茄子（Solanum melongena L.）是人們?nèi)粘Ｉ钪胁豢苫蛉钡氖卟酥?具有很強(qiáng)的雜種優(yōu)勢(shì)。利用雜種優(yōu)勢(shì)可以提高茄子產(chǎn)量、增強(qiáng)抗逆性、改良品質(zhì)。雄性不育系作為母本生產(chǎn)雜種一代是利用茄子雜種優(yōu)勢(shì)的一種重要途徑,其中花藥不開(kāi)裂是功能性雄性不育的表現(xiàn)形式之一。明確茄子雄性不育的發(fā)生機(jī)理,對(duì)利用雜種優(yōu)勢(shì)育種和創(chuàng)造茄子種質(zhì)資源具有重要的理論意義與實(shí)踐應(yīng)用價(jià)值。本研究以茄子雄性不育系F16-5-6和可育系142為試驗(yàn)材料,采用雙向電泳技術(shù)和質(zhì)譜鑒定技術(shù)對(duì)這兩個(gè)品種同一時(shí)期的花藥進(jìn)行了差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究分析。獲得了可能與花藥發(fā)育及茄子雄性不育相關(guān)的差異表達(dá)蛋白,并對(duì)其中一個(gè)差異表達(dá)蛋白COI1的編碼基因及其途徑中的兩個(gè)基因JAZ1、MYC2進(jìn)行了同源克隆、生物信息學(xué)及熒光定量PCR表達(dá)分析,從蛋白質(zhì)水平和基因水平上探尋了茄子花藥不開(kāi)裂的可能原因,從而為今后進(jìn)一步探索茄子功能性雄性不育機(jī)理的研究奠定了一定的基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1、采用蛋白雙向凝膠電泳對(duì)茄子花藥蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,從分離的43個(gè)蛋白點(diǎn)中選取4個(gè)極顯著差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF/TOF-MS/MS質(zhì)譜鑒定分析,4個(gè)極顯著... 

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物花藥開(kāi)裂研究進(jìn)展
        1.1.1 植物花藥開(kāi)裂的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制
        1.1.2 植物花藥開(kāi)裂的分子調(diào)控機(jī)制
    1.2 蛋白質(zhì)組研究概述
        1.2.1 蛋白質(zhì)組的概念及發(fā)展史
        1.2.2 蛋白組學(xué)研究相關(guān)技術(shù)
        1.2.3 蛋白組學(xué)在植物雄性不育方面的研究
        1.2.4 茄子雄性不育差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    1.3 茉莉酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的研究進(jìn)展
第二章 引言
    本試驗(yàn)采用技術(shù)路線如下
第三章 基于雙向電泳的茄子花藥開(kāi)裂相關(guān)蛋白的鑒定
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 茄子花藥總蛋白的提取
            3.1.2.2 茄子花藥總蛋白的純化
            3.1.2.3 茄子花藥總蛋白的定量
            3.1.2.4 茄子花藥總蛋白的雙向電泳
            3.1.2.5 硝酸銀染色方法
            3.1.2.6 2-DE凝膠蛋白差異點(diǎn)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 花藥蛋白濃度定量
        3.2.2 花藥蛋白的雙向電泳檢測(cè)及質(zhì)譜鑒定分析
            3.2.2.1 花藥蛋白雙向電泳圖譜比較
            3.2.2.2 茄子花藥差異表達(dá)蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜鑒定
    3.3 討論
第四章 茄子JA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的克隆與分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
            4.1.2.1 取材方法
            4.1.2.2 茄子花藥總RNA提取
            4.1.2.3 茄子花藥RNA的純度和濃度檢測(cè)
            4.1.2.4 茄子第一鏈cDNA的獲得
            4.1.2.5 茄子JA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的ORF區(qū)擴(kuò)增
            4.1.2.6 目的基因片段的回收
            4.1.2.7 目的片段克隆載體的連接、轉(zhuǎn)化及鑒定
            4.1.2.8 茄子JA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的序列分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 茄子花藥總RNA提取純度檢測(cè)
        4.2.2 茄子JA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的ORF區(qū)克隆結(jié)果
        4.2.3 茄子COI1、JAZ1、MYC2基因的生物信息學(xué)分析
            4.2.3.1 COI1基因的編碼蛋白的生物信息學(xué)分析
            4.2.3.2 JAZ1基因的編碼蛋白的生物信息學(xué)分析
            4.2.3.3 MYC2基因的編碼蛋白的生物信息學(xué)分析
    4.3 討論
第五章 茄子JA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因的表達(dá)分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 茄子花藥總RNA的提取及純度檢測(cè)
        5.2.2 茄子JA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因在茄子花藥不同時(shí)期的表達(dá)分析
            5.2.2.1 茄子COI1基因的定量表達(dá)分析
            5.2.2.2 茄子JAZ1基因的定量表達(dá)分析
            5.2.2.3 茄子MYC2基因的定量表達(dá)分析
    5.3 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
在學(xué)期間發(fā)表論文
在學(xué)期間參加的科研項(xiàng)目


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]茄子功能性雄性不育的細(xì)胞學(xué)及內(nèi)源激素變化研究[D]. 丁澤琴.西南大學(xué) 2014
[3]小麥生理型雄性不育旗葉質(zhì)膜差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 宋齊魯.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[4]大鼠機(jī)械性腦損傷動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 楊術(shù)旺.河北醫(yī)科大學(xué) 2006
[5]茄子雄性不育的生化分析與分子生物學(xué)研究[D]. 牛友芽.湖南大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3683117