發(fā)布時(shí)間：2023-02-13 19:19

　　為探究Sl-miR6027在果實(shí)成熟過程中的功能,本研究利用生物信息學(xué)方法,分析了Sl-miR6027在番茄果實(shí)發(fā)育過程中的表達(dá)模式,同時(shí)對(duì)Sl-miR6027啟動(dòng)子中存在的順式作用元件和Sl-miR6027的靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè);依據(jù)Sl-miR6027成熟序列,設(shè)計(jì)STTM寡核苷酸序列,構(gòu)建pCambia-STTM6027沉默載體;采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化番茄,通過PCR篩選陽性轉(zhuǎn)化植株并進(jìn)行初步的表型分析。結(jié)果表明:Sl-miR6027在綠熟期表達(dá)量最高;Sl-miR6027啟動(dòng)子中存在20個(gè)光應(yīng)答元件和一些非生物脅迫應(yīng)答元件;Solyc09g098130為Sl-miR6027潛在的靶基因,二者在果實(shí)成熟不同時(shí)期表達(dá)量呈負(fù)相關(guān),且其表達(dá)水平受到光照的調(diào)節(jié);依據(jù)Sl-miR6027成熟序列成功構(gòu)建出pCambia-STTM6027沉默載體;pCambia-STTM6027轉(zhuǎn)基因番茄表型分析表明Sl-miR6027參與調(diào)節(jié)紅熟期番茄果實(shí)顏色。上述結(jié)果初步表明Sl-miR6027參與調(diào)節(jié)番茄果實(shí)成熟過程。

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 Sl-miR6027在果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期的動(dòng)態(tài)表達(dá)模式分析
    1.2 Sl-miR6027啟動(dòng)子中存在果實(shí)成熟過程相關(guān)的順式作用元件
    1.3 Solyc09g098130被預(yù)測(cè)為Sl-miR6027潛在的靶基因
    1.4 靶基因Solyc09g098130的表達(dá)受光照調(diào)節(jié)
    1.5 構(gòu)建了pCambia1300-STTM6027植物沉默表達(dá)載體
    1.6 農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化番茄并獲得陽性植株
    1.7 沉默Sl-miR6027的表達(dá)影響了成熟期番茄果實(shí)的顏色
2 討論
3 材料與方法
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 miRNA表達(dá)分析
    3.3 啟動(dòng)子分析
    3.4 靶基因預(yù)測(cè)
    3.5 靶基因的光調(diào)控表達(dá)模式
    3.6 構(gòu)建SMMT-6027沉默載體
    3.7 農(nóng)桿菌介導(dǎo)番茄轉(zhuǎn)化及檢測(cè)
    3.8 定量PCR
作者貢獻(xiàn)



本文編號(hào)：3742157