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茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的克隆及表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2023-04-08 22:06
  茄子(Solanum melongena L.)原產(chǎn)于印度,在4-5世紀(jì)傳入東亞。在世界上我國是茄子栽種面積最大的國家,超過了全世界茄子種植面積的50%。單性結(jié)實(shí)茄子在反季栽培中可以降低授粉受精不良導(dǎo)致的落花落果現(xiàn)象,顯著提高茄子的產(chǎn)量。目前關(guān)于茄子單性結(jié)實(shí)生理特性的研究較多,而對(duì)茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因,特別是茄子中生長素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑相關(guān)基因的研究較少。本研究對(duì)茄子生長素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑中與單性結(jié)實(shí)相關(guān)的基因進(jìn)行探索研究,這對(duì)于指導(dǎo)單性結(jié)實(shí)品種選育及優(yōu)質(zhì)無籽或少籽茄子品種的研究工作,具有重要意義。通過對(duì)單性結(jié)實(shí)品系D-7-1、D-6和非單性結(jié)實(shí)品系142的花與果實(shí)的農(nóng)藝性狀測(cè)定,對(duì)與茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)的基因ARF6、ARF7、ARF8、GH3.6、IAA9進(jìn)行同源克隆,并利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)對(duì)不同結(jié)實(shí)性茄子的花蕾及果實(shí)發(fā)育不同時(shí)期進(jìn)行表達(dá)差異分析,以探索這幾個(gè)基因?qū)η炎訂涡越Y(jié)實(shí)的影響,主要研究結(jié)果如下:1花期與果期農(nóng)藝性狀測(cè)定:測(cè)定結(jié)果表明,非單性結(jié)實(shí)品系142屬于長花柱類型,單性結(jié)實(shí)品系D-7-1、D-6屬于中花柱、短花柱類型。果實(shí)(子房)在花前10天都處在緩慢增長期,尤其是花前7天,單果...

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物的單性結(jié)實(shí)
        1.1.1 定義及類型
        1.1.2 影響單性結(jié)實(shí)的因素
    1.2 生長素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究
        1.2.1 生長素在單性結(jié)實(shí)上的生理機(jī)制研究
        1.2.2 生長素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中相關(guān)的基因家族
    1.3 茄子花及果實(shí)的發(fā)育過程
    1.4 研究的背景及意義
        1.4.1 茄子單性結(jié)實(shí)研究概況
        1.4.2 研究的背景
        1.4.3 研究的意義
    1.5 研究的技術(shù)路線
第2章 引言
第3章 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 載體與菌種
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器
    3.2 方法
        3.2.1 取材及田間數(shù)據(jù)采集
        3.2.2 總RNA提取
        3.2.3 RNA的純度和濃度檢測(cè)
        3.2.4 第一鏈cDNA合成
        3.2.5 單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的克隆
        3.2.6 目的基因片段的回收
        3.2.7 目的片段的克隆
        3.2.8 單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的序列分析
    3.3 Real-Time PCR分析
        3.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與擴(kuò)增效率
        3.3.2 RT-PCR反應(yīng)體系和程序
第4章 結(jié)果與分析
    4.1 茄子花期及果期農(nóng)藝性狀
        4.1.1 花藥及花柱長度
        4.1.2 子房(果實(shí))特性分析
    4.2 茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的克隆與分析
        4.2.1 茄子幼苗總RNA的提取
        4.2.2 茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的克隆與序列分析
            4.2.2.1 茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的克隆
            4.2.2.3 茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因編碼蛋白的生物信息學(xué)分析
    4.3 茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的表達(dá)分析
        4.3.1 ARF6基因的表達(dá)情況
        4.3.2 ARF7基因的表達(dá)情況
        4.3.3 ARF8基因的表達(dá)情況
        4.3.4 GH3.6 基因的表達(dá)情況
        4.3.5 IAA9基因的表達(dá)情況
第5章 討論
    5.1 花期及果期農(nóng)藝性狀特性
    5.2 茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的克隆
    5.3 茄子幾個(gè)單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的表達(dá)特性
        5.3.1 三個(gè)ARF基因
        5.3.2 GH3.6 基因
        5.3.3 IAA9基因
第6章 結(jié)論
    6.1 花期及果期農(nóng)藝性狀測(cè)定的結(jié)果
    6.2 克隆得到了茄子中與單性結(jié)實(shí)相關(guān)的5個(gè)基因
    6.3 5個(gè)基因在不同結(jié)實(shí)性茄子中的表達(dá)特性
        6.3.1 不同結(jié)實(shí)性茄子中三個(gè)ARF基因的表達(dá)特性
        6.3.2 不同結(jié)實(shí)性茄子中GH3.6、IAA9基因的表達(dá)特性
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄1 縮略詞表
    附錄2 擴(kuò)增得到的茄子單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因序列及推導(dǎo)氨基酸序列
致謝
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本文編號(hào):3786555

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