節(jié)間長(zhǎng)度作為番茄株型的重要因子,在番茄育種實(shí)踐中越來(lái)越受到重視。但是,已克隆的調(diào)控番茄節(jié)間長(zhǎng)度的基因卻較少。本研究以番茄自交系05T606自然發(fā)生的長(zhǎng)節(jié)間突變體P502為材料進(jìn)行了表型分析;對(duì)長(zhǎng)節(jié)間性狀進(jìn)行了遺傳分析,并通過(guò)P502與普通節(jié)間材料Heinz 1706雜交構(gòu)建的F₂分離群體對(duì)長(zhǎng)節(jié)間基因進(jìn)行了精細(xì)定位;利用過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因技術(shù)對(duì)候選基因進(jìn)行了功能驗(yàn)證,并對(duì)長(zhǎng)節(jié)間基因進(jìn)行了初步的功能分析。本研究為揭示番茄節(jié)間伸長(zhǎng)的調(diào)控機(jī)制奠定了一定的基礎(chǔ),也為番茄的株型遺傳改良及生產(chǎn)調(diào)控提供了理論參考。全文主要結(jié)果如下:1.通過(guò)表型分析,番茄長(zhǎng)節(jié)間突變體P502與野生型05T606相比,整個(gè)苗期節(jié)間都伸長(zhǎng),且每一節(jié)間都顯著伸長(zhǎng)。細(xì)胞學(xué)觀察表明,P502節(jié)間細(xì)胞較野生型05T606顯著伸長(zhǎng)。結(jié)合內(nèi)源GA測(cè)定和外源GA噴施,突變體P502內(nèi)源GA含量增加,且能響應(yīng)外源GA₃和PAC,為GA敏感型突變體。2.利用普通節(jié)間自交系Heinz 1706和緊湊型自交系P1609分別與突變體P502雜交,構(gòu)建了兩個(gè)組合(組合Ⅰ:Heinz 1706/P502;組合Ⅱ:...

【文章頁(yè)數(shù)】：96 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 株高遺傳改良的意義
        1.1.1 株高的影響因子
        1.1.2 株高的遺傳組成
    1.2 植物激素對(duì)株高的調(diào)控機(jī)制
        1.2.1 赤霉素對(duì)株高的調(diào)控
        1.2.2 油菜素內(nèi)酯對(duì)株高的調(diào)控
        1.2.3 生長(zhǎng)素對(duì)株高的調(diào)控
        1.2.4 獨(dú)角金內(nèi)酯對(duì)株高的調(diào)控
        1.2.5 激素間的互作對(duì)株高的調(diào)控
    1.3 番茄株高基因研究進(jìn)展
    1.4 數(shù)量性狀的主基因+多基因遺傳模型研究進(jìn)展
    1.5 基因的定位與克隆
        1.5.1 分子標(biāo)記
        1.5.2 QTL克隆
        1.5.3 番茄中已克隆的QTL
    1.6 本研究的目的與意義
第二章 長(zhǎng)節(jié)間突變體P502表型及細(xì)胞學(xué)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 節(jié)間長(zhǎng)度測(cè)量
        2.1.3 掃描電鏡觀察
        2.1.4 外源GA)₃和PAC處理
        2.1.5 內(nèi)源GA含量測(cè)定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 節(jié)間長(zhǎng)度比較與細(xì)胞學(xué)分析
        2.2.2 對(duì)外源GA)₃和PAC的響應(yīng)
        2.2.3 內(nèi)源GA含量比較
    2.3 討論
第三章 長(zhǎng)節(jié)間突變體P502的遺傳分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料和群體構(gòu)建
        3.1.2 田間測(cè)量與數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 六世代群體的變異分析
        3.2.2 分離群體節(jié)間長(zhǎng)度的頻率分布分析
        3.2.3 節(jié)間長(zhǎng)度的遺傳分析
        3.2.4 遺傳參數(shù)的估計(jì)
    3.3 討論
第四章 長(zhǎng)節(jié)間基因EI的精細(xì)定位及候選基因預(yù)測(cè)
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 DNA提取
        4.1.3 P502深度重測(cè)序
        4.1.4 引物設(shè)計(jì)
        4.1.5 標(biāo)記分析
        4.1.6 EI(Elongated Internode)基因的定位
        4.1.7 候選基因預(yù)測(cè)
        4.1.8 候選基因的表達(dá)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 長(zhǎng)節(jié)間基因EI的初定位
        4.2.2 EI基因的精細(xì)定位
        4.2.3 候選基因的功能預(yù)測(cè)
    4.3 討論
第五章 EI基因轉(zhuǎn)基因驗(yàn)證及功能分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗(yàn)材料
        5.1.2 試劑、質(zhì)粒及菌株
        5.1.3 過(guò)表達(dá)載體的構(gòu)建
        5.1.4 亞細(xì)胞定位載體的構(gòu)建
        5.1.5 煙草表皮細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)及原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
        5.1.6 遺傳轉(zhuǎn)化
        5.1.7 過(guò)表達(dá)植株的DNA檢測(cè)
        5.1.8 T₁代植株SlGA2ox7的表達(dá)量分析
        5.1.9 T₁代對(duì)外源GA)₃的響應(yīng)
        5.1.10 基因的相對(duì)表達(dá)量分析
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 成功構(gòu)建過(guò)表達(dá)載體
        5.2.2 成功構(gòu)建亞細(xì)胞定位載體
        5.2.3 轉(zhuǎn)基因植株的獲得與驗(yàn)證
        5.2.4 過(guò)表達(dá)T₁代表型分析
        5.2.5 SlGA2ox7蛋白的亞細(xì)胞定位
        5.2.6 GA代謝通路中基因的表達(dá)量分析
    5.3 討論
第六章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3818804