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解淀粉芽孢桿菌BP30對梨采后灰霉病病害的生物防治研究

發(fā)布時間:2023-03-27 18:56
  解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)是一種與枯草芽孢桿菌親緣性很高的革蘭氏陽性菌,具有運(yùn)動性,在生長過程中能產(chǎn)生一系列的抑菌代謝物并能生成芽孢。解淀粉芽孢桿菌具有來源廣、抗菌譜廣、安全且發(fā)酵周期短等優(yōu)點(diǎn),在微生物拮抗劑防治果蔬采后病害方面受到越來越多的關(guān)注。本研究通過平板對峙實(shí)驗,篩選獲得一株對梨釆后病原真菌灰葡萄孢具有較高拮抗性的解淀粉芽孢桿菌,研究了其對梨釆后灰霉病害的生防效果,并對其生防的機(jī)理進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下:(1)通過平板對峙實(shí)驗,篩選獲得一株對梨釆后病原真菌灰葡萄孢具有良好拮抗作用的芽孢桿菌,通過形態(tài)觀察、生理生化檢測及16S rRNA序列分析,確定其為解淀粉芽孢桿菌,將其命名為:解淀粉芽孢桿菌BP30。(2)BP30能夠有效控制灰霉病,當(dāng)在25℃儲存7天時,對照組梨果的病變率為100%,解淀粉芽孢桿菌處理的梨從低濃度組(1×106CFU/m L)至高濃度組(1×108CFU/mL)病變率逐漸降低,說明解淀粉芽孢桿菌細(xì)胞懸浮液的濃度對其防治梨灰霉病的功效有很大影響,濃度越高,病變率越低,病變直徑越小。并且,在0℃儲存30天的經(jīng)解淀...

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 梨采后病害的發(fā)生和防治
        1.1.1 我國梨產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀
        1.1.2 梨采后病害
        1.1.3 梨采后病害防治主要措施
    1.2 拮抗菌作為生防菌的拮抗機(jī)制
        1.2.1 直接作用:分泌抗生素
        1.2.2 營養(yǎng)與空間競爭
        1.2.3 重寄生機(jī)制
        1.2.4 誘導(dǎo)水果產(chǎn)生抗性
            1.2.4.1 誘導(dǎo)產(chǎn)生防御酶
            1.2.4.2 誘導(dǎo)產(chǎn)生結(jié)構(gòu)抗性
            1.2.4.3 調(diào)節(jié)活性氧代謝
            1.2.4.4 誘導(dǎo)產(chǎn)生植物保衛(wèi)素(PA)
    1.3 解淀粉芽孢桿菌的研究
        1.3.1 來源
        1.3.2 抑菌活性物質(zhì)
            1.3.2.1 抑菌蛋白
            1.3.2.2 脂肽類物質(zhì)
            1.3.2.3 聚酮化合物
        1.3.3 應(yīng)用
            1.3.3.1 環(huán)境保護(hù)
            1.3.3.2 保鮮防腐
            1.3.3.3 生產(chǎn)
    1.4 研究目的及意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗材料
        2.1.1 供試菌株
        2.1.2 供試水果
        2.1.3 培養(yǎng)基
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
    2.2 拮抗菌株的篩選
        2.2.1 灰葡萄孢孢子懸浮液的制備
        2.2.2 對灰葡萄孢有拮抗作用的菌株篩選
    2.3 拮抗菌株的鑒定
        2.3.1 菌體形態(tài)、培養(yǎng)特征觀察與生理生化指標(biāo)測定
        2.3.2 菌株 16S rRNA基因序列同源性分析
    2.4 拮抗菌株對梨灰霉病病害的防治
        2.4.1 拮抗菌株控制梨灰霉病的效果
        2.4.2 拮抗菌株處理后對梨果的質(zhì)量參數(shù)影響
            2.4.2.1 質(zhì)量損失
            2.4.2.2 維生素C含量
            2.4.2.3 滴定酸度
            2.4.2.4 水果堅硬度
            2.4.2.5 總可溶物含量
    2.5 對灰葡萄孢拮抗機(jī)理研究
        2.5.1 拮抗菌株四種不同處理液對灰葡萄孢的抑制效果
        2.5.2 拮抗菌株在梨?zhèn)谔幍臄?shù)量研究
        2.5.3 拮抗菌株對灰葡萄孢孢子萌發(fā)的影響
        2.5.4 生物膜形成能力
        2.5.5 對梨果實(shí)的誘導(dǎo)抗病性防御機(jī)制的研究
            2.5.5.1 類黃酮測定
            2.5.5.2 過氧化物酶活性測定
            2.5.5.3 多酚氧化酶活性測定
            2.5.5.4 苯丙氨酸解氨酶測定
3 結(jié)果與分析
    3.1 對灰葡萄孢有拮抗作用的菌株篩選結(jié)果
    3.2 拮抗菌株的鑒定
        3.2.1 菌體形態(tài)、培養(yǎng)特征觀察與生理生化指標(biāo)測定
        3.2.2 菌株 16S rRNA基因序列同源性分析
    3.3 菌株BP30對梨灰霉病病害的防治效果
        3.3.1 解淀粉芽孢桿菌BP30控制梨灰霉病的效果
        3.3.2 解淀粉芽孢桿菌BP30處理后對梨果的質(zhì)量參數(shù)影響
    3.4 解淀粉芽孢桿菌對灰葡萄孢拮抗機(jī)理研究
        3.4.1 解淀粉芽孢桿菌BP30四種不同處理液對灰葡萄孢的抑制效果
        3.4.2 解淀粉芽孢桿菌BP30在梨?zhèn)谔幍臄?shù)量變化
        3.4.3 解淀粉芽孢桿菌BP30對灰葡萄孢孢子萌發(fā)影響的結(jié)果
        3.4.4 生物膜形成能力的影響
        3.4.5 對梨果實(shí)的誘導(dǎo)抗病性防御機(jī)制的研究
            3.4.5.1 類黃酮含量測定結(jié)果
            3.4.5.2 過氧化物酶活性測定結(jié)果
            3.4.5.3 多酚氧化酶活性測定結(jié)果
            3.4.5.4 苯丙氨酸解氨酶測定結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號:3772676

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