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三個草莓品種AsA代謝途徑關(guān)鍵酶的研究

發(fā)布時間:2022-07-03 13:27
  抗壞血酸(AsA),也就是維生素C(Vc),作為一種小分子抗氧化物質(zhì),其在植物組織中是廣泛存在的,它在植物生長發(fā)育的各個階段都起著重要作用,能夠清除體內(nèi)的自由基,對細(xì)胞分裂進(jìn)行調(diào)控,還能夠促進(jìn)細(xì)胞抵抗逆境等,同時,維生素C還能夠保持人體的健康,所以,很多人都比較關(guān)注植物中AsA的含量,也是農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)質(zhì)量評價的指標(biāo)之一。本試驗以AsA含量豐富且差異顯著的三個草莓栽培品種‘章姬’(Fragaria×ananassa cv. Akihime)、‘紅顏’(Fragaria× ananassa cv. Benihoppe)、‘小白’(Fragaria×ananassa. var.’Benihoppe’)為材料,研究AsA-GSH循環(huán)途徑中5個相關(guān)酶基因家族(MDHARs, GRs, AOs, DHARs,APXs)不同亞型成員的表達(dá)規(guī)律,從分子水平和生理水平兩個方面分析,最終確定了影響AsA含量的關(guān)健酶,同時對基因在植物體內(nèi)的功能、其表達(dá)模式進(jìn)行研究,能夠促進(jìn)對AsA在植物體內(nèi)的積累代謝機制的了解,進(jìn)而能夠促進(jìn)植物抵抗環(huán)境脅迫能力的增強、植物體內(nèi)AsA含量積累的研究。另外,本研究還利用生物信息學(xué)... 

