本研究以黑比諾不同組織及無核白、黑比諾不同發(fā)育時(shí)期胚珠以及黑比諾等9種有核葡萄和無核白等6種無核葡萄品種為材料,利用RT-PCR技術(shù)和病毒誘導(dǎo)基因沉默技術(shù),進(jìn)行VvABCG20基因的功能驗(yàn)證以及活性GA代謝過程關(guān)鍵基因的表達(dá)分析,以期從基因水平上尋求與葡萄胚珠敗育的相關(guān)作用因子,探究活性赤霉素對(duì)葡萄胚珠敗育的影響,為無核葡萄育種提供依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容如下:1、使用RT-PCR技術(shù)以黑比諾等9個(gè)有核品種及無核白等6個(gè)無核品種在胚珠發(fā)育的30d和60d的胚珠為材料,對(duì)胚珠特異性表達(dá)基因VvABCG20進(jìn)行克隆和表達(dá)分析,結(jié)果顯示VvABCG20在有核葡萄和無核葡萄中的序列差異不大,氨基酸匹配率達(dá)到99.28%,SNP分析也顯示雖然存在9個(gè)單核苷酸變異位點(diǎn),但僅有一個(gè)導(dǎo)致了相應(yīng)的氨基酸位點(diǎn)的變異,并且其表達(dá)存在明顯差異,在有核品種中的表達(dá)量明顯高于無核品種的表達(dá)量。2、以番茄Micro-Tom為材料,利用病毒誘導(dǎo)基因沉默技術(shù),對(duì)VvABCG20基因在番茄中的直系同源基因LeABCG20的功能進(jìn)行驗(yàn)證,與野生型番茄和TRV2空載體侵染的番茄相比,TRV2-LeABCG20-1侵染的番茄果實(shí)的半... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 無核葡萄胚珠敗育機(jī)理及相關(guān)基因的研究進(jìn)展
        1.1.1 無核葡萄的分類
        1.1.2 無核葡萄胚珠發(fā)育過程
        1.1.3 葡萄無核相關(guān)基因的研究進(jìn)展
    1.2 ABCG20基因的研究進(jìn)展
    1.3 赤霉素合成及失活相關(guān)基因研究進(jìn)展
    1.4 本研究的目的與意義
第二章 葡萄ABCG20基因的克隆與表達(dá)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 VvABCG20基因在多品種中的克隆及序列比對(duì)分析
        2.2.2 VvABCG20基因在不同葡萄品種中的表達(dá)分析
    2.3 討論
第三章 利用病毒誘導(dǎo)基因沉默技術(shù)鑒定VvABCG20基因功能
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 番茄中同源基因LeABCG20的克隆
        3.2.2 番茄中同源基因LeABCG20病毒誘導(dǎo)基因沉默載體構(gòu)建
        3.2.3 轉(zhuǎn)基因番茄基因沉默結(jié)果檢測(cè)
    3.3 討論
第四章 葡萄活性赤霉素合成關(guān)鍵基因VvGA3ox家族的克隆與表達(dá)分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 試驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 葡萄GA3ox家族成員的克隆與染色體定位
        4.2.2 葡萄GA3ox基因家族基因結(jié)構(gòu)分析
        4.2.3 葡萄GA3ox基因家族多序列比對(duì)以及系統(tǒng)發(fā)育樹分析
        4.2.4 葡萄GA3ox家族基因的表達(dá)分析
    4.3 討論
第五章 葡萄活性赤霉素失活關(guān)鍵基因VvGA2ox家族的克隆與表達(dá)分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗(yàn)材料
        5.1.2 試驗(yàn)方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 葡萄GA2ox家族成員的克隆與染色體定位
        5.2.2 葡萄GA2ox基因家族基因結(jié)構(gòu)分析
        5.2.3 葡萄GA2ox基因家族多序列比對(duì)以及系統(tǒng)發(fā)育樹分析
        5.2.4 葡萄GA2ox家族基因的表達(dá)分析
    5.3 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]葡萄胚珠發(fā)育相關(guān)基因βVPE及metacaspase家族的克隆與分析[D]. 鞏培杰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]無核葡萄胚株敗育過程差異表達(dá)基因和VPE家族的克隆與分析[D]. 李樹秀.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3598052