駱駝蓬堿酰胺衍生物對荔枝霜疫霉菌的作用與機理研究
發(fā)布時間:2022-02-22 14:45
駱駝蓬Peganum harmala L.是一種多年生草本植物,其次生代謝物駱駝蓬堿是β-咔啉類化合物,在藥理學(xué)研究中顯示出抗焦慮、鎮(zhèn)靜、抗瘧疾、抗腫瘤、抗氧化、消炎、抗病毒、抗真菌和驅(qū)蟲等廣泛的作用效果。荔枝霜疫霉菌Peronophythora litchii Chen為荔枝Litchii chinensis Sonn.主要的植物病原真菌之一,對荔枝果實的產(chǎn)量和品質(zhì)影響非常嚴(yán)重,每年都需要花大量的人力和物力進行防控。而且我國荔枝產(chǎn)區(qū)使用的殺菌劑有部分已經(jīng)產(chǎn)生抗藥性。酰胺類殺菌劑在防治卵菌綱中占有重要的地位,近期報道的新的酰胺類殺菌劑品種中,有不少對卵菌綱具有非常好的防治效果。以植物的次生代謝產(chǎn)物作為先導(dǎo)化合物開發(fā)新藥劑,是世界農(nóng)藥研究的一個新熱點。本文首次測定了29種駱駝蓬堿酰胺衍生物對六種植物病原真菌的抑制活性,進而選擇其中活性最強的化合物深入研究其對荔枝霜疫霉的活性、形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化過程及線粒體功能的影響,探究其作用機理,結(jié)果如下:利用生長速率法,以六種植物病原真菌作為目標(biāo)菌,篩選駱駝蓬堿酰胺衍生物的抑菌活性。結(jié)果表明,在100μg/mL濃度下,這些駱駝蓬酰胺堿衍生物對測定的六...
【文章來源】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
1.1 駱駝蓬堿及其研究進展
1.2 酰胺類殺菌劑
1.3 荔枝霜疫霉病
1.4 卵菌病害化學(xué)防治的研究進展
1.5 選題意義及研究思路
1.5.1 選題意義
1.5.2 研究思路
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 供試病原真菌
2.1.2 供試植物材料
2.1.3 供試駱駝蓬酰胺堿衍生物及其配制
2.1.4 供試培養(yǎng)基
2.1.5 主要儀器設(shè)備
2.1.6 主要試劑(包括試劑盒)
2.2 實驗方法
2.2.1 駱駝蓬酰胺堿衍生物活性篩選
2.2.2 駱駝蓬酰胺堿衍生物對荔枝霜疫霉的作用效果
2.2.2.1 離體葉片法
2.2.2.2 毒力方程測定
2.2.3 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生長發(fā)育與形態(tài)的影響
2.2.3.1 產(chǎn)孢量測定
2.2.3.2 孢子囊芽管萌發(fā)法
2.2.3.3 菌絲生長形態(tài)觀察
2.2.3.4 孢子囊萌發(fā)芽管形態(tài)觀察
2.2.3.5 掃描電鏡
2.2.3.6 透射電鏡
2.2.4 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生理生化的影響
2.2.4.1 胞外環(huán)境p H的變化
2.2.4.2 可溶性蛋白含量的變化
2.2.4.3 胞外還原性糖含量的變化
2.2.4.4 胞外水解酶(纖維素酶)活性的變化
2.2.4.5 丙二醛(MDA)含量的變化
2.2.4.6 NADH氧化酶(NOX)活性的變化
2.2.5 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌細胞線粒體功能的影響
2.2.5.1 線粒體緩沖液的制備
2.2.5.2 線粒體提取與處理
2.2.5.3 線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運孔(MPTP)開放度測定
2.2.5.4 線粒體跨膜電位(Δ?m)測定
2.2.5.5 線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性測定
2.2.6 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
3.1 駱駝蓬酰胺堿衍生物活性篩選
3.2 駱駝蓬酰胺堿衍生物對荔枝霜疫霉菌的抑菌活性
3.2.1 離體葉片法
3.2.2 毒力方程
3.3 化合物F4對荔枝霜疫霉菌生長發(fā)育與形態(tài)的影響
3.3.1 化合物F4對荔枝霜疫霉菌產(chǎn)孢量的影響
3.3.2 化合物F4對荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發(fā)與芽管伸長的的影響
3.3.3 菌絲形態(tài)變化觀察
3.3.4 孢子囊萌發(fā)芽管變化觀察
3.3.5 掃描電鏡(SEM)觀察
3.3.6 透射電鏡(TEM)觀察
3.4 化合物F4對荔枝霜疫霉菌生理生化的影響
3.4.1 胞外環(huán)境p H的影響
3.4.2 可溶性蛋白含量的影響
3.4.3 胞外還原性糖含量的影響
3.4.4 胞外水解酶(纖維素酶)活性的影響
3.4.5 丙二醛(MDA)含量的影響
3.4.6 NADH氧化酶(NOX)活性的影響
3.5 化合物F4對荔枝霜疫霉菌線粒體功能的影響
3.5.1 線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運孔(MPTP)開放度的影響
3.5.2 線粒體跨膜電位(Δ?m)的影響
3.5.3 線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性的影響
4 討論與結(jié)論
4.1 討論
4.1.1 駱駝蓬堿酰胺衍生物的抑菌活性