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮寫詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 AsA在植物體內(nèi)的生理功能
        1.1 AsA在植物抗氧化系統(tǒng)中的作用
        1.2 AsA在植物光合作用和光保護中的作用
        1.3 AsA在植物生長發(fā)育中的作用
            1.3.1 作為酶的輔因子
            1.3.2 參與細(xì)胞分裂
            1.3.3 調(diào)控細(xì)胞壁代謝和細(xì)胞膨大
        1.4 AsA在信號傳遞中的作用
    2 AsA在植物體內(nèi)的合成和代謝途徑
        2.1 植物AsA的生物合成途徑
        2.2 植物AsA的代謝及再生
            2.2.1 植物AsA的代謝途徑
            2.2.2 植物AsA的氧化酶研究進(jìn)展
                2.2.2.1 抗壞血酸氧化酶AO
                2.2.2.2 抗壞血酸過氧化物酶APX
            2.2.3 植物抗壞血酸的再生酶研究進(jìn)展
                2.2.3.1 單脫氫抗壞血酸還原酶MDHAR
                2.2.3.2 脫氫抗壞血酸還原酶DHAR
                2.2.3.3 谷胱甘肽還原酶GR
    3 草莓中高含量AsA積累的相關(guān)研究進(jìn)展
    4 本研究的目的、意義和技術(shù)路線
第二章 草莓果實生長發(fā)育過程中AsA代謝產(chǎn)物積累及相關(guān)酶活性的變化
    1 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 實驗方法
            1.2.1 AsA及DHA含量的測定
            1.2.2 AO酶活的測定
            1.2.3 APX、MDHAR、DHAR、GR酶活的測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 果實發(fā)育過程中AsA含量及氧化還原水平變化分析
        2.2 果實發(fā)育過程中AsA代謝相關(guān)酶活性變化分析
            2.2.1 AO活性變化分析
            2.2.2 APX活性變化分析
            2 .2.3 MDHAR活性變化分析
            2.2.4 DHAR活性變化分析
            2.2.5 GR活性變化分析
        2.3 AO、APX、MDHAR、DHAR和GR酶活與產(chǎn)物積累的相關(guān)性分析
    3 討論
第三章 草莓APX、AO、MDHAR、DHAR、GR基因家族成員生物信息學(xué)分析及表達(dá)分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 APX、AO、MDHAR、DHAR、GR家族基因成員的生物信息學(xué)鑒定
            1.2.2 AO、APX、MDHAR、DHAR、GR基因家族成員同源序列分析
            1.2.3 AO、APX、MDHAR、DHAR、GR基因家族成員的三級結(jié)構(gòu)預(yù)測
            1.2.4 總RNA提取
            1.2.5 RNA完整性及質(zhì)量檢測
            1.2.6 cDNA第一鏈合成
            1.2.7 定量引物設(shè)計及合成
            1.2.8 實時定量PCR體系及程序
        1.3 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 AO、APX、MDHAR、DHAR、GR基因家族成員保守結(jié)構(gòu)域分析
            2.1.1 AO基因家族成員保守結(jié)構(gòu)域分析
            2.1.2 APX基因家族成員保守結(jié)構(gòu)域分析
            2.1.3 MDHAR基因家族成員保守結(jié)構(gòu)域分析
            2.1.4 DHAR基因家族成員保守結(jié)構(gòu)域分析
            2.1.5 GR基因家族成員保守結(jié)構(gòu)域分析
        2.2 AO、APX、MDHAR、DHAR、GR基因家族成員生物信息學(xué)鑒定
        2.3 AO、APX、MDHAR、DHAR、GR基因家族成員系統(tǒng)進(jìn)化分析
        2.4 RNA完整性與純度分析
        2.5 基因表達(dá)模式分析
            2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建
            2.5.2 AO家族在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式
            2.5.3 APX家族在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式
            2.5.4 MDHAR家族在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式
            2.5.5 DHAR家族在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式
            2.5.6 GR家族在草莓果實成熟過程中的表達(dá)模式
        2.6 AO、APX、MDHAR、DHAR和GR基因家族成員的表達(dá)與產(chǎn)物積累的相關(guān)性分析
    3 討論
第四章 需進(jìn)一步研究的內(nèi)容
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]獼猴桃GalUR表達(dá)與抗壞血酸積累的關(guān)系[J]. 李明軍,劉軍,梁東,郭春苗,馬鋒旺.  園藝學(xué)報. 2011(09)
[2]‘豐香’草莓果實發(fā)育過程中抗氧化物質(zhì)與活性氧代謝研究[J]. 羅婭,湯浩茹.  園藝學(xué)報. 2011(08)
[3]植物抗壞血酸氧化酶的研究進(jìn)展[J]. 郭燕,朱杰,許自成,張水成.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2008(03)
[4]低溫脅迫對草莓葉片SOD和AsA-GSH循環(huán)酶系統(tǒng)的影響[J]. 羅婭,湯浩茹,張勇.  園藝學(xué)報. 2007(06)
[5]草莓——維生素C女王[J]. 王云.  健康. 2007(06)
[6]維生素C的生物合成及其基因調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 劉永立,胡海濤,蘭大偉.  果樹學(xué)報. 2006(03)
[7]高效液相色譜法測定草莓中維生素C含量[J]. 王艷穎,姜國斌,胡文忠,范圣第,姜波.  大連大學(xué)學(xué)報. 2006(02)
[8]刺梨果實中維生素C積累與相關(guān)酶活性的關(guān)系[J]. 安華明,陳力耕,樊衛(wèi)國,劉慶林.  植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報. 2005(04)
[9]辣椒單脫氫抗壞血酸還原酶基因的克隆與序列分析[J]. 鄒禮平.  孝感學(xué)院學(xué)報. 2005(03)
[10]植物抗壞血酸過氧化物酶的作用機制、酶學(xué)及分子特性[J]. 孫衛(wèi)紅,王偉青,孟慶偉.  植物生理學(xué)通訊. 2005(02)

博士論文
[1]草莓抗壞血酸代謝相關(guān)酶基因apx和dhar的克隆、序列分析及其表達(dá)模式研究[D]. 侯艷霞.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]低溫脅迫與鍛煉對草莓生理特性的影響和草莓幾丁質(zhì)酶基因的克隆[D]. 羅婭.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]干旱脅迫和衰老過程中蘋果抗壞血酸代謝的研究[D]. 馬春花.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007

碩士論文
[1]草莓G6PDHs的克隆及其表達(dá)模式研究[D]. 于定群.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]RNA干擾草莓DHAR基因的初步研究[D]. 劉丹.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]番茄APX、AOBP、AO等Vc代謝相關(guān)基因的功能初步鑒定與分析[D]. 舒文波.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號:3654941

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