細(xì)葉百合（Lilium pumilum）是百合科（Liliaceae）百合屬（Lilium）多年生球根花卉,具有很高的觀賞價(jià)值和很強(qiáng)的抗逆性,可作為百合抗性育種的重要親本,但關(guān)于細(xì)葉百合抗性基因的研究少見報(bào)導(dǎo);金屬硫蛋白（metallothionein,簡(jiǎn)稱MT）是一類富含半胱氨酸和金屬離子的非酶類蛋白質(zhì),與植物抗鹽堿脅迫、抗氧化脅迫以及清除自由基等機(jī)制有關(guān)。本研究以細(xì)葉百合葉片的cDNA為模版,采用PCR技術(shù)克隆得到一段長(zhǎng)234bp,編碼77個(gè)氨基酸的MT2基因讀碼框序列,命名為L(zhǎng)pMT2,通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR（QRT-PCR）技術(shù)分析了其表達(dá)模式。構(gòu)建了 pBI121-LpMT2植物表達(dá)載體并成功轉(zhuǎn)化到細(xì)葉百合中,對(duì)過表達(dá)LpMT2細(xì)葉百合的抗逆性進(jìn)行了進(jìn)一步解析,主要研究結(jié)果如下:（1）從細(xì)葉百合中分離的LpMT2基因編碼蛋白具有Metallothio₂結(jié)構(gòu)域,屬于Metallothio₂超家族。氨基酸對(duì)比結(jié)果顯示,LpMT2與鐵皮石斛DcMT2、中華獼猴桃（原變種）AcMT2、大豆GmMT2以及擬南芥AtMT2a具有較高的同源性,推... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１細(xì)葉百合葉片總ＲＮＡ??

綱??ｔｏｏ??圖２－２?Ｚ＾ＭＴ２基因ｃＤＮＡ的ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??Ｍ：?ＤＭ２０００?ｍａｒｋｅｒ：?１：細(xì)葉百合／基因??Ｆｉｇ．?２－２?ＬｐＭＴ２?ｇｅｎｅ?ｉｎ?ａｍｐｌｉｆｉｅｄ?ｂｙ?ＰＣＲ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ２０００；?１：?ｃＤＮＡ?ｏｆ?ＬｐＭＴ２?ｇｅｎｅ?ｉｎ?Ｌ．?ｐｕｍｉｌｕｍ??２．３．１．２陽(yáng)性克隆的篩選與鑒定??利用ＰＣＲ擴(kuò)增反應(yīng)對(duì)過夜培養(yǎng)的大腸桿菌單克隆進(jìn)行驗(yàn)證，用凝膠電泳對(duì)其產(chǎn)物??進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖２－３。將條帶位置正確的菌液送至生物公司測(cè)序，將序列比對(duì)正確??的菌液保存至－８０°Ｃ備用。??＿??，＜＞〇??圖２－３?Ｚ／＾／７２基因陽(yáng)性克隆檢測(cè)??Ｍ：ＤＭ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１，２？？細(xì)葉百合?基因??Ｆｉｇ．２－３?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＬｐＭＴ２?ｇｅｎｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｃｌｏｎｅｓ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ２０００；?１，２：?ｃＤＮＡ?ｏｆ?ＬｐＭＴ２?ｇｅｎｅ?ｉｎ?Ｌ．?ｐｕｍｉｌｕｍ??－１４－??

２．３．１．２陽(yáng)性克隆的篩選與鑒定??利用ＰＣＲ擴(kuò)增反應(yīng)對(duì)過夜培養(yǎng)的大腸桿菌單克隆進(jìn)行驗(yàn)證，用凝膠電泳對(duì)其產(chǎn)物??進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖２－３。將條帶位置正確的菌液送至生物公司測(cè)序，將序列比對(duì)正確??的菌液保存至－８０°Ｃ備用。??＿??，＜＞〇??圖２－３?Ｚ／＾／７２基因陽(yáng)性克隆檢測(cè)??Ｍ：ＤＭ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１，２？？細(xì)葉百合?基因??Ｆｉｇ．２－３?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＬｐＭＴ２?ｇｅｎｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｃｌｏｎｅｓ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ２０００；?１，２：?ｃＤＮＡ?ｏｆ?ＬｐＭＴ２?ｇｅｎｅ?ｉｎ?Ｌ．?ｐｕｍｉｌｕｍ??－１４－??


本文編號(hào)：3584281