為獲得月季新異花色,有效調(diào)控花色素代謝途徑,需要在月季轉(zhuǎn)基因研究中,首先選擇高效的組織特異性的啟動子,以提高外源基因在轉(zhuǎn)基因植物中的表達效率。同時為了使后續(xù)轉(zhuǎn)基因研究的更為深入,使外源基因在植物受體中表達調(diào)控的更為精準(zhǔn),應(yīng)當(dāng)盡量避免重復(fù)使用相同序列的啟動子片段以減小造成基因沉默的風(fēng)險。本研究旨在克隆得到月季花組織特異性的啟動子,使其驅(qū)動外源基因在月季花組織中高效的表達,通過對其進行嵌合增強子的改造,為多基因表達載體的構(gòu)建提供有效的調(diào)控元件,以期達到增強組織特異性啟動子表達活性的目的。本研究取得的主要結(jié)果如下:1.月季花快速繁殖體系的建立以“卡羅拉”月季當(dāng)年生枝條中段（半木質(zhì)化）的帶芽莖段為外植體,采用MS為基本培養(yǎng)基,添加NAA及6-BA的不同激素組合進行萌發(fā)、增殖及生根培養(yǎng)。通過馴化煉苗,在5-6個月內(nèi)獲得健壯的月季快繁植株。“卡羅拉”腋芽萌發(fā)的最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 2mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1,萌發(fā)率為96.67%;叢生芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA 2mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,增值系數(shù)為3.36;最適生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.... 

【文章來源】：新疆師范大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1. 文獻綜述
    1.1 植物啟動子概述
        1.1.1 啟動子結(jié)構(gòu)與特征
        1.1.2 啟動子的分類
        1.1.3 花組織特異性啟動子
        1.1.4 CHS啟動子
    1.2 增強子
        1.2.1 轉(zhuǎn)錄增強子
        1.2.2 翻譯增強子
    1.3 嵌合啟動子
        1.3.1 嵌合啟動子概述
        1.3.2 構(gòu)建嵌合啟動子的研究進展
        1.3.3 嵌合啟動子的構(gòu)建方法與策略
    1.4 本研究的目的、內(nèi)容及策略
        1.4.1 研究目的及內(nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
2 月季快速繁殖體系的建立
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 培養(yǎng)條件
        2.1.3 試驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 不同濃度植物生長調(diào)節(jié)劑組合對月季腋芽萌發(fā)的影響
        2.2.2 不同濃度植物生長調(diào)節(jié)劑配比對月季叢生芽增殖的影響
        2.2.3 不同濃度生長素NAA對月季叢生芽生根的影響
        2.2.4 練苗移栽
3 基因槍法瞬時轉(zhuǎn)化月季花瓣的體系建立
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 實驗方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 氦氣壓力對gus基因表達的影響
        3.2.2 轟擊距離對gus基因表達的影響
4 月季査爾酮合酶CHS單向嵌合啟動子的克隆及功能分析
    4.1 試驗材料和方法
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 試驗方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 月季CHS啟動子的染色體步移
        4.2.2 啟動子核心元件分析
        4.2.3 對照啟動子片段的克隆
        4.2.4 嵌合啟動子的設(shè)計合成
        4.2.5 CHS啟動子片段驅(qū)動gus基因的植物表達載體的構(gòu)建
        4.2.6 嵌合啟動子片段驅(qū)動gus基因的瞬時表達分析
結(jié)論
參考文獻
在讀期間發(fā)表的論文
后記


【參考文獻】：
期刊論文
[1]植物基因啟動子的類型及其應(yīng)用[J]. 胡廷章,羅凱,甘麗萍,石汝杰.  湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(01)
[2]特異性啟動子在植物基因工程中的應(yīng)用[J]. 于翠梅,馬蓮菊,張寶石.  生物工程學(xué)報. 2006(06)
[3]百合查爾酮合成酶（CHS）基因的克隆與分析[J]. 楊麗,劉雅莉,王躍進,徐偉榮.  西北植物學(xué)報. 2006(05)
[4]查爾酮合酶基因?qū)D(zhuǎn)基因植物花色和育性的影響[J]. 邵莉,李毅,楊美珠,宋云,陳章良,蕭師輝.  Acta Botanica Sinica. 1996(07)

博士論文
[1]中國華東葡萄抗白粉病芪合成酶基因及啟動子克隆與功能分析[D]. 徐偉榮.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010

碩士論文
[1]高強啟動子及其表達載體的研制[D]. 劉石娟.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002



本文編號：3558893