月季（Rosa chinensis）:薔薇科（Rosaceae）薔薇屬（Rosa）代表植物,多年生常綠木本。月季花姿挺拔、色彩豐富,香味怡人、花期長(zhǎng),一年多季開花、耐干旱耐貧瘠能力強(qiáng),被譽(yù)為花中皇后,是我國(guó)傳統(tǒng)十大名花之一,具有很高應(yīng)用價(jià)值以及商業(yè)價(jià)值。但是,由于薔薇屬植物遺傳背景十分復(fù)雜,經(jīng)過反復(fù)的雜交,具有高度的不育性。因此,利用傳統(tǒng)的植物育種方法對(duì)月季進(jìn)行遺傳改良具有很大的局限性。而植物的轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以利用外源基因定向改良其觀賞特性,成為培育月季新品種的新途徑。實(shí)驗(yàn)有以下成果:1、建立月季x快繁體系本實(shí)驗(yàn)室選育了一個(gè)二倍體月季新品系,與月月紅、月月粉形態(tài)特征十分相似,具有生長(zhǎng)快速、月月開花并能產(chǎn)生可育種子的優(yōu)勢(shì)。因?yàn)樯形凑矫?所以以x代稱。以月季x帶芽莖段為外植體,探究不同激素組合對(duì)其快繁苗生長(zhǎng)的影響,以篩選出最優(yōu)的培養(yǎng)基。研究結(jié)果表明,在MS+0.5mg/L BA+0.01mg/L NAA+0.1mg/L GA3+30g/L Sucrose+7.5g/L Agar的培養(yǎng)基上可以實(shí)現(xiàn)快速增殖。2、建立月季x再生體系以月季x的葉片、復(fù)葉柄為外植體建立月季x的再生體系。研究表明:... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 引言
    2 植物組織培養(yǎng)研究進(jìn)展
        2.1 植物體細(xì)胞胚形成的影響因素
            2.1.1 基因型
            2.1.2 外植體
            2.1.3 植物激素
            2.1.4 其它添加劑
        2.2 月季再生途徑研究進(jìn)展
    3 月季遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展
    4 DFR基因研究進(jìn)展
    5 本研究的目的與意義
第二章 月季x快繁體系及再生體系的的建立
    1 材料與方法
        1.1 植物材料
        1.2 培養(yǎng)條件和基本培養(yǎng)基
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
            1.3.1 月季x快繁體系的建立
                1.3.1.1 外植體消毒
                1.3.1.2 NAA、GA3對(duì)柄下芽生長(zhǎng)的影響
            1.3.2 月季x再生體系的建立
                1.3.2.1 外植體消毒
                1.3.2.2 不同激素對(duì)月季x愈傷組織的誘導(dǎo)的影響
                1.3.2.3 其它添加物對(duì)月季x體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的影響
                1.3.2.4 外植體類型對(duì)月季x愈傷組織的影響
                1.3.2.5 胚性愈傷組織的誘導(dǎo)
                1.3.2.6 體細(xì)胞胚的增殖
                1.3.2.7 體細(xì)胞胚/胚性愈傷的萌發(fā)
                1.3.2.8 生根培養(yǎng)及移栽
        1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 月季x快繁體系的建立
        2.2 月季x再生體系的建立
            2.2.1 激素對(duì)月季x愈傷組織的誘導(dǎo)的影響
            2.2.2 其它添加物對(duì)誘導(dǎo)月季x愈傷組織、體細(xì)胞胚的影響
            2.2.3 外植體類型對(duì)月季x愈傷組織的影響
            2.2.4 愈傷組織到體細(xì)胞胚、胚性愈傷的轉(zhuǎn)變
            2.2.5 體細(xì)胞胚的增殖
            2.2.6 體細(xì)胞胚/胚性愈傷的萌發(fā)
            2.2.7 生根培養(yǎng)及移栽
    3 討論
        3.1 月季x快繁體系的建立
        3.2 不同激素對(duì)月季x愈傷組織及體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)的影響
        3.3 其它添加物對(duì)誘導(dǎo)月季x愈傷組織、體細(xì)胞胚的影響
        3.4 體細(xì)胞胚的增殖
第三章 玫瑰RrDFR基因的轉(zhuǎn)化研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 遺傳轉(zhuǎn)化受體材料
            1.1.2 供試農(nóng)桿菌菌株和質(zhì)粒
            1.1.3 轉(zhuǎn)化主要生化試劑
        1.2 培養(yǎng)基配方
            1.2.1 LB培養(yǎng)基配方
            1.2.2 重懸液配方
            1.2.3 月季‘薩曼莎’轉(zhuǎn)化所用培養(yǎng)基配方
        1.3 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化方法
            1.3.1 農(nóng)桿菌菌液的制備
            1.3.2 體細(xì)胞胚的侵染和共培養(yǎng)
            1.3.3 選培培養(yǎng)
            1.3.4 抗性苗的獲得
            1.3.5 陽性檢測(cè)
        1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 抗性芽的獲得
        2.2 PCR檢測(cè)
        2.3 RrDFR轉(zhuǎn)基因植株表型觀測(cè)
    3 討論
        3.1 月季‘薩曼莎’RrDFR轉(zhuǎn)基因苗的獲得
        3.2 RrDFR基因?qū)υ录尽_曼莎’的影響
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]‘月月紅’月季體細(xì)胞胚胎發(fā)生和植株再生研究[J]. 易星,陳己任,胡博文,陳彥斌,李青,鄧子牛,熊興耀.  園藝學(xué)報(bào). 2014(04)
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[5]月季“黃和平”體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的初步研究[J]. 尤揚(yáng),金典生.  湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(10)
[6]月季“月月紅”（Rosa chinensis‘Slater’s crimson China’）愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生初報(bào)[J]. 晏慧君,張顥,蹇洪英,王其剛,邱顯欽,張婷,唐開學(xué).  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(01)
[7]不同激素及其濃度配比對(duì)深山薔薇嫩葉柄再生植株誘導(dǎo)的影響[J]. 顧地周,高捍東,王玉方,馮穎.  植物研究. 2010(04)
[8]月季、玫瑰遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 邢瀚文,季靜,王罡,杜長(zhǎng)城,楊少輝,宋英今.  天津農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(05)
[9]石斛蘭dfr基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 潘麗晶,范干群,張妙彬,肖楊,曹友培.  生物技術(shù)通報(bào). 2009(08)
[10]香水月季類原球莖（PLBs）途徑再生植株的研究[J]. 郭艷超,張倩,田傳衛(wèi),陳菊,趙梁軍.  中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(05)

