發(fā)布時間：2023-03-19 06:47

　　花色是花卉種質(zhì)資源最重要的觀賞性狀,也是花卉種質(zhì)創(chuàng)新最重要的目標性狀之一。了解不同物種不同花色的成色機理,有助于通過現(xiàn)代分子生物學(xué)手段實現(xiàn)花色調(diào)控,獲得具有特殊花色的新品種,提高觀賞價值,特殊花色生物工程育種也是鳶尾屬植物育種研究的重點。鳶尾屬的燕子花(Iris laevigata)花色艷麗,花型奇特,是我國北方少有的極耐寒藍色夏花種類,也是重要的水生宿根觀賞花卉。但目前花色較為單一。其天然居群下的白花變種白花燕子花(Iris laevigata var.alba)的發(fā)現(xiàn)對于燕子花花色產(chǎn)生的機理研究提供了非常好的對照材料,有利于開啟鳶尾屬植物并拓展單子葉植物花色代謝途徑研究。二氫黃酮醇4-還原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是植物花青素合成中的重要酶�；谒{、白兩種花色燕子花花材高通量的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析,獲取了花青素代謝途徑中兩種花色的差異表達關(guān)鍵基因——DFR 基因,其在白花中表達顯著下調(diào)。本研究從燕子花中成功克隆出了 DFR基因,將其命名為IlDF。對IlDFR基因進行進化分析以及亞細胞定位等基本特征分析;同時利用Real-time PCR分析Il...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 植物花色及花色素苷研究進展
        1.1.1 花色成因
        1.1.2 花色素分類研究
        1.1.3 花色素苷研究現(xiàn)狀
        1.1.4 藍色花相關(guān)研究
    1.2 燕子花研究進展
        1.2.1 燕子花種子生物學(xué)研究
        1.2.2 燕子花繁殖技術(shù)研究
        1.2.3 燕子花育種研究
        1.2.4 燕子花園林應(yīng)用
    1.3 二氫黃酮醇4-還原酶(DFR)研究進展
        1.3.1 DFR基因的結(jié)構(gòu)和作用機制
        1.3.2 DFR基因的表達
        1.3.3 DFR基因的相關(guān)應(yīng)用
    1.4 本研究的目的及意義
2 燕子花IlDFR基因的克隆及生物信息學(xué)分析
    2.1 實驗材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 主要試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 燕子花IlDFR基因序列的獲得
        2.2.2 燕子花花瓣總RNA提取及cDNA的合成
        2.2.3 IlDFR基因的全長克隆
        2.2.4 生物信息學(xué)分析
        2.2.5 燕子花IlDFR基因表達模式分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 IlDFR基因全長克隆
        2.3.2 燕子花IlDFR基因的生物信息學(xué)分析
    2.4 本章小結(jié)
3 燕子花IlDFR基因植物表達載體的構(gòu)建及對煙草的遺傳轉(zhuǎn)化
    3.1 實驗材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 實驗所需試劑及菌株
    3.2 實驗方法
        3.2.1 克隆載體的構(gòu)建
        3.2.2 pBI121-IlDFR和pBI121-IlDFR-GFP載體的構(gòu)建
        3.2.3 電轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        3.2.4 基因槍法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細胞
        3.2.5 農(nóng)桿菌介導(dǎo)法侵染煙草
        3.2.6 轉(zhuǎn)IlDFR基因煙草的PCR鑒定及表達量分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 克隆載體的構(gòu)建
        3.3.2 植物表達載體的構(gòu)建
        3.3.3 植物表達載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        3.3.4 洋蔥表皮細胞亞細胞定位檢測
        3.3.5 轉(zhuǎn)IlDFR基因煙草的獲得及PCR鑒定
    3.4 本章小結(jié)
4 IlDFR基因功能的初步研究
    4.1 實驗材料
    4.2 實驗方法
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 轉(zhuǎn)IlDFR基因煙草的形態(tài)分析
        4.3.2 轉(zhuǎn)IlDFR基因煙草的花的形態(tài)特征分析
        4.3.3 轉(zhuǎn)IlDFR基因煙草單株頂端開花數(shù)比較
    4.4 本章小結(jié)
5 討論
結(jié)論與建議
    結(jié)論
    建議
參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
附件



本文編號：3764779