噴施水楊酸可以誘導(dǎo)植物抗逆性相關(guān)基因的大量表達(dá),提高植物對(duì)逆境脅迫如生物脅迫（如病蟲(chóng)害等）和非生物脅迫（如氣象災(zāi)害、土壤脅迫等）的抵抗能力,具有綠色、環(huán)保、高效的優(yōu)點(diǎn),可成為植物病蟲(chóng)害防治和提高逆境適應(yīng)能力的新途徑,分離水楊酸誘導(dǎo)表達(dá)的抗病和抗逆性相關(guān)基因,對(duì)于植物抗逆性的遺傳改良和提高植物對(duì)逆境脅迫的適應(yīng)性具有重要的理論意義和實(shí)踐價(jià)值。（木奈）（Prunus salicina Lindli. var cordata J.Y.Zhang et al.）屬薔薇科（Rosaceae）李屬（Prunus）,是原產(chǎn)福建的名、特、優(yōu)的核果類果樹(shù)之一,具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。本研究以一年生（木奈）嫁接苗為材料,用不同濃度的水楊酸噴施葉片,在處理后的不同間取樣,提取總RNA；采用稀釋池PCR法,篩選（木奈）葉片富含全長(zhǎng)均一化cDNA文庫(kù),獲得與水楊酸誘導(dǎo)抗逆性相關(guān)的NPR1和WRKY同源基因的全長(zhǎng)cDNA,采用熒光定量PCR技術(shù),檢測(cè)這些基因在不同水楊酸濃度和處理時(shí)間上表達(dá)量的差異,找出抗逆性基因高表達(dá)的最佳水楊酸處理?xiàng)l件；用最佳濃度水楊酸噴施（木奈）苗葉片,取噴施后30.0 h和0.0 h的葉片為材料... 

