黃秋葵ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因(HeZDS)的克隆與表達(dá)分析
發(fā)布時間:2022-07-16 17:27
胡蘿卜素脫氫酶(ζ-carotene desaturase, ZDS)是類胡蘿卜素合成的重要限速酶,其催化ζ-胡蘿卜素生成番茄紅素。本研究根據(jù)黃秋葵(Hibiscus esculentus)轉(zhuǎn)錄組測序獲得的序列數(shù)據(jù),設(shè)計(jì)引物克隆得到1條2 189 bp的ZDS基因cDNA全長,其具有1 686 bp的ORF;編碼561個氨基酸,理論分子量為61.79kD,等電點(diǎn)(pI)為6.807;編碼的蛋白與亞洲棉(Gossypium arboreum)、陸地棉(G. hirsutum)、黃麻(Corchorus capsularis)、榴蓮(Durio zibethinus)、可可(Theobroma cacao)等蛋白的同源性均超過90%,顯示其高度的保守性,將基因命名為HeZDS,GenBank登錄號為:MG372371。qRT-PCR定量分析表明,黃秋葵根、莖、葉、花和果實(shí)等器官中都有檢測到HeZDS基因;葉發(fā)育過程中以成熟葉中表達(dá)量最高,果實(shí)發(fā)育中以花后2 d高表達(dá)。HeZDS基因的表達(dá)與類胡蘿卜素含量存在密切的相關(guān)性。本研究為HeZDS的功能和類胡蘿卜素調(diào)控機(jī)制研究提供了資料基礎(chǔ)。
【文章頁數(shù)】:11 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 儀器和試劑
1.3 轉(zhuǎn)錄組測序
1.4 HeZDS基因的生物信息學(xué)分析
1.5 HeZDS基因的實(shí)時熒光定量分析
1.6 類胡蘿卜素提取和測定
2 結(jié)果與分析
2.1 HeZDS基因克隆與驗(yàn)證
2.2 HeZDS基因序列的生物信息分析
2.3 HeZDS基因的表達(dá)分析
2.3.1 黃秋葵不同品種不同組織中HeZDS基因表達(dá)
2.3.2 黃秋葵葉片發(fā)育過程中HeZDS基因的表達(dá)
2.3.3 黃秋葵果實(shí)發(fā)育過程中HeZDS基因的表達(dá)
2.4 類胡蘿卜素積累量分析
2.4.1 黃秋葵不同組織類胡蘿卜素積累量分析
2.4.2 黃秋葵葉片不同發(fā)育階段類胡蘿卜素積累量分析
2.4.3 黃秋葵果實(shí)不同發(fā)育階段類胡蘿卜素積累量分析
2.5 HeZDS基因表達(dá)與類胡蘿卜素積累量的相關(guān)性分析
3 討論
4 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黃秋葵八氫番茄紅素合成酶PSY基因的克隆與分析[J]. 李永平,陳敏氡,朱海生,溫慶放,劉建汀,林思鍛. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2019(10)
[2]黃秋葵八氫番茄紅素脫氫酶基因的克隆與分析[J]. 李永平,王彬,陳敏氡,劉建汀,朱海生,溫慶放. 西北植物學(xué)報. 2019(07)
[3]桃果實(shí)ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因克隆及表達(dá)分析[J]. 梁敏華,楊震峰,蘇新國,宋春波. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2018(05)
[4]鶴望蘭ζ–胡蘿卜素脫氫酶基因SrZDS的克隆及表達(dá)分析[J]. 樊榮輝,黃敏玲,鐘淮欽,林兵. 園藝學(xué)報. 2016(05)
[5]黃瓜ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因克隆及表達(dá)分析[J]. 王柬人,李錫香,王海平,邱楊,宋江萍,張曉輝,沈鏑. 分子植物育種. 2012(05)
[6]草莓ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因ZDS的克隆及特征分析[J]. 李永平,朱海生,溫慶放,花秀鳳,林琿. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報. 2010(06)
[7]14個黃秋葵品系葉黃素和β-胡蘿卜素產(chǎn)量比較試驗(yàn)[J]. 劉東祥,葉花蘭,劉國道. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2006(06)
[8]通過轉(zhuǎn)基因提高β-胡蘿卜素生物合成量[J]. 季靜,山村三郎,西原昌宏,王罡,小巖弘之,朱長甫. 中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2004(04)
本文編號:3662946
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【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 儀器和試劑
1.3 轉(zhuǎn)錄組測序
1.4 HeZDS基因的生物信息學(xué)分析
1.5 HeZDS基因的實(shí)時熒光定量分析
1.6 類胡蘿卜素提取和測定
2 結(jié)果與分析
2.1 HeZDS基因克隆與驗(yàn)證
2.2 HeZDS基因序列的生物信息分析
2.3 HeZDS基因的表達(dá)分析
2.3.1 黃秋葵不同品種不同組織中HeZDS基因表達(dá)
2.3.2 黃秋葵葉片發(fā)育過程中HeZDS基因的表達(dá)
2.3.3 黃秋葵果實(shí)發(fā)育過程中HeZDS基因的表達(dá)
2.4 類胡蘿卜素積累量分析
2.4.1 黃秋葵不同組織類胡蘿卜素積累量分析
2.4.2 黃秋葵葉片不同發(fā)育階段類胡蘿卜素積累量分析
2.4.3 黃秋葵果實(shí)不同發(fā)育階段類胡蘿卜素積累量分析
2.5 HeZDS基因表達(dá)與類胡蘿卜素積累量的相關(guān)性分析
3 討論
4 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黃秋葵八氫番茄紅素合成酶PSY基因的克隆與分析[J]. 李永平,陳敏氡,朱海生,溫慶放,劉建汀,林思鍛. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2019(10)
[2]黃秋葵八氫番茄紅素脫氫酶基因的克隆與分析[J]. 李永平,王彬,陳敏氡,劉建汀,朱海生,溫慶放. 西北植物學(xué)報. 2019(07)
[3]桃果實(shí)ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因克隆及表達(dá)分析[J]. 梁敏華,楊震峰,蘇新國,宋春波. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2018(05)
[4]鶴望蘭ζ–胡蘿卜素脫氫酶基因SrZDS的克隆及表達(dá)分析[J]. 樊榮輝,黃敏玲,鐘淮欽,林兵. 園藝學(xué)報. 2016(05)
[5]黃瓜ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因克隆及表達(dá)分析[J]. 王柬人,李錫香,王海平,邱楊,宋江萍,張曉輝,沈鏑. 分子植物育種. 2012(05)
[6]草莓ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因ZDS的克隆及特征分析[J]. 李永平,朱海生,溫慶放,花秀鳳,林琿. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報. 2010(06)
[7]14個黃秋葵品系葉黃素和β-胡蘿卜素產(chǎn)量比較試驗(yàn)[J]. 劉東祥,葉花蘭,劉國道. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2006(06)
[8]通過轉(zhuǎn)基因提高β-胡蘿卜素生物合成量[J]. 季靜,山村三郎,西原昌宏,王罡,小巖弘之,朱長甫. 中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2004(04)
本文編號:3662946
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