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低夜溫下黃瓜雌性分化相關(guān)代謝與蛋白質(zhì)變化的初步分析

發(fā)布時(shí)間:2023-06-01 02:19
  黃瓜(Cucumis sativus L.)是葫蘆科一年生草本植物,也是性別表達(dá)研究的模式植物。由于其性別表現(xiàn)直接與產(chǎn)量和品質(zhì)有關(guān),所以研究黃瓜的性別分化不論在理論上還是實(shí)際應(yīng)用上都具有重要意義。黃瓜的性別表達(dá)除受遺傳因素的控制外,也受環(huán)境因素和激素的影響。課題組先期研究結(jié)果表明,黃瓜‘C09-123’為溫敏型雌性材料,其性別分化受夜間溫度影響較為明顯,12oC的低溫條件有利于‘C09-123’雌花形成。為探究低夜溫影響雌雄同株異花黃瓜雌性分化的原因。本研究繼續(xù)選用‘C09-123’為試材,設(shè)置3個(gè)不同夜間處理溫度26/18oC,26/12oC,26/24oC,對(duì)其代謝和蛋白差異進(jìn)行分析,以期初步探明低夜溫誘導(dǎo)黃瓜雌性分化的作用機(jī)制,為黃瓜分子育種奠定基礎(chǔ)。結(jié)果表明:(1)黃瓜溫敏型‘C09-123’在低夜溫12oC處理中雌花分化率顯著提高,黃瓜第一雌花節(jié)位也顯著降低(P<0.05),而高夜溫24oC處理下在20節(jié)內(nèi)無雌花分化。(2)通過對(duì)不同溫度處理二葉一心莖尖內(nèi)源激素和內(nèi)源糖的測(cè)定分析結(jié)果表明:內(nèi)源乙烯、葡萄糖和蔗糖含量均表現(xiàn)出隨處理夜溫的升高而降低的趨勢(shì)。相關(guān)性分析進(jìn)一步表...

【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 研究的目的與意義
    1.2 國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展
        1.2.1 黃瓜性別決定的遺傳基礎(chǔ)
        1.2.2 黃瓜性別分化的生理生化基礎(chǔ)及環(huán)境的影響
        1.2.3 黃瓜性別決定的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
        1.2.4 蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展
    1.3 存在的問題與展望
    1.4 研究?jī)?nèi)容
        1.4.1 主要研究?jī)?nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 黃瓜培育及溫度處理?xiàng)l件
    2.3 黃瓜樣品制備
    2.4 代謝相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定
        2.4.1 糖類物質(zhì)的測(cè)定
        2.4.2 植物激素和氨基酸的測(cè)定
        2.4.3 相關(guān)酶的測(cè)定
    2.5 蛋白質(zhì)組差異分析
        2.5.1 蛋白質(zhì)樣品的提取
        2.5.2 蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定
        2.5.3 2-DE雙向凝膠電泳
        2.5.4 凝膠染色
        2.5.5 凝膠掃描與圖像分析
        2.5.6 質(zhì)譜分析
    2.6 蛋白差異點(diǎn)轉(zhuǎn)錄水平驗(yàn)證
        2.6.1 RNA的提取
        2.6.2 cDNA第一鏈的合成
        2.6.3 熒光定量PCR
    2.7 數(shù)據(jù)分析軟件
3 結(jié)果與分析
    3.1 不同夜溫下黃瓜‘C09-123’性別分化相關(guān)代謝指標(biāo)分析
        3.1.1 不同夜溫對(duì)黃瓜雌性分化的影響
        3.1.2 不同夜溫處理下黃瓜莖尖中內(nèi)源激素和內(nèi)源糖含量的變化
        3.1.3 不同夜溫黃瓜內(nèi)源激素、內(nèi)源糖與雌花分化的相關(guān)性
        3.1.4 不同夜溫處理下黃瓜莖尖中氨基酸含量的變化
        3.1.5 不同夜溫處理下黃瓜莖尖糖酵解關(guān)鍵酶的變化
    3.2 蛋白質(zhì)組差異分析
        3.2.1 蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.2.2 不同夜溫黃瓜差異蛋白雙向電泳分析
        3.2.3 質(zhì)譜結(jié)果分析
        3.2.4 轉(zhuǎn)錄水平分析驗(yàn)證
4 討論
    4.1 不同夜溫對(duì)黃瓜雌性分化的影響
    4.2 不同夜溫下生理代謝指標(biāo)的變化與黃瓜雌性分化的關(guān)系
        4.2.1 植物激素
        4.2.2 內(nèi)源糖
        4.2.3 氨基酸
    4.3 不同夜溫下差異蛋白質(zhì)與黃瓜雌性分化的關(guān)系
        4.3.1 甘油醛3磷酸脫氫酶
        4.3.2 天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶
        4.3.3 光合體系I亞組VII酶
        4.3.4 未知蛋白
        4.3.5 其他差異蛋白質(zhì)
    4.4 生理代謝與蛋白質(zhì)組結(jié)合的分析
    4.5 研究的創(chuàng)新點(diǎn)及不足
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào):3826457

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