【文章頁(yè)數(shù)】：103 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞
摘要
Abstract
第一章 引言
    1 研究背景與意義
    2 文獻(xiàn)綜述
        2.1 (木奈)抗性的分子生物學(xué)研究進(jìn)展
        2.2 水楊酸在植物體內(nèi)的生物合成
        2.3 調(diào)控水楊酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的轉(zhuǎn)錄因子
        2.4 水楊酸信號(hào)與植物天然免疫系統(tǒng)
        2.5 外源水楊酸與植物抗非生物脅迫
            2.5.1 水楊酸與植物抗旱性
            2.5.2 水楊酸與植物抗寒性
            2.5.3 水楊酸與植物抗鹽性及滲透脅迫
    3 研究?jī)?nèi)容
    4 研究的技術(shù)路線
第二章 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全長(zhǎng)cDNA的分離與表達(dá)分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 取樣
            1.2.2 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全長(zhǎng)cDNA的篩選
            1.2.3 (木奈)NPR1和WRKY同源基因全長(zhǎng)cDNA的生物信息學(xué)分析
            1.2.4 (木奈)NPR1和WRKY同源基因表達(dá)量的檢測(cè)
    2 結(jié)果與分析
        2.1 (木奈)NPR1同源基因的分離與生物信息學(xué)分析
        2.2 (木奈)NPR1同源基因的表達(dá)分析
        2.3 (木奈)WRKY同源基因的分離與生物信息學(xué)分析
        2.4 (木奈)WRKY同源基因的表達(dá)分析
    3 討論
        3.1 外源水楊酸處理的最適濃度和最佳響應(yīng)時(shí)間
        3.2 NPR1是水楊酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的主要調(diào)控因子
            3.2.1 (木奈)NPR1同源基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與功能預(yù)測(cè)
            3.2.2 (木奈)NPR1同源基因在水楊酸誘導(dǎo)下的表達(dá)模式
        3.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子參與水楊酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
            3.3.1 (木奈)WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與分類
            3.3.2 (木奈)WRKY在外源水楊酸誘導(dǎo)下的表達(dá)模式
第三章 水楊酸誘導(dǎo)下抗逆性相關(guān)差異基因的分離
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 DSN介導(dǎo)-抑制差減雜交cDNA文庫(kù)的構(gòu)建
            1.2.2 DSN介導(dǎo)-抑制差減雜交cDNA文庫(kù)的篩選
            1.2.3 差減文庫(kù)陽(yáng)性克隆的測(cè)序與分析
            1.2.4 差異基因熒光定量表達(dá)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 (木奈)葉片總RNA的質(zhì)量與ds cDNA合成
        2.2 不同DSN濃度處理對(duì)差異ds cDNA擴(kuò)增的影響
        2.3 DSN介導(dǎo)-抑制差減cDNA文庫(kù)的質(zhì)量評(píng)價(jià)
        2.4 陽(yáng)性克隆的測(cè)序與生物信息學(xué)分析
        2.5 差異基因熒光定量表達(dá)分析
    3 討論
小結(jié)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]黃瓜幾丁質(zhì)酶基因克隆及與白粉病抗性關(guān)系的初步研究[J]. 羅晶晶,張仁英,齊曉花,徐強(qiáng),陳學(xué)好.  分子植物育種. 2015(07)
[2]福建產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及前景[J]. 姜翠翠,孫文鵬,葉新福,方智振,周丹蓉,潘少霖.  東南園藝. 2015(02)
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[4]花生中UDP-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及在非生物脅迫下的表達(dá)研究[J]. 陳娜,胡東青,潘麗娟,遲曉元,陳明娜,王通,王冕,楊珍,禹山林.  中國(guó)油料作物學(xué)報(bào). 2014(03)
[5]植物GRAS家族轉(zhuǎn)錄因子的研究現(xiàn)狀[J]. 李桂英,田玉富,楊成君.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(14)
[6]富士蘋(píng)果MdWRKY40b基因克隆及其對(duì)白粉病的抗性分析[J]. 羅昌國(guó),袁啟鳳,裴曉紅,吳亞維,鄭偉,章鎮(zhèn).  西北植物學(xué)報(bào). 2013(12)
[7]蘋(píng)果NBS-LRR1基因的鑒定與表達(dá)分析[J]. 宋霄,柏素花,戴洪義.  園藝學(xué)報(bào). 2013(07)
[8]水楊酸對(duì)梨SOD、PPO同工酶和NPR1表達(dá)的影響[J]. 高麗娟,張玉星.  園藝學(xué)報(bào). 2013(01)
[9]香蕉NPR1基因的克隆及植物表達(dá)載體構(gòu)建[J]. 陸英,張欣,漆艷香,蒲金基,謝藝賢.  熱帶作物學(xué)報(bào). 2010(09)
[10]WRKY轉(zhuǎn)錄因子功能研究進(jìn)展[J]. 張娟.  西北植物學(xué)報(bào). 2009(10)

博士論文
[1]湖北海棠抗病相關(guān)基因的克隆及其功能分析[D]. 張計(jì)育.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]水稻OsmtATPS1基因的克隆及功能初步分析[D]. 張毛毛.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[2]（木奈）芽葉蠟質(zhì)形成關(guān)鍵酶基因的分離與表達(dá)研究[D]. 趙利.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[3]夜來(lái)香生物鐘及花香基因的克隆[D]. 呂恃衡.福建農(nóng)林大學(xué) 2013
[4]中國(guó)水仙MYB轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 楊曄.福建農(nóng)林大學(xué) 2013
[5]辣椒內(nèi)參基因的篩選及NBS-LRR類抗病基因同源序列的鑒定[D]. 趙敬.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[6]夜來(lái)香均一化全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建與花香相關(guān)基因的遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 鄭鴻昌.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[7]小麥UDP-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因Ta-UGT3的表達(dá)載體構(gòu)建和轉(zhuǎn)化小麥研究[D]. 裴海巖.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011



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