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幾個(gè)藍(lán)莓品種離體葉片再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間:2023-04-20 05:44
  藍(lán)莓(Vaccinium spp.)是一種極具經(jīng)濟(jì)價(jià)值和保健價(jià)值的果實(shí),隨著市場(chǎng)多樣化需求的增加,通過(guò)生物技術(shù)育種,提升藍(lán)莓果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)迫在眉睫。利用生物技術(shù)進(jìn)行的根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化已經(jīng)在多種果樹(shù)中成功應(yīng)用,但在藍(lán)莓中仍然存在品種轉(zhuǎn)化效率低下、轉(zhuǎn)化困難等問(wèn)題。本研究以高叢藍(lán)莓品種‘北陸’(Northland)、‘圣藍(lán)’(Millennia)、‘喜來(lái)’(Sierra)、‘萊格西’(Legacy)、‘藍(lán)源’(Bluesouth)為材料,通過(guò)不同激素組合和濃度試驗(yàn),優(yōu)化藍(lán)莓葉片不定芽再生體系及建立藍(lán)莓葉片愈傷組織再生體系;通過(guò)分析根癌農(nóng)桿菌侵染濃度和時(shí)間、共培養(yǎng)天數(shù)、抑菌劑濃度等因子的影響效果,以期對(duì)藍(lán)莓遺傳轉(zhuǎn)化體系進(jìn)行優(yōu)化,為后續(xù)藍(lán)莓基因功能的研究和育種工作提供技術(shù)支撐。主要研究結(jié)果如下:(1)優(yōu)化了4個(gè)藍(lán)莓品種‘北陸’、‘圣藍(lán)’、‘喜來(lái)’、‘萊格西’葉片再生不定芽體系,篩選出4個(gè)品種誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基以WPM+4.0 mg/L ZT+30 g/L蔗糖+6.5 g/L瓊脂粉為佳。其中,‘北陸’葉片不定芽誘導(dǎo)率為60%,‘圣藍(lán)’葉片不定芽誘導(dǎo)率為81.67%,‘喜來(lái)’葉片不定芽誘導(dǎo)...

【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
1 引言
    1.1 研究背景
    1.2 木本植物組織培養(yǎng)研究進(jìn)展
    1.3 藍(lán)莓組織培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1.3.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類(lèi)及濃度
        1.3.2 外植體類(lèi)型
        1.3.3 基因型
    1.4 木本植物遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展
        1.4.1 影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)木本植物遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素
        1.4.2 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)藍(lán)莓遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展
    1.5 研究的目的與意義
    1.6 技術(shù)路線圖
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 主要試劑及常用培養(yǎng)基配制
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 藍(lán)莓葉片再生不定芽試驗(yàn)
        2.3.2 藍(lán)莓愈傷組織再生體系的建立
        2.3.3 藍(lán)莓遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化
3 結(jié)果分析
    3.1 葉片再生不定芽?jī)?yōu)化試驗(yàn)
        3.1.1 不同培養(yǎng)基配方對(duì)不同藍(lán)莓品種葉片再生不定芽的效果
    3.2 藍(lán)莓愈傷組織再生體系的建立
        3.2.1 不同造傷方式對(duì)葉片生成愈傷組織的效果
        3.2.2 不同光照處理對(duì)藍(lán)莓葉片生成愈傷組織的效果
        3.2.3 不同培養(yǎng)基配方對(duì)藍(lán)莓葉片愈傷組織誘導(dǎo)的效果
        3.2.4 不同繼代方式對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的作用
        3.2.5 不同培養(yǎng)基配方對(duì)藍(lán)莓葉片愈傷組織繼代的效果
    3.3 藍(lán)莓遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化
        3.3.1 各藍(lán)莓品種葉片卡那霉素選擇壓濃度篩選試驗(yàn)
        3.3.2 根癌農(nóng)桿菌侵染時(shí)間試驗(yàn)
        3.3.3 共培養(yǎng)時(shí)間篩選試驗(yàn)
        3.3.4 根癌農(nóng)桿菌侵染濃度試驗(yàn)
        3.3.5 不同濃度抑菌劑對(duì)農(nóng)桿菌的抑制試驗(yàn)
        3.3.6 藍(lán)莓Km抗性芽獲得
4 討論
    4.1 不同因素對(duì)藍(lán)莓葉片再生的影響
    4.2 不同因素對(duì)誘導(dǎo)藍(lán)莓葉片愈傷組織的影響
    4.3 不同因素對(duì)藍(lán)莓葉片遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
    4.4 對(duì)藍(lán)莓遺傳轉(zhuǎn)化體系的展望
5 結(jié)論
    5.1 藍(lán)莓葉片再生不定芽試驗(yàn)優(yōu)化結(jié)果
    5.2 藍(lán)莓愈傷組織再生試驗(yàn)結(jié)果
    5.3 藍(lán)莓遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化結(jié)果
附錄A 縮寫(xiě)表
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào):3795005

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