4.1.2 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生長發(fā)育與形態(tài)的抑制作用
4.1.3 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生理生化的抑制作用
4.1.4 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌細胞線粒體的抑制作用
4.2 結(jié)論
4.3 本研究的創(chuàng)新點
4.4 有待進一步的研究內(nèi)容
致謝
參考文獻
附錄A 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及獎勵情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]3-甲基-β-咔啉衍生物的合成及其抑菌活性[J]. 張前亮,李娜,楊蘇丁,張繼文,王俊儒,吳文君. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2013(04)
[2]我國荔枝產(chǎn)區(qū)殺菌劑的使用現(xiàn)狀及建議[J]. 彭埃天,凌金鋒,習(xí)平根,宋曉兵,冼繼東,姜子德. 中國熱帶農(nóng)業(yè). 2011(05)
[3]NADH氧化酶的研究進展[J]. 卿三紅,方柏山. 華僑大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(05)
[4]植物源殺菌劑的研究現(xiàn)狀[J]. 武月紅. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技. 2011(01)
[5]酰胺類除草劑制劑的研發(fā)和進展[J]. 華乃震. 現(xiàn)代農(nóng)藥. 2011(01)
[6]多粘類芽孢桿菌CP7對荔枝霜疫霉菌的抗菌活性及其作用機制[J]. 陳海英,林健榮,廖廖蘋,林碧敏. 園藝學(xué)報. 2010(07)
[7]啶菌噁唑?qū)Ψ鸦颐共【囊志饔醚芯縖J]. 陳鳳平,韓平,張真真,劉君麗,劉西莉. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2010(01)
[8]吡唑甲酰胺類農(nóng)藥的研究進展[J]. 劉婷,田輝凱,童益利,楊春龍,倪玨萍. 現(xiàn)代農(nóng)藥. 2009(06)
[9]從世界糧食的需求及世界農(nóng)業(yè)發(fā)展看農(nóng)藥的重要性[J]. 張一賓. 世界農(nóng)藥. 2009(01)
[10]我國植物源農(nóng)藥的研究及問題分析[J]. 叢大鵬. 農(nóng)藥研究與應(yīng)用. 2009(01)
博士論文
[1]苦參內(nèi)生真菌抑菌物質(zhì)純化鑒定及作用機制研究[D]. 何璐.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]丁吡嗎啉對辣椒疫霉菌細胞壁作用機理研究[D]. 葉玉濤.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[2]β-咔啉類生物堿的合成及其生物活性[D]. 楊冰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011
[3]丁吡嗎啉對辣椒疫霉菌的作用方式及作用機理探討[D]. 秦維彩.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]Cr(Ⅵ)對大鼠離體肝細胞線粒體呼吸功能的影響[D]. 鄧媛媛.中南大學(xué) 2010
本文編號:3639661
【文章來源】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
1.1 駱駝蓬堿及其研究進展
1.2 酰胺類殺菌劑
1.3 荔枝霜疫霉病
1.4 卵菌病害化學(xué)防治的研究進展
1.5 選題意義及研究思路
1.5.1 選題意義
1.5.2 研究思路
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 供試病原真菌
2.1.2 供試植物材料
2.1.3 供試駱駝蓬酰胺堿衍生物及其配制
2.1.4 供試培養(yǎng)基
2.1.5 主要儀器設(shè)備
2.1.6 主要試劑(包括試劑盒)
2.2 實驗方法
2.2.1 駱駝蓬酰胺堿衍生物活性篩選
2.2.2 駱駝蓬酰胺堿衍生物對荔枝霜疫霉的作用效果
2.2.2.1 離體葉片法
2.2.2.2 毒力方程測定
2.2.3 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生長發(fā)育與形態(tài)的影響
2.2.3.1 產(chǎn)孢量測定
2.2.3.2 孢子囊芽管萌發(fā)法
2.2.3.3 菌絲生長形態(tài)觀察
2.2.3.4 孢子囊萌發(fā)芽管形態(tài)觀察
2.2.3.5 掃描電鏡
2.2.3.6 透射電鏡
2.2.4 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生理生化的影響
2.2.4.1 胞外環(huán)境p H的變化
2.2.4.2 可溶性蛋白含量的變化
2.2.4.3 胞外還原性糖含量的變化
2.2.4.4 胞外水解酶(纖維素酶)活性的變化
2.2.4.5 丙二醛(MDA)含量的變化
2.2.4.6 NADH氧化酶(NOX)活性的變化
2.2.5 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌細胞線粒體功能的影響
