節(jié)間長度作為番茄株型的重要因子,在番茄育種實踐中越來越受到重視。但是,已克隆的調(diào)控番茄節(jié)間長度的基因卻較少。本研究以番茄自交系05T606自然發(fā)生的長節(jié)間突變體P502為材料進(jìn)行了表型分析;對長節(jié)間性狀進(jìn)行了遺傳分析,并通過P502與普通節(jié)間材料Heinz 1706雜交構(gòu)建的F₂分離群體對長節(jié)間基因進(jìn)行了精細(xì)定位;利用過表達(dá)轉(zhuǎn)基因技術(shù)對候選基因進(jìn)行了功能驗證,并對長節(jié)間基因進(jìn)行了初步的功能分析。本研究為揭示番茄節(jié)間伸長的調(diào)控機制奠定了一定的基礎(chǔ),也為番茄的株型遺傳改良及生產(chǎn)調(diào)控提供了理論參考。全文主要結(jié)果如下:1.通過表型分析,番茄長節(jié)間突變體P502與野生型05T606相比,整個苗期節(jié)間都伸長,且每一節(jié)間都顯著伸長。細(xì)胞學(xué)觀察表明,P502節(jié)間細(xì)胞較野生型05T606顯著伸長。結(jié)合內(nèi)源GA測定和外源GA噴施,突變體P502內(nèi)源GA含量增加,且能響應(yīng)外源GA₃和PAC,為GA敏感型突變體。2.利用普通節(jié)間自交系Heinz 1706和緊湊型自交系P1609分別與突變體P502雜交,構(gòu)建了兩個組合(組合Ⅰ:Heinz 1706/P502;組合Ⅱ:...

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 株高遺傳改良的意義
        1.1.1 株高的影響因子
        1.1.2 株高的遺傳組成
    1.2 植物激素對株高的調(diào)控機制
        1.2.1 赤霉素對株高的調(diào)控
        1.2.2 油菜素內(nèi)酯對株高的調(diào)控
        1.2.3 生長素對株高的調(diào)控
        1.2.4 獨角金內(nèi)酯對株高的調(diào)控
        1.2.5 激素間的互作對株高的調(diào)控
    1.3 番茄株高基因研究進(jìn)展
    1.4 數(shù)量性狀的主基因+多基因遺傳模型研究進(jìn)展
    1.5 基因的定位與克隆
        1.5.1 分子標(biāo)記
        1.5.2 QTL克隆
        1.5.3 番茄中已克隆的QTL
    1.6 本研究的目的與意義
第二章 長節(jié)間突變體P502表型及細(xì)胞學(xué)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 節(jié)間長度測量
        2.1.3 掃描電鏡觀察
        2.1.4 外源GA)₃和PAC處理
        2.1.5 內(nèi)源GA含量測定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 節(jié)間長度比較與細(xì)胞學(xué)分析
        2.2.2 對外源GA)₃和PAC的響應(yīng)
        2.2.3 內(nèi)源GA含量比較
    2.3 討論
第三章 長節(jié)間突變體P502的遺傳分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料和群體構(gòu)建
        3.1.2 田間測量與數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 六世代群體的變異分析
        3.2.2 分離群體節(jié)間長度的頻率分布分析
        3.2.3 節(jié)間長度的遺傳分析
        3.2.4 遺傳參數(shù)的估計
    3.3 討論
第四章 長節(jié)間基因EI的精細(xì)定位及候選基因預(yù)測
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 DNA提取
        4.1.3 P502深度重測序
        4.1.4 引物設(shè)計
        4.1.5 標(biāo)記分析
        4.1.6 EI(Elongated Internode)基因的定位
        4.1.7 候選基因預(yù)測
        4.1.8 候選基因的表達(dá)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 長節(jié)間基因EI的初定位
        4.2.2 EI基因的精細(xì)定位
        4.2.3 候選基因的功能預(yù)測
    4.3 討論
第五章 EI基因轉(zhuǎn)基因驗證及功能分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗材料
        5.1.2 試劑、質(zhì)粒及菌株
        5.1.3 過表達(dá)載體的構(gòu)建
        5.1.4 亞細(xì)胞定位載體的構(gòu)建
        5.1.5 煙草表皮細(xì)胞瞬時表達(dá)及原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
        5.1.6 遺傳轉(zhuǎn)化
        5.1.7 過表達(dá)植株的DNA檢測
        5.1.8 T₁代植株SlGA2ox7的表達(dá)量分析
        5.1.9 T₁代對外源GA)₃的響應(yīng)
        5.1.10 基因的相對表達(dá)量分析
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 成功構(gòu)建過表達(dá)載體
        5.2.2 成功構(gòu)建亞細(xì)胞定位載體
        5.2.3 轉(zhuǎn)基因植株的獲得與驗證
        5.2.4 過表達(dá)T₁代表型分析
        5.2.5 SlGA2ox7蛋白的亞細(xì)胞定位
        5.2.6 GA代謝通路中基因的表達(dá)量分析
    5.3 討論
第六章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡歷



本文編號：3818804