近些年來(lái),板栗疫病的發(fā)病率越來(lái)越高,對(duì)板栗樹(shù)的危害越來(lái)越嚴(yán)重,使板栗的產(chǎn)量大幅度減少,造成大量的經(jīng)濟(jì)損失,因此為了更好的對(duì)板栗疫病進(jìn)行防治,板栗疫病病菌病毒素的研究就越來(lái)越重要。本研究以栗疫菌（Endothia parasitica）強(qiáng)毒力菌株Cfcc82606為基礎(chǔ),探究栗疫菌毒素粗提液的基本理化性質(zhì),以此為基礎(chǔ),運(yùn)用各種有機(jī)溶劑萃取得到栗疫菌粗毒素,并且對(duì)粗毒素采用多次硅膠柱層析從中分離純化毒素,并運(yùn)用氣相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對(duì)分離純化的毒素進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析鑒定。主要的研究結(jié)果如下:1.將具有強(qiáng)致病力的栗疫菌菌株Cfcc82606（Endothia parasitica）的培養(yǎng)濾液,采用甲醇沉淀和離心得到蛋白和非蛋白類(lèi)部分,經(jīng)透析袋分析以及生物致病活性檢測(cè),推斷栗疫菌毒素為非蛋白類(lèi)小分子物質(zhì)。對(duì)非蛋白類(lèi)成分進(jìn)行不同的溫度、不同的PH值、不同時(shí)間的紫外線(xiàn)照射處理后,測(cè)定其致病活性的變化。結(jié)果表明:毒素有著較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性,經(jīng)過(guò)高壓高溫處理30min后,對(duì)板栗枝條仍具有致病性;毒素對(duì)酸堿性敏感,在酸性條件下毒性增強(qiáng),堿性條件下毒性減弱;紫外線(xiàn)的照射對(duì)毒素具有削弱作用。通過(guò)7種不同極性的... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 板栗的價(jià)值
    1.2 栗疫病菌
        1.2.1 栗疫病的起源及其分布
        1.2.2 栗疫病菌的生物學(xué)特性
    1.3 植物病原菌毒素的研究進(jìn)展
        1.3.1 植物病原真菌的致病因子
        1.3.2 毒素的類(lèi)型
        1.3.3 毒素的化學(xué)類(lèi)別
    1.4 毒素的提取技術(shù)與純化方法
        1.4.1 毒素的提取技術(shù)
        1.4.2 毒素的純化技術(shù)
        1.4.3 毒素組分分析技術(shù)
    1.5 毒素的生物活性檢測(cè)方法
        1.5.1 葉片枝條的測(cè)定
        1.5.2 根生長(zhǎng)測(cè)定法
        1.5.3 電解質(zhì)滲漏和其他測(cè)定法
    1.6 真菌毒素的應(yīng)用
        1.6.1 抗病育種
        1.6.2 解毒劑的應(yīng)用
        1.6.3 在真菌分類(lèi)中的應(yīng)用
    1.7 研究目的與意義
第二章 材料與方法
    2.1 材料試劑及儀器
        2.1.1 測(cè)試菌株
        2.1.2 植物材料
        2.1.3 主要試劑與藥品
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 培養(yǎng)基
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)路線(xiàn)
        2.2.1 栗疫菌Cfcc82606培養(yǎng)濾液的制備
        2.2.2 培養(yǎng)濾液中不同組分的致病性活性檢測(cè)
        2.2.3 栗疫菌Cfcc82606毒素粗提液的基本性質(zhì)測(cè)定
        2.2.4 毒素的寄主專(zhuān)化性測(cè)定
        2.2.5 病情指數(shù)計(jì)算
        2.2.6 栗疫菌Cfcc82606粗毒素的制備
        2.2.7 毒素的分離與純化
        2.2.8 毒素的組分分析
        2.2.9 純毒素生物檢測(cè)
    2.3 技術(shù)路線(xiàn)
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 栗疫菌致病成分的確定
    3.2 栗疫菌Cfcc82606非蛋白類(lèi)毒素的基本性質(zhì)
        3.2.1 毒素分子量大小
        3.2.2 溫度對(duì)非蛋白類(lèi)毒素的影響
        3.2.3 酸堿度對(duì)非蛋白類(lèi)毒素的影響
        3.2.4 紫外光對(duì)非蛋白類(lèi)毒素活性的影響
        3.2.5 非蛋白類(lèi)毒素的極性確定
        3.2.6 板栗疫菌非蛋白類(lèi)毒素的寄主專(zhuān)化性
    3.3 栗疫菌毒素的分離與純化
        3.3.1 不同溶劑提取的毒素紫外吸收光譜
        3.3.2 最佳展開(kāi)劑的確定
        3.3.3 第一次柱層析分離
        3.3.4 重復(fù)柱層析
        3.3.5 純化后毒素的純度檢測(cè)
    3.4 毒素各部分氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）分析
        3.4.1 毒素Ⅰ檢測(cè)結(jié)果分析
        3.4.2 毒素Ⅱ檢測(cè)結(jié)果分析
        3.4.3 毒素Ⅲ檢測(cè)結(jié)果分析
    3.5 純毒素生物檢測(cè)
第四章 結(jié)論與討論
    4.1 栗疫菌毒素的基本性質(zhì)
    4.2 栗疫菌毒素的萃取、純化
    4.3 栗疫菌毒素的本質(zhì)
    4.4 栗疫菌純毒素的生物活性檢測(cè)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]板栗的研究現(xiàn)狀[J]. 趙蘇嫻,韓偉,艾呈祥,沈廣寧.  落葉果樹(shù). 2011(05)
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[4]百日草鏈格孢菌粗毒素的生產(chǎn)、提取及穩(wěn)定性的研究[J]. 李榮金,強(qiáng)勝.  中國(guó)生物工程雜志. 2006(08)
[5]坪草腐霉病菌毒素產(chǎn)生除草活性物質(zhì)的條件優(yōu)化[J]. 張金林,龐民好,劉穎超,張利輝,董金皋.  河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(04)
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[7]玉米大斑病菌特異性毒素組分的分離與純化[J]. 張利輝,劉云惠,董金皋,李正平.  植物病理學(xué)報(bào). 2003(01)
[8]板栗自然居群疫病發(fā)生研究[J]. 劉德兵,魏軍亞,秦嶺,李紹鵬.  西北林學(xué)院學(xué)報(bào). 2002(04)
[9]肉桂枝枯病菌毒素的研究[J]. 王軍,李若英.  林業(yè)科學(xué)研究. 2002(04)
[10]植物病原真菌毒素[J]. 羅孟軍,朱天輝.  四川林業(yè)科技. 2001(03)

碩士論文
[1]水稻紋枯病菌毒素的提純、組分分析及鈍化[D]. 孟令軍.揚(yáng)州大學(xué) 2009
[2]立枯絲核菌毒素的產(chǎn)生及與致病力的關(guān)系[D]. 張華東.揚(yáng)州大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3544865