柑橘是全世界最重要的水果之一,果實營養(yǎng)豐富,口感好。柑橘類果實在采后貯藏期間容易發(fā)生一種嚴重的生理病害-果實汁胞的木質(zhì)化。目前柑橘果實汁胞的木質(zhì)化形成的分子機制仍不清楚,MYB家族轉(zhuǎn)錄因子參與植物木質(zhì)素的代謝過程在模式植物和樹木上已有很多研究,但他們在柑橘果實木質(zhì)化中的功能及調(diào)控機制尚不清楚。我們根據(jù)前期的miRNA及轉(zhuǎn)錄組測序,并結(jié)合實時熒光定量PCR分析發(fā)現(xiàn),隨著果實汁胞木質(zhì)化的加重,CsMYB330、CsMYB308和CsMYB85轉(zhuǎn)錄因子的表達水平發(fā)生顯著變化,且汁胞木質(zhì)素含量顯著升高。研究結(jié)果表明CsMYB330和CsMYB308可以識別并結(jié)合Cs4CL1基因啟動子中的AC元件并精細調(diào)控Cs4CL1基因的表達;在精細調(diào)控過程中,CsMYB330被鑒定為轉(zhuǎn)錄激活因子,而CsMYB308是轉(zhuǎn)錄抑制因子。此外,通過在果實汁胞中瞬時過表達這兩個轉(zhuǎn)錄因子,發(fā)現(xiàn)Cs4CL1基因的表達發(fā)生顯著的變化。另外,我們還分離并鑒定了CsMYB85轉(zhuǎn)錄因子,在果實汁胞木質(zhì)化過程中,該基因的表達水平也發(fā)生顯著的變化。結(jié)果表明,CsMYB85轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合CsMYB330的啟動子,調(diào)控其表達;在酵母和... 

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 研究背景
    1.1 國內(nèi)外研究進展
        1.1.1 柑橘汁胞粒化與木質(zhì)化的關(guān)系
        1.1.2 木質(zhì)素的組成及作用
        1.1.3 木質(zhì)素生物合成的遺傳調(diào)控
        1.1.4 木質(zhì)素在植物生長發(fā)育中的作用
        1.1.5 木質(zhì)素在植物抗倒伏中的作用
        1.1.6 木質(zhì)素生物合成與植物脅迫適應的關(guān)系
        1.1.7 果實木質(zhì)素的生物合成及調(diào)控
    1.2 本項目的意義
2 材料和方法
    2.1 柑橘果實及擬南芥材料
    2.2 木質(zhì)素含量測定
    2.3 基因和啟動子的分離和分析
    2.4 轉(zhuǎn)錄因子的亞細胞定位分析
    2.5 DNA、RNA提取,cDNA合成及熒光定量PCR
    2.6 酵母實驗
    2.7 轉(zhuǎn)錄活性測定
    2.8 雙分子熒光互補(BiFC)
    2.9 基因槍瞬時轉(zhuǎn)化果實汁胞
3 CsMYB330和CsMYB308轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同調(diào)控汁胞木質(zhì)化
    3.1 果實汁胞粒化的表型和木質(zhì)素含量分析
    3.2 CsMYB330和CsMYB308基因的鑒定和分析
    3.3 �；麑嵵蠧sMYB330和CsMYB308基因表達的變化
    3.4 CsMYB330和CsMYB308的分子特征
    3.5 粒化果實中木質(zhì)素生物合成相關(guān)基因表達的變化
    3.6 CsMYB330和CsMYB308與木質(zhì)素合成相關(guān)基因的啟動子結(jié)合
    3.7 CsMYB330和CsMYB308通過與啟動子AC元件結(jié)合調(diào)節(jié)Cs4CL1基因的表達
    3.8 CsMYB330和CsMYB308調(diào)控Cs4CL1基因表達并影響汁胞木質(zhì)素的合成
    3.9 小結(jié)
    3.10 討論
4 CsMYB85轉(zhuǎn)錄因子間接調(diào)控汁胞木質(zhì)化
    4.1 CsMYB85轉(zhuǎn)錄因子的鑒定與分析
    4.2 CsMYB85基因在柑橘果實�；^程中的表達
    4.3 CsMYB85的亞細胞定位及轉(zhuǎn)錄活性分析
    4.4 CsMYB85與木質(zhì)素生物合成相關(guān)基因的啟動子結(jié)合
    4.5 CsMYB85通過與啟動子結(jié)合來調(diào)控CsMYB330基因的表達
    4.6 CsMYB85與CsMYB308轉(zhuǎn)錄因子之間的相互作用
    4.7 CsMYB85間接調(diào)控Cs4CL1基因的表達并影響汁胞木質(zhì)素合成
    4.8 CsMYB85基因過表達可增加擬南芥中的木質(zhì)素含量
    4.9 小結(jié)
    4.10 討論
5 全文總結(jié)
參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]琯溪蜜柚汁胞�；^程中生理變化與基因差異表達分析[D]. 佘文琴.福建農(nóng)林大學 2009

碩士論文
[1]柑橘貯藏過程中汁胞粒化相關(guān)miRNA的篩選及功能分析[D]. 張晶.中國農(nóng)業(yè)科學院 2016
[2]蜜柚木質(zhì)素合成相關(guān)基因的克隆與表達研究[D]. 徐玉.福建農(nóng)林大學 2014
[3]琯溪蜜柚果實木質(zhì)素代謝研究[D]. 朱學亮.福建農(nóng)林大學 2009



本文編號：3683687