蝴蝶蘭（Phalaenopsis aphrodite）由于基因資源的限制,缺乏藍(lán)色系品種,運(yùn)用分子手段,向蝴蝶蘭導(dǎo)入外源基因使其獲得新的花色素合成能力能夠跨越該種植物基因庫內(nèi)基因類型的限制和由于種族隔離無法直接獲得其他種植物藍(lán)色形成基因的限制,為定向改良植物花色育種提供理論依據(jù)。本研究以蝴蝶蘭‘大辣椒’為材料,將不同來源藍(lán)色形成基因的植物表達(dá)載體構(gòu)成不同組合瞬時(shí)轉(zhuǎn)化蝴蝶蘭,初步探索藍(lán)色形成基因?qū)m花色的遺傳調(diào)控并篩選出適合穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的載體組合,構(gòu)建植物穩(wěn)定轉(zhuǎn)化表達(dá)載體;同時(shí)研究了蝴蝶蘭外植體取材、消毒方式、基本培養(yǎng)基、6-BA和NAA的配比及濃度對(duì)不定芽誘導(dǎo)、增殖、生根的影響,探索建立蝴蝶蘭的再生繁殖體系,設(shè)置不同潮霉素濃度,篩選類原球莖最適選擇壓力。取得的結(jié)果如下:1.來自葡萄風(fēng)信子的Ma DFR和Ma F3?5?H載體組合在瞬時(shí)轉(zhuǎn)化蝴蝶蘭后,花瓣顏色變深,進(jìn)一步經(jīng)花青苷含量測定結(jié)果顯示轉(zhuǎn)化后的花瓣花青苷含量是野生型的1.32倍,從而篩選出適合穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的載體組合,即Ma DFR+Ma F3?5?H。2.構(gòu)建了植物雙元表達(dá)載體p CAMBIA1301-Ma DFR-Ma F3?5?H... 

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 引言
    1.2 植物呈色機(jī)制研究進(jìn)展
        1.2.1 花青素生化和生物合成途徑
        1.2.2 影響植物呈色的其他因素
    1.3 藍(lán)色花育種研究進(jìn)展
    1.4 蝴蝶蘭組織培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1.4.1 蝴蝶蘭花梗組織培養(yǎng)
        1.4.2 蝴蝶蘭類原球莖組織培養(yǎng)
    1.5 蝴蝶蘭轉(zhuǎn)基因研究進(jìn)展
    1.6 本研究的目的與意義
    1.7 技術(shù)路線
第二章 不同來源藍(lán)色形成基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)化蝴蝶蘭研究
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株和載體
        2.1.3 試劑與儀器
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化蝴蝶蘭
        2.2.2 表型觀察
        2.2.3 花青苷總量測定
        2.2.4 細(xì)胞液pH測定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 瞬時(shí)轉(zhuǎn)化蝴蝶蘭表型觀察
        2.3.2 花青苷總量測定
        2.3.3 細(xì)胞液pH測定
    2.4 小結(jié)
第三章 植物表達(dá)載體構(gòu)建和蝴蝶蘭再生體系建立研究
    3.1 材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 菌株和載體
        3.1.3 試劑與儀器
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 穩(wěn)定轉(zhuǎn)化植物雙元表達(dá)載體構(gòu)建
        3.2.2 蝴蝶蘭再生體系建立及類原球莖抗性濃度篩選
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 載體構(gòu)建示意圖
        3.3.2 目的片段的擴(kuò)增
        3.3.3 中間載體pCAMBIA1301-Ma F3?5?H的構(gòu)建
        3.3.4 植物表達(dá)載體pCAMBIA1301-Ma DFR-Ma F3?5?H的構(gòu)建
        3.3.5 蝴蝶蘭外植體的選擇
        3.3.6 消毒劑種類和消毒時(shí)間處理對(duì)外植體的影響
        3.3.7 基礎(chǔ)培養(yǎng)基和6-BA、NAA對(duì)不定芽誘導(dǎo)的影響
        3.3.8 6 -BA、NAA對(duì)不定芽增殖的影響
        3.3.9 6 -BA、NAA對(duì)蝴蝶蘭生根的影響
        3.3.10 類原球莖對(duì)潮霉素的敏感性
    3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡介



本文編號(hào)：3710308