博士論文
[1]樟樹體細(xì)胞胚再生體系的優(yōu)化和轉(zhuǎn)化Barnase、PaFT基因的研究[D]. 施雪萍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]月季品種‘薩蔓莎’植株再生體系的建立和根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化研究[D]. 高莉萍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005

碩士論文
[1]月季花快繁體系的建立和單瓣月季花再生體系初探[D]. 劉文竹.北京林業(yè)大學(xué) 2015
[2]四個(gè)月季品種體細(xì)胞胚誘導(dǎo)及遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D]. 劉娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]月季再生體系的建立和遺傳轉(zhuǎn)化初步研究[D]. 孟令寧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]月季不同途徑再生體系的建立與優(yōu)化及遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D]. 包穎.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[5]大花六道木體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的研究[D]. 孫倩婷.南京林業(yè)大學(xué) 2010
[6]‘月月粉’的再生及刺玫月季育種研究[D]. 林毅雁.北京林業(yè)大學(xué) 2010
[7]幾種百合組織培養(yǎng)及體細(xì)胞胚發(fā)生技術(shù)的研究[D]. 李筱帆.北京林業(yè)大學(xué) 2009
[8]不同金屬離子誘導(dǎo)枸杞體細(xì)胞胚發(fā)生及枸杞多倍體培育研究[D]. 天曉.內(nèi)蒙古師范大學(xué) 2008
[9]取材時(shí)期對(duì)水曲柳合子胚外植體體細(xì)胞胚胎發(fā)生的影響[D]. 張麗杰.東北林業(yè)大學(xué) 2006
[10]月季再生體系的建立及葉盤法轉(zhuǎn)化月季‘薩蔓莎’的研究[D]. 李敬蕊.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



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