噴施水楊酸可以誘導植物抗逆性相關(guān)基因的大量表達,提高植物對逆境脅迫如生物脅迫（如病蟲害等）和非生物脅迫（如氣象災害、土壤脅迫等）的抵抗能力,具有綠色、環(huán)保、高效的優(yōu)點,可成為植物病蟲害防治和提高逆境適應能力的新途徑,分離水楊酸誘導表達的抗病和抗逆性相關(guān)基因,對于植物抗逆性的遺傳改良和提高植物對逆境脅迫的適應性具有重要的理論意義和實踐價值。（木奈）（Prunus salicina Lindli. var cordata J.Y.Zhang et al.）屬薔薇科（Rosaceae）李屬（Prunus）,是原產(chǎn)福建的名、特、優(yōu)的核果類果樹之一,具有重要的經(jīng)濟價值。本研究以一年生（木奈）嫁接苗為材料,用不同濃度的水楊酸噴施葉片,在處理后的不同間取樣,提取總RNA；采用稀釋池PCR法,篩選（木奈）葉片富含全長均一化cDNA文庫,獲得與水楊酸誘導抗逆性相關(guān)的NPR1和WRKY同源基因的全長cDNA,采用熒光定量PCR技術(shù),檢測這些基因在不同水楊酸濃度和處理時間上表達量的差異,找出抗逆性基因高表達的最佳水楊酸處理條件；用最佳濃度水楊酸噴施（木奈）苗葉片,取噴施后30.0 h和0.0 h的葉片為材料... 

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞
摘要
Abstract
第一章 引言
    1 研究背景與意義
    2 文獻綜述
        2.1 (木奈)抗性的分子生物學研究進展
        2.2 水楊酸在植物體內(nèi)的生物合成
        2.3 調(diào)控水楊酸信號轉(zhuǎn)導途徑的轉(zhuǎn)錄因子
        2.4 水楊酸信號與植物天然免疫系統(tǒng)
        2.5 外源水楊酸與植物抗非生物脅迫
            2.5.1 水楊酸與植物抗旱性
            2.5.2 水楊酸與植物抗寒性
            2.5.3 水楊酸與植物抗鹽性及滲透脅迫
    3 研究內(nèi)容
    4 研究的技術(shù)路線
第二章 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全長cDNA的分離與表達分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗材料
        1.2 試驗方法
            1.2.1 取樣
            1.2.2 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全長cDNA的篩選
            1.2.3 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全長cDNA的生物信息學分析
            1.2.4 (木奈)NPR1和WRKY同源基因表達量的檢測
    2 結(jié)果與分析
        2.1 (木奈)NPR1同源基因的分離與生物信息學分析
        2.2 (木奈)NPR1同源基因的表達分析
        2.3 (木奈)WRKY同源基因的分離與生物信息學分析
        2.4 (木奈)WRKY同源基因的表達分析
    3 討論
        3.1 外源水楊酸處理的最適濃度和最佳響應時間
        3.2 NPR1是水楊酸信號轉(zhuǎn)導途徑中的主要調(diào)控因子
            3.2.1 (木奈)NPR1同源基因結(jié)構(gòu)特點與功能預測
            3.2.2 (木奈)NPR1同源基因在水楊酸誘導下的表達模式
        3.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子參與水楊酸信號轉(zhuǎn)導途徑
            3.3.1 (木奈)WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與分類
            3.3.2 (木奈)WRKY在外源水楊酸誘導下的表達模式
第三章 水楊酸誘導下抗逆性相關(guān)差異基因的分離
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 試驗方法
            1.2.1 DSN介導-抑制差減雜交cDNA文庫的構(gòu)建
            1.2.2 DSN介導-抑制差減雜交cDNA文庫的篩選
            1.2.3 差減文庫陽性克隆的測序與分析
            1.2.4 差異基因熒光定量表達分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 (木奈)葉片總RNA的質(zhì)量與ds cDNA合成
        2.2 不同DSN濃度處理對差異ds cDNA擴增的影響
        2.3 DSN介導-抑制差減cDNA文庫的質(zhì)量評價
        2.4 陽性克隆的測序與生物信息學分析
        2.5 差異基因熒光定量表達分析
    3 討論
小結(jié)
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]湖北海棠抗病相關(guān)基因的克隆及其功能分析[D]. 張計育.南京農(nóng)業(yè)大學 2011

碩士論文
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[2]（木奈）芽葉蠟質(zhì)形成關(guān)鍵酶基因的分離與表達研究[D]. 趙利.福建農(nóng)林大學 2014
[3]夜來香生物鐘及花香基因的克隆[D]. 呂恃衡.福建農(nóng)林大學 2013
[4]中國水仙MYB轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆與表達分析[D]. 楊曄.福建農(nóng)林大學 2013
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[6]夜來香均一化全長cDNA文庫的構(gòu)建與花香相關(guān)基因的遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 鄭鴻昌.福建農(nóng)林大學 2012
[7]小麥UDP-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因Ta-UGT3的表達載體構(gòu)建和轉(zhuǎn)化小麥研究[D]. 裴海巖.南京農(nóng)業(yè)大學 2011



本文編號：3696533