花SSR分子標(biāo)記開(kāi)發(fā)
        2.2.3. SSR-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化及引物篩選
        2.2.4. 數(shù)據(jù)處理和分析
    2.3. 技術(shù)路線
3. 結(jié)果與分析
    3.1. 四照花基因組DNA提取結(jié)果
    3.2. 轉(zhuǎn)錄組SSR位點(diǎn)分布特征分析及引物設(shè)計(jì)
        3.2.1. 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與組裝
        3.2.2. 轉(zhuǎn)錄組SSR重復(fù)類型及基序類型
        3.2.3. 轉(zhuǎn)錄組SSR重復(fù)次數(shù)及長(zhǎng)度分布
    3.3. SSR分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)
        3.3.1. SSR-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化
        3.3.2. SSR引物篩選
        3.3.3. SSR位點(diǎn)遺傳參數(shù)分析
    3.4. 四照花種質(zhì)資源鑒定
        3.4.1. 四照花種質(zhì)資源間聚類分析
        3.4.2. 四照花指紋圖譜構(gòu)建
4. 討論
    4.1. 利用轉(zhuǎn)錄組開(kāi)發(fā)SSR分子標(biāo)記
    4.2. 利用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化PCR反應(yīng)體系
    4.3. 利用SSR引物分析親緣關(guān)系的可行性
    4.4. DNA指紋圖譜的構(gòu)建
    4.5. 四照花種質(zhì)資源的開(kāi)發(fā)利用前景
5. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
第一導(dǎo)師簡(jiǎn)介
第二導(dǎo)師簡(jiǎn)介
第三導(dǎo)師簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào):3837395

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