2.2.5.1 線粒體緩沖液的制備
2.2.5.2 線粒體提取與處理
2.2.5.3 線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運孔(MPTP)開放度測定
2.2.5.4 線粒體跨膜電位(Δ?m)測定
2.2.5.5 線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性測定
2.2.6 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
3.1 駱駝蓬酰胺堿衍生物活性篩選
3.2 駱駝蓬酰胺堿衍生物對荔枝霜疫霉菌的抑菌活性
3.2.1 離體葉片法
3.2.2 毒力方程
3.3 化合物F4對荔枝霜疫霉菌生長發(fā)育與形態(tài)的影響
3.3.1 化合物F4對荔枝霜疫霉菌產(chǎn)孢量的影響
3.3.2 化合物F4對荔枝霜疫霉菌孢子囊萌發(fā)與芽管伸長的的影響
3.3.3 菌絲形態(tài)變化觀察
3.3.4 孢子囊萌發(fā)芽管變化觀察
3.3.5 掃描電鏡(SEM)觀察
3.3.6 透射電鏡(TEM)觀察
3.4 化合物F4對荔枝霜疫霉菌生理生化的影響
3.4.1 胞外環(huán)境p H的影響
3.4.2 可溶性蛋白含量的影響
3.4.3 胞外還原性糖含量的影響
3.4.4 胞外水解酶(纖維素酶)活性的影響
3.4.5 丙二醛(MDA)含量的影響
3.4.6 NADH氧化酶(NOX)活性的影響
3.5 化合物F4對荔枝霜疫霉菌線粒體功能的影響
3.5.1 線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運孔(MPTP)開放度的影響
3.5.2 線粒體跨膜電位(Δ?m)的影響
3.5.3 線粒體呼吸鏈復(fù)合物活性的影響
4 討論與結(jié)論
4.1 討論
4.1.1 駱駝蓬堿酰胺衍生物的抑菌活性
4.1.2 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生長發(fā)育與形態(tài)的抑制作用
4.1.3 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌生理生化的抑制作用
4.1.4 化合物F4處理對荔枝霜疫霉菌細胞線粒體的抑制作用
4.2 結(jié)論
4.3 本研究的創(chuàng)新點
4.4 有待進一步的研究內(nèi)容
致謝
參考文獻
附錄A 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及獎勵情況
【參考文獻】:
期刊論文
[1]3-甲基-β-咔啉衍生物的合成及其抑菌活性[J]. 張前亮,李娜,楊蘇丁,張繼文,王俊儒,吳文君. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2013(04)
[2]我國荔枝產(chǎn)區(qū)殺菌劑的使用現(xiàn)狀及建議[J]. 彭埃天,凌金鋒,習(xí)平根,宋曉兵,冼繼東,姜子德. 中國熱帶農(nóng)業(yè). 2011(05)
[3]NADH氧化酶的研究進展[J]. 卿三紅,方柏山. 華僑大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(05)
[4]植物源殺菌劑的研究現(xiàn)狀[J]. 武月紅. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技. 2011(01)
[5]酰胺類除草劑制劑的研發(fā)和進展[J]. 華乃震. 現(xiàn)代農(nóng)藥. 2011(01)
[6]多粘類芽孢桿菌CP7對荔枝霜疫霉菌的抗菌活性及其作用機制[J]. 陳海英,林健榮,廖廖蘋,林碧敏. 園藝學(xué)報. 2010(07)
[7]啶菌噁唑?qū)Ψ鸦颐共【囊志饔醚芯縖J]. 陳鳳平,韓平,張真真,劉君麗,劉西莉. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2010(01)
[8]吡唑甲酰胺類農(nóng)藥的研究進展[J]. 劉婷,田輝凱,童益利,楊春龍,倪玨萍. 現(xiàn)代農(nóng)藥. 2009(06)
[9]從世界糧食的需求及世界農(nóng)業(yè)發(fā)展看農(nóng)藥的重要性[J]. 張一賓. 世界農(nóng)藥. 2009(01)
[10]我國植物源農(nóng)藥的研究及問題分析[J]. 叢大鵬. 農(nóng)藥研究與應(yīng)用. 2009(01)
博士論文
[1]苦參內(nèi)生真菌抑菌物質(zhì)純化鑒定及作用機制研究[D]. 何璐.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]丁吡嗎啉對辣椒疫霉菌細胞壁作用機理研究[D]. 葉玉濤.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[2]β-咔啉類生物堿的合成及其生物活性[D]. 楊冰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011
[3]丁吡嗎啉對辣椒疫霉菌的作用方式及作用機理探討[D]. 秦維彩.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]Cr(Ⅵ)對大鼠離體肝細胞線粒體呼吸功能的影響[D]. 鄧媛媛.中南大學(xué) 2010
本文編號:3639661
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