黃瓜（Cucumis sativus L.）是我國和世界的主要蔬菜之一。隨著黃瓜基因組測序工作的完成,人們掌握了大量的黃瓜轉(zhuǎn)錄組、表達譜數(shù)據(jù)和眾多的基因資源,目前正在對基因功能進行分析。鑒于黃瓜轉(zhuǎn)基因效率較低,為了盡早確定基因的功能,人們多選擇擬南芥或煙草作為受體對黃瓜的基因功能進行分析,這在很大程度上延緩了人們對于黃瓜基因功能及其作用機制的理解,進而在一定程度上也延緩了黃瓜分子育種的速度。據(jù)上述現(xiàn)狀,結(jié)合目前黃瓜基因組信息已知,甲基磺酸乙酯誘變（Ethyl methane sulfonate,EMS）結(jié)合反向遺傳學(xué)定向誘導(dǎo)基因組局部突變（Targeting Induced Local Lesions In Genomes,TILIING）技術(shù)進行覆蓋整個黃瓜基因組的相關(guān)突變體庫構(gòu)建以及進行基因功能研究可以作為當(dāng)前黃瓜轉(zhuǎn)基因效率較低的一個有效的補充手段,加速黃瓜分子育種研究的進程。本研究選用東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黃瓜課題組提供的黃瓜649為材料,利用EMS誘變技術(shù),創(chuàng)制黃瓜突變體庫,結(jié)合TILLING技術(shù),選取黃瓜雌性基因F（Cs ACS1G）、苦味基因Bt、以及本課題組前期獲得耐低氮相關(guān)基因C... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 黃瓜功能基因組學(xué)的研究進展
    1.2 植物突變體庫研究進展
        1.2.1 突變體與植物突變體庫
        1.2.2 突變體庫構(gòu)建的技術(shù)
    1.3 TILLING技術(shù)
        1.3.1 TILLING技術(shù)基本原理及特點
        1.3.2 TILLING在植物中研究現(xiàn)狀
    1.4 研究目的及意義
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究意義
    1.5 主要研究內(nèi)容
        1.5.1 黃瓜EMS誘變突變體庫的創(chuàng)制
        1.5.2 黃瓜TILLING平臺初步構(gòu)建
    1.6 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 黃瓜突變體庫的創(chuàng)制
        2.1.1 試驗材料及試劑
        2.1.2 試驗方法
    2.2 TILLING平臺的構(gòu)建
        2.2.1 試驗材料及設(shè)備
        2.2.2 試驗方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 EMS誘變構(gòu)建黃瓜突變體庫
        3.1.1 EMS濃度的篩選
        3.1.2 黃瓜突變體庫的創(chuàng)制
        3.1.3 M_1和M_2植株突變表型鑒定
    3.2 TILLING平臺的初步構(gòu)建
        3.2.1 引物序列的設(shè)計
        3.2.2 外套擴增結(jié)果
        3.2.3 內(nèi)套擴增結(jié)果
        3.2.4 突變位點的檢測
4 討論
    4.1 黃瓜TILLING平臺的初步構(gòu)建
    4.2 黃瓜EMS誘變濃度篩選及突變體的初步鑒定
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]煙草激活標簽突變體庫的構(gòu)建與分析[D]. 劉峰.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014
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碩士論文
[1]甜瓜突變體庫的構(gòu)建及黃化突變體鑒定和表型分析[D]. 宋燕妮.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]EMS誘導(dǎo)黃瓜突變體的初步研究[D]. 張兵.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]粳稻“日本晴”突變體庫的創(chuàng)建和部分重要性狀的遺傳分析[D]. 阮伯勝.浙江大學(xué) 2008
[4]～（60）Co-γ射線對厚皮甜瓜的生物學(xué)效應(yīng)研究[D]. 劉芹.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[5]～（60）Co-γ射線輻照創(chuàng)造馬鈴薯突變株系的研究[D]. 史瑋.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



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