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番茄部位雄性不育形態(tài)生理及Lst基因的精細定位

發(fā)布時間:2023-03-04 21:57
  利用番茄不育系進行雜交種子的生產(chǎn)可以消除傳統(tǒng)去雄的弊端,因此其對于雜種的生產(chǎn)具有重要的應(yīng)用價值。本試驗研究的番茄L型雄性不育是指雄蕊發(fā)育正常并且能夠產(chǎn)生具有活力的花粉,但是由于花柱異長使柱頭高于雄蕊,無法完成受精而最終導(dǎo)致的不育現(xiàn)象。L型雄性不育高溫下自交結(jié)實率低,且可以做到一系兩用,具有巨大的應(yīng)用價值及研究潛力。本試驗主要從形態(tài)、生理及基因定位三個方面進行研究。利用石蠟切片法對其結(jié)構(gòu)變化及不育原因進行觀察;采用高效液相色譜法對花柱中不同時期的五種激素含量的變化進行了分析;并利用親本重測序技術(shù)與Super BSA法相結(jié)合來對番茄部位不育基因定位,具體結(jié)果如下:(1)不育材料花柱維管束數(shù)目明顯多于可育花柱,同時觀察到不育材料花柱直徑較可育花柱大;不育材料花柱細胞大小與可育材料并無顯著差異,說明花柱伸長是由花柱細胞數(shù)目增多導(dǎo)致而非細胞體積變大導(dǎo)致。不育材料子房發(fā)育正常,其子房內(nèi)子室數(shù)及胚珠數(shù)明顯多于可育材料,同時發(fā)現(xiàn)在花蕾長0.5-0.7cm時,子房中間胎座部分分化出更多的子室及胚珠。(2)不育材料與可育材料花柱中GA3含量整體變化趨勢基本一致,但不育花柱中GA3始終高于可育花柱;不育花柱...

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 研究目的與意義
    1.2 文獻綜述
        1.2.1 雄性不育的類型
        1.2.2 番茄雄性不育的影響因素
        1.2.3 番茄雄性不育遺傳特點
        1.2.4 雄性不育細胞學(xué)及形態(tài)觀察
        1.2.5 雄性不育基因的定位及分子標(biāo)記
        1.2.6 番茄雄性不育在生產(chǎn)中的應(yīng)用
    1.3 番茄雄性不育存在的問題及展望
    1.4 主要研究內(nèi)容和技術(shù)路線
        1.4.1 主要研究內(nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 番茄L型雄性不育的形態(tài)觀察
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 石蠟切片的制作
    2.2 內(nèi)源激素的測定
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 儀器與藥品
        2.2.3 內(nèi)源激素的分離與提取
        2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置
        2.2.5 流動相與檢測條件
        2.2.6 數(shù)據(jù)處理
    2.3 Super BSA與親本重測序結(jié)合對Lst基因的定位
        2.3.1 構(gòu)建分離群體
        2.3.2 混池的構(gòu)建
        2.3.3 基因組酶切與測序
        2.3.4 測序數(shù)據(jù)的評估
        2.3.5 SLAF標(biāo)簽與多態(tài)性SLAF標(biāo)簽的獲得
        2.3.6 SNP分析
        2.3.7 BSA關(guān)聯(lián)分析
        2.3.8 候選區(qū)基因注釋及篩選
3 結(jié)果與分析
    3.1 遺傳規(guī)律的田間調(diào)查
    3.2 取材的形態(tài)觀察
        3.2.1 子房的解剖結(jié)構(gòu)
        3.2.2 花柱的解剖觀察
    3.3 內(nèi)源激素含量的變化
        3.3.1 IAA、ABA、GA3和ZT含量的變化
        3.3.2 水楊酸含量的變化
    3.4 super BSA與親本重測序結(jié)合對不育基因的定位
        3.4.1 基因組DNA的提取
        3.4.2 混池的構(gòu)建
        3.4.3 測序數(shù)據(jù)的評估
        3.4.4 測序結(jié)果統(tǒng)計
        3.4.5 SLAF標(biāo)簽及多態(tài)性SLAF標(biāo)簽
        3.4.6 SNP分析
        3.4.7 BSA關(guān)聯(lián)分析
        3.4.8 基因功能注釋
4 討論
    4.1 雌蕊的形態(tài)觀察
    4.2 內(nèi)源激素含量影響
    4.3 番茄部位不育基因的定位
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
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本文編號:3